目的探究人肝源性干細(xì)胞對酒精性脂肪肝保護作用及對刀豆蛋白A誘導(dǎo)急性肝損傷保護作用和機制。方法1.將88只C57BL/6小鼠隨機分成空白對照組、模型組、實驗組;模型組和實驗組按人肝源性干細(xì)胞（HYX1）預(yù)處理后注射ConA時間不同又各自分成3小時、6小時、12小時、24小時、48小時組;空白對照組尾靜脈注射PBS 200ul/只;模型組每只小鼠尾靜脈注射ConA 12mg/kg+PBS 200ul,實驗組每只小鼠尾靜脈注射ConA 12mg/kg+腹腔移植人肝源性干細(xì)胞PBS混懸液200ul（20代）;各組于注射ConA 24小時后,取血檢測ALT、AST、TBIL;每組肝臟標(biāo)本HE染色觀察病理學(xué)改變,并進行肝臟組織學(xué)評分。組間比較采用t檢驗,結(jié)果以`x±s表示,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.根據(jù)注射刀豆蛋白A后處死小鼠時間點的不同隨機將72只C57BL/6小鼠分成0小時、2小時、6小時、12小時、24小時五組,將只進行人肝源性干細(xì)胞干預(yù)的0小時組作為空白對照,余下每個時間點又分為模型組和干預(yù)組,每組8只。檢測血清ALT、AST水平;酶聯(lián)免疫吸附法（Elisa）檢測血清TNF... 

【文章來源】：濟南大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同代數(shù)的成體人肝源性干細(xì)胞附注2.1：A:第10代人肝源性干細(xì)胞B:第25代人肝源性干細(xì)胞C:第50代人肝源性干細(xì)胞

圖 2.2 各組肝臟損傷程度對比附注 2.2：C:空白對照組；M1：3 小時模型組；M2：6 小時模型組；M3：12 小時模型組；M4小時模型組；M5：48 小時模型組；E1：3 小時實驗組；E2：6 小時實驗組；E3：12 小時實驗E4：24 小時實驗組；E5：48 小時實驗組2.3.4 小鼠肝臟組織病理學(xué)評分對各組小鼠進行肝臟組織病理評分[30]，每個時間點實驗組得分均明顯小于相應(yīng)型組（P<0.05 或 P<0.01）。（表 2.4）表 2.4 Ishak 評分（ x ± s，分）時間點 模型組病理學(xué)評分 實驗組病理評分3h 13.32±1.3 3.5±0.21**6h 12.67±0.81 2.01±0.4**12h 14.57±0.65 2.13±0.25**24h 13.21±1.06 4.7±0.5**48h 15.07±1.58 8.6±0.83*表注 2.4：**P<0.01，* P <0.05VS 相應(yīng)模型組

3.3.1 肝臟功能血清學(xué)指標(biāo)的檢測從圖中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）以及天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST)檢測結(jié)果來看，僅移植人肝源性干細(xì)胞的空白對照組小鼠血清中 ALT、AST 水平與正常小鼠轉(zhuǎn)氨酶相比無差異。空白對照組小鼠、2 小時急性肝損傷模型組小鼠、2 小時人肝源性干細(xì)胞干預(yù)組小鼠之間相互對比兩種轉(zhuǎn)氨酶水平均沒有顯著性差異（P>0.05）；12h、24h 刀豆蛋白A 誘導(dǎo)的模型組小鼠血清 ALT 和 AST 水平較空白對照組顯著升高（P<0.01）；12 小時、24小時人肝源性干細(xì)胞干預(yù)組 ALT和AST水平較之相應(yīng)刀豆蛋白A誘導(dǎo)的肝損傷組顯著降低（P<0.05 或 P<0.01)。以上表明刀豆蛋白 A 建立小鼠肝損傷模型時，早期肝功能血清學(xué)指標(biāo)并未出現(xiàn)顯著改變，直到 6 小時后，刀豆蛋白 A 誘導(dǎo)的急性肝損傷組小鼠的肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平會明顯增加。人肝源性干細(xì)胞預(yù)處理小鼠 12 小時后能明顯改善小鼠肝損傷。（圖 3.1）


本文編號：3283514