研究背景和目的:SIGIRR是新近發(fā)現(xiàn)的TLR/IL-1R超家族成員之一,能夠負性調(diào)控TLR/IL-1信號傳導(dǎo)通路,并主要在調(diào)控胃腸道系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)中起重要作用。IL-1F5是一新的IL-1家族成員,有研究發(fā)現(xiàn)通過其與SIGIRR相互作用可抑制LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。兩者都是TLR/IL-1信號傳導(dǎo)通路的負性調(diào)節(jié)因子,有望成為IBD治療的新靶點。為此,通過本文研究了TLR/IL-1信號傳導(dǎo)通路及其抑制因子SIGIRR和IL-1F5在LPS作用的腸上皮細胞中的變化,以及外源性SIGIRR和IL-1F5對上述細胞內(nèi)TLR/IL-1信號傳導(dǎo)通路的影響,并闡明其負性調(diào)節(jié)機制,為其用于IBD的治療的體內(nèi)研究提供實驗依據(jù)。方法:1.實驗分組具體如下:①對照組1:T84細胞;②對照組2:轉(zhuǎn)染了空白對照質(zhì)粒的T84細胞;③對照組3:轉(zhuǎn)染了SIGIRR基因的T84細胞;④實驗組1:T84細胞+1μg/ml LPS;⑤實驗組2:轉(zhuǎn)染了空白對照質(zhì)粒的T84細胞+1μg/ml LPS;⑥實驗組3:轉(zhuǎn)染了SIGIRR基因的T84細胞+1μg/ml LPS;以上各組均包含5ng/ml IL-1F5預(yù)處理和未處理兩部... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 細胞培養(yǎng)試驗相關(guān)試劑
        2.1.3 儀器設(shè)備
        2.1.4 主要溶液
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 含質(zhì)粒大腸桿菌的擴增和質(zhì)粒提取
        2.2.3 IL-1F5 預(yù)處理
        2.2.4 脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pUNO-hSIGIRR 質(zhì)粒和pUNO 質(zhì)粒
        2.2.5 LPS 處理
        2.2.6 RT-PCR 技術(shù)檢測各組T84 細胞中SIGIRR、TLR2、TLR4和MyD88 mRNA 含量
        2.2.7 MTT 法檢測IL-1F5 和LPS 作用細胞前后細胞增殖情況
    2.3 統(tǒng)計分析
第3章 結(jié)果
    3.1 提取質(zhì)粒的PCR 鑒定結(jié)果
    3.2 SIGIRR 轉(zhuǎn)染結(jié)果
    3.3 LPS 對各組T84 細胞內(nèi)SIGIRR mRNA 表達的影響
    3.4 IL-1F5 對各組T84 細胞內(nèi)SIGIRR mRNA 表達的影響
    3.5 LPS 對各組T84 細胞內(nèi)TLR2 mRNA 表達的影響
    3.6 IL-1F5 對各組T84 細胞內(nèi)TLR2 mRNA 表達的影響
    3.7 LPS 對各組T84 細胞內(nèi)TLR4 mRNA 表達的影響
    3.8 IL-1F5 對各組T84 細胞內(nèi)TLR4 mRNA 表達的影響
    3.9 LPS 對各組T84 細胞內(nèi)MyD88 mRNA 表達的影響
    3.10 IL-1F5 對各組T84 細胞內(nèi)MyD88 mRNA 表達的影響
    3.11 IL-1F5 和LPS 對 T84 細胞活力的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附帶綜述


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Role of the intestinal barrier in inflammatory bowel disease[J]. Mike G Laukoetter,Porfirio Nava,Asma Nusrat.  World Journal of Gastroenterology. 2008(03)
[2]對我國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見[J]. 歐陽欽,胡品津,錢家鳴,鄭家駒,胡仁偉.  胃腸病學(xué). 2007(08)



本文編號：3198903