目的:有關(guān)幽門(mén)螺桿菌（Helicobacter Pylori,H.pylori）感染與PTEN/PI3K/Akt信號(hào)途徑在胃粘膜相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展中的關(guān)系目前尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究擬用H.pylori培養(yǎng)上清液作用胃上皮細(xì)胞,觀察H.pylori對(duì)胃上皮細(xì)胞PTEN/PI3K/Akt信號(hào)途徑的影響,探討H.pylori是否通過(guò)該信號(hào)途徑誘導(dǎo)胃粘膜上皮的細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的變化,引起胃粘膜上皮的損傷,而導(dǎo)致胃部疾病的發(fā)生,從而為H.pylori相關(guān)疾病的防治提供新思路。方法:1.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)四唑鹽（MTT）比色法結(jié)果,我們分組如下:GES-1細(xì)胞隨機(jī)分為:實(shí)驗(yàn)組（A、B、C組）給予H.pylori培養(yǎng)上清液作用,濃度分別為0.6、0.3、0.15mg/ml;陰性對(duì)照組（D組）和空白對(duì)照組（E組）,分別給予H.pylori培養(yǎng)液和DMEM液處理。2. MTT比色法用于檢測(cè)GES-1細(xì)胞存活率;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期;RT-PCR檢測(cè)PTEN mRNA;免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)PTEN蛋白的表達(dá);Western Blot檢測(cè)磷酸化Akt的表達(dá)。結(jié)果:1. H.pylori培養(yǎng)上清液能以時(shí)間和濃度依... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

H.pylori培養(yǎng)上清液對(duì)GES-1細(xì)胞存活率的影響

A 組 24h D 組 24h圖 3.2 細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期變化3.3 H.pylori 培養(yǎng)上清液對(duì) PTEN mRNA 表達(dá)的影響利用RT-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)，H.pylori作用GES-1細(xì)胞48h后，A組PTEN mRNA（1.05±0.06）表達(dá)顯著高于 D 組（0.54±0.05），P<0.01。（圖 3.3）圖 3.3 48h 時(shí) A、D 組 PTEN mRNA 表達(dá)注：M 為 MarkerⅠ；A：H.pylori（濃度為 0.6mg/ml）組； D：H.pylori 培養(yǎng)液作用組，作用 48h。

C 組 48h D 組 48hA 組 24h D 組 24h圖 3.2 細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期變化H.pylori 培養(yǎng)上清液對(duì) PTEN mRNA 表達(dá)的影響利用RT-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)，H.pylori作用GES-1細(xì)胞48h后，A組PTEN mRN5±0.06）表達(dá)顯著高于 D 組（0.54±0.05），P<0.01。（圖 3.3）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]幽門(mén)螺桿菌CagA+菌株對(duì)BGC-823細(xì)胞系Cx43表達(dá)及細(xì)胞增殖的影響[J]. 徐燦霞,齊艷美,楊文斌,王芬,周建黨,沈守榮.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(02)
[2]質(zhì)粒介導(dǎo)的RNAi抑制端粒酶活性[J]. 李燕,李明遠(yuǎn),彭穎,蔣中華,李婉宜,李虹.  生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2006(03)
[3]小干擾RNA對(duì)喉鱗狀細(xì)胞癌裸鼠移植瘤增殖細(xì)胞核抗原及p53蛋白表達(dá)的影響[J]. 周俊旭,周緒紅,陶澤璋,肖伯奎,陳始明,劉丹.  臨床耳鼻咽喉科雜志. 2006(06)
[4]幽門(mén)螺桿菌對(duì)胃上皮細(xì)胞株GES-1凋亡及XIAP表達(dá)的影響[J]. 宗紅,李建生,張金平,陳香宇,董子明.  山東醫(yī)藥. 2005(31)
[5]幽門(mén)螺桿菌感染與胃黏膜氧化性DNA損傷的研究[J]. 羅凌玉,呂農(nóng)華.  江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn). 2005(05)
[6]抑癌基因PTEN對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的抑制及作用機(jī)制[J]. 郭雙平,王文亮,王文勇,李擒龍.  中華腫瘤雜志. 2005(10)
[7]幽門(mén)螺桿菌對(duì)AGS細(xì)胞p53、p21WAF1/CIP1和p27KIP1基因轉(zhuǎn)錄的影響[J]. 李淑萍,嚴(yán)杰.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2005(02)
[8]胃癌前組織和胃癌中hTERT、Bcl-2蛋白的表達(dá)及其相互關(guān)系[J]. 王國(guó)安,劉海峰,房殿春,騰小春,陳剛,何俊堂.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2004(06)
[9]小分子干擾RNA特異性抑制胃癌SGC7901細(xì)胞人端粒酶催化亞單位基因表達(dá)的研究[J]. 馬晉平,詹文華,汪建平,彭俊生,高勁松,殷勤偉.  中華外科雜志. 2004(22)
[10]幽門(mén)螺桿菌對(duì)胃癌上皮細(xì)胞株AGS細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用及其分子機(jī)理探討[J]. 高文,胡伏蓮,呂有勇.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(09)



本文編號(hào)：3290283