RNAi沉默COX-2對HSC細胞動力學及脂質(zhì)代謝的影響
發(fā)布時間:2021-05-21 16:43
第一章COX-2基因shRNA干擾載體的構(gòu)建及抗肝纖維化作用目的構(gòu)建COX-2shRNA真核表達載體,并觀察其抗肝纖維化作用。方法1.分別從TRC shRNA、origene shRNA數(shù)據(jù)庫中選取1條大鼠COX2基因及2條人COX2基因序列,分別構(gòu)建3個COX-2ShRNA真核表達載體,進行酶切鑒定和測序;2.脂質(zhì)體介導重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HSC-T6細胞株,熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率,RT-PCR檢測COX-2mRNA表達, Western-Blot檢測COX-2蛋白質(zhì)表達;3.SD大鼠尾靜脈注射腺病毒介導的重組質(zhì)粒體內(nèi)轉(zhuǎn)染;12周末,處死大鼠;RT-PCR檢測肝組織COX-2mRNA表達,免疫組織化學檢測肝組織COX-2蛋白質(zhì)表達, HE、MASSON染色分析纖維病變程度,圖像分析儀測量肝組織纖維病變面積。結(jié)果1.酶切、測序、比對顯示,COX2-shRNA-1,2,3序列成功插入目的載體,且序列完全正確;2.熒光顯微鏡觀察顯示COX-2shRNA1、COX-2shRNA2、COX-2shRNA3轉(zhuǎn)染效率均在70%以上;3.RT-PCR和Western-Blot檢測證實,轉(zhuǎn)染后COX-2shR...
【文章來源】:南華大學湖南省
【文章頁數(shù)】:168 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
主要英文縮略語索引
中文摘要
Abstract
緒言
參考文獻
第一章 COX-2 基因 shRNA 干擾載體的構(gòu)建及抗肝纖維化作用
前言
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
第二章 RNAi 沉默 COX-2 對 HSC 基因表達譜的影響
前言
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
第三章 RNAi沉默COX-2對HSC細胞動力學及相關(guān)基因表達影響
前言
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
第四章 RNAi沉默COX-2對HSC脂肪代謝及相關(guān)基因表達的影響
前言
材料和方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述一
參考文獻
綜述二
參考文獻
讀博期間發(fā)表的主要論文及科研項目
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]pGC-silencer-U6/Neo/GFP/ABCG2真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[J]. 俞艷萍,張松,孔維佳. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2010(17)
[2]siRNA靶向Rac1真核表達載體的構(gòu)建與效應(yīng)檢測[J]. 張美霞,吳靜,辛梅,李娟娟,張軍軍,嚴密. 四川大學學報(醫(yī)學版). 2009(06)
[3]基因產(chǎn)物功能分類系統(tǒng)[J]. 師紅雯,黃原. 生命的化學. 2006(04)
[4]環(huán)氧合酶-2抑制劑尼美舒利對大鼠肝纖維化的影響[J]. 周筱艷,陽學風. 中華消化雜志. 2004(07)
[5]脂質(zhì)對大鼠肝星狀細胞低密度脂蛋白、高密度脂蛋白受體的影響[J]. 陸倫根,李繼強,華靜,茅益民,范竹萍,邱德凱. 中華肝臟病雜志. 2000(03)
[6]脂質(zhì)對肝星狀細胞表達前膠原Ⅰ、Ⅲ mRNA的影響[J]. 陸倫根,曾民德,李繼強,華靜,馬雄,茅益民,邱德凱,蕭樹東. 中華肝臟病雜志. 2000(02)
[7]Effects of Kupffer cells stimulated by triglyceride and very low-density lipoprotein on proliferation of rat hepatic stellate cells[J]. 陸倫根,曾民德,李繼強,華靜,范建高,范竹萍,邱德凱,蕭樹東. Chinese Medical Journal. 1999(04)
本文編號:3200044
【文章來源】:南華大學湖南省
【文章頁數(shù)】:168 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
主要英文縮略語索引
中文摘要
Abstract
緒言
參考文獻
第一章 COX-2 基因 shRNA 干擾載體的構(gòu)建及抗肝纖維化作用
前言
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
第二章 RNAi 沉默 COX-2 對 HSC 基因表達譜的影響
前言
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
第三章 RNAi沉默COX-2對HSC細胞動力學及相關(guān)基因表達影響
前言
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
第四章 RNAi沉默COX-2對HSC脂肪代謝及相關(guān)基因表達的影響
前言
材料和方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述一
參考文獻
綜述二
參考文獻
讀博期間發(fā)表的主要論文及科研項目
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]pGC-silencer-U6/Neo/GFP/ABCG2真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[J]. 俞艷萍,張松,孔維佳. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2010(17)
[2]siRNA靶向Rac1真核表達載體的構(gòu)建與效應(yīng)檢測[J]. 張美霞,吳靜,辛梅,李娟娟,張軍軍,嚴密. 四川大學學報(醫(yī)學版). 2009(06)
[3]基因產(chǎn)物功能分類系統(tǒng)[J]. 師紅雯,黃原. 生命的化學. 2006(04)
[4]環(huán)氧合酶-2抑制劑尼美舒利對大鼠肝纖維化的影響[J]. 周筱艷,陽學風. 中華消化雜志. 2004(07)
[5]脂質(zhì)對大鼠肝星狀細胞低密度脂蛋白、高密度脂蛋白受體的影響[J]. 陸倫根,李繼強,華靜,茅益民,范竹萍,邱德凱. 中華肝臟病雜志. 2000(03)
[6]脂質(zhì)對肝星狀細胞表達前膠原Ⅰ、Ⅲ mRNA的影響[J]. 陸倫根,曾民德,李繼強,華靜,馬雄,茅益民,邱德凱,蕭樹東. 中華肝臟病雜志. 2000(02)
[7]Effects of Kupffer cells stimulated by triglyceride and very low-density lipoprotein on proliferation of rat hepatic stellate cells[J]. 陸倫根,曾民德,李繼強,華靜,范建高,范竹萍,邱德凱,蕭樹東. Chinese Medical Journal. 1999(04)
本文編號:3200044
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