發(fā)布時(shí)間：2021-07-28 13:34

　　目的:優(yōu)化用于人胰液蛋白質(zhì)組研究的雙向電泳方法,篩選胰液腫瘤標(biāo)志物的侯選以及可能與發(fā)病機(jī)制相關(guān)的蛋白質(zhì)。方法:比較多種因素對(duì)雙向電泳圖譜質(zhì)量的影響。優(yōu)化的雙向電泳及圖像分析方法選取差異表達(dá)蛋白質(zhì)點(diǎn),經(jīng)質(zhì)譜分析等鑒定。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測胰腺癌相關(guān)蛋白質(zhì)在胰腺癌組織的基因表達(dá)。結(jié)果:1.獲得了重復(fù)性好、分辨率高的胰液雙向電泳圖譜。2.鑒定了在胰腺癌或慢性胰腺炎患者胰液標(biāo)本特異表達(dá)的7個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)。3.在胰腺癌患者胰液中鑒定的特異表達(dá)蛋白質(zhì)可以在組織中獲得基因表達(dá)水平的驗(yàn)證。結(jié)論:雙向電泳結(jié)合質(zhì)譜鑒定是胰液差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究的可靠平臺(tái)。胰腺癌患者胰液中特異表達(dá)的蛋白質(zhì)PSTI和TTR可能是胰液腫瘤標(biāo)志物的侯選,本研究提示了慢性炎癥與腫瘤發(fā)生機(jī)制可能聯(lián)系的相關(guān)依據(jù)。 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

Bardofdr標(biāo)準(zhǔn)曲線及胰液樣品蛋白質(zhì)含量測定示例

65mMD竹，.05%PIG緩沖液)復(fù)溶是優(yōu)化的標(biāo)本制備方法，8。林g上樣量可以在銀染的分析凝膠(pH3一10，13cmPIG膠條)上見到約80一90個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)(圖1.2b)，重復(fù)性和分辨率都優(yōu)于將胰液直接和泡脹液混合上樣;而考染即使上樣量達(dá)到100。“g也只能見到約30個(gè)點(diǎn)(圖1.4)a;應(yīng)用窄范圍PIG膠條(pH4一7，13cm)，140林g上樣量可以在銀染的分析凝膠上見到約1加個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)(圖1.2c);將上樣量提高到260林g并采用兼容Ms的銀染方案所獲得的圖譜同樣具有良好的重復(fù)性和分辨率(圖1.3a)。3.不同病理狀態(tài)的胰液標(biāo)本都可應(yīng)用本研究優(yōu)化的2一DE方法獲得穩(wěn)定的圖譜，它們均表現(xiàn)出一定程度的相似性(圖1.3)。弓汾‘’，二+·‘…圖1.1Bardofdr標(biāo)準(zhǔn)曲線及胰液樣品蛋白質(zhì)含量測定示例

慢性胰腺炎患者胰液標(biāo)本微量制備膠的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)切取圖像

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3308008