第一章COX-2基因shRNA干擾載體的構(gòu)建及抗肝纖維化作用目的構(gòu)建COX-2shRNA真核表達(dá)載體，并觀察其抗肝纖維化作用。方法1.分別從TRC shRNA、origene shRNA數(shù)據(jù)庫(kù)中選取1條大鼠COX2基因及2條人COX2基因序列，分別構(gòu)建3個(gè)COX-2ShRNA真核表達(dá)載體，進(jìn)行酶切鑒定和測(cè)序；2.脂質(zhì)體介導(dǎo)重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞株,熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率,RT-PCR檢測(cè)COX-2mRNA表達(dá), Western-Blot檢測(cè)COX-2蛋白質(zhì)表達(dá)；3.SD大鼠尾靜脈注射腺病毒介導(dǎo)的重組質(zhì)粒體內(nèi)轉(zhuǎn)染；12周末,處死大鼠；RT-PCR檢測(cè)肝組織COX-2mRNA表達(dá),免疫組織化學(xué)檢測(cè)肝組織COX-2蛋白質(zhì)表達(dá), HE、MASSON染色分析纖維病變程度,圖像分析儀測(cè)量肝組織纖維病變面積。結(jié)果1.酶切、測(cè)序、比對(duì)顯示，COX2-shRNA-1,2,3序列成功插入目的載體，且序列完全正確；2.熒光顯微鏡觀察顯示COX-2shRNA1、COX-2shRNA2、COX-2shRNA3轉(zhuǎn)染效率均在70%以上；3.RT-PCR和Western-Blot檢測(cè)證實(shí),轉(zhuǎn)染后COX-2shR... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：168 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
主要英文縮略語(yǔ)索引
中文摘要
Abstract
緒言
    參考文獻(xiàn)
第一章 COX-2 基因 shRNA 干擾載體的構(gòu)建及抗肝纖維化作用
    前言
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二章 RNAi 沉默 COX-2 對(duì) HSC 基因表達(dá)譜的影響
    前言
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三章 RNAi沉默COX-2對(duì)HSC細(xì)胞動(dòng)力學(xué)及相關(guān)基因表達(dá)影響
    前言
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第四章 RNAi沉默COX-2對(duì)HSC脂肪代謝及相關(guān)基因表達(dá)的影響
    前言
    材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述一
    參考文獻(xiàn)
綜述二
    參考文獻(xiàn)
讀博期間發(fā)表的主要論文及科研項(xiàng)目
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3200044