肺纖維化（pulmonary fibrosis, PF）是受多種因素調(diào)控的肺間質(zhì)失常造成的,如肺部腫瘤的放療與化療等。肺纖維化的發(fā)生特別受大量細(xì)胞因子的影響。肺成纖維細(xì)胞在肺部結(jié)構(gòu)與功能的形成與維持上有重要的作用。目前針對(duì)肺纖維化的治療以糖皮質(zhì)激素、細(xì)胞毒性藥物為主要藥物,但是效果不是很良好,副作用多。探討肺纖維化的發(fā)病機(jī)制。研究治療肺纖維化的可能的新靶點(diǎn),是國(guó)內(nèi)外藥物研究的趨勢(shì)。雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是一種絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶,可以接受多種信號(hào)通路的信號(hào)刺激,激活轉(zhuǎn)錄并能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖。多篇文獻(xiàn)報(bào)道,負(fù)調(diào)控mTOR可以負(fù)性調(diào)控纖維化。位于mTOR信號(hào)通路的上游的TSC1-TSC2腫瘤抑制因子,在基因表達(dá)正常的情況下可以負(fù)性調(diào)控哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白激酶,阻斷該信號(hào)通路。TSC1的基因定位9q34.3, TSC2的基因定位于16P13.3[4,5],分別編碼錯(cuò)構(gòu)素及結(jié)節(jié)素。文獻(xiàn)報(bào)道高水平的結(jié)節(jié)素可以負(fù)調(diào)控細(xì)胞增殖,并且低水平的結(jié)節(jié)素會(huì)加快細(xì)胞的增殖。錯(cuò)構(gòu)素也可以負(fù)調(diào)控細(xì)胞增殖。最近研究發(fā)現(xiàn),活化的雷帕霉素靶蛋白激酶信號(hào)通路可以促進(jìn)腎成纖維細(xì)胞的激活,并且敲除TSC1基因的轉(zhuǎn)... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 細(xì)胞系
    2.2 試劑
    2.3 儀器與設(shè)備
    2.4 溶液和試劑的配制
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    3.2 pcDNA3-HA3-TSC1、pcDNA3-FLAG-TSC2、siRNA-MeCP2、pEGFP-C2-MeCP2轉(zhuǎn)染HELF
    3.3 焦磷酸測(cè)序
    3.4 Western bloting法檢測(cè)蛋白的表達(dá)
    3.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組HELF細(xì)胞周期
    3.6 數(shù)據(jù)處理
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 TGF-β1對(duì)HELF細(xì)胞的α-SMA與Collagen I蛋白的影響
    4.2 TGF-β1對(duì)HELF細(xì)胞TSC1,TSC2基因產(chǎn)物表達(dá)的影響
    4.3 過表達(dá)TSC1對(duì)HELF細(xì)胞α-SMA與Collagen I蛋白表達(dá)的
    4.4 過表達(dá)TSC2對(duì)HELF細(xì)胞α-SMA與Collagen I蛋白表達(dá)的影響
    4.5 TGF-β1對(duì)HELF細(xì)胞中TSC1、TSC2基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化程度的影響
    4.6 5-azadC對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HELF細(xì)胞TSC1與TSC2蛋白表達(dá)的影響
    4.7 MeCP2對(duì)HELF細(xì)胞增殖與分化的影響
5 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TSC基因的生物學(xué)作用[J]. 徐智芳,王建祥.  醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2008(05)



本文編號(hào)：3207883