目的:明確RhoA/ROCK1信號(hào)通路對(duì)骨髓干細(xì)胞（Bone marrow stem cells BMSCs）向肝細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響,為BMSCs肝向分化的調(diào)控機(jī)制提供一個(gè)新的切入靶點(diǎn),也為臨床更好的應(yīng)用BMSCs移植治療肝硬化提供理論依據(jù)。方法:1.構(gòu)建pcDNA3.1（+）-RhoA,pLVX-shRNA1-RhoA載體,通過(guò)Lipofectamine?2000轉(zhuǎn)染入BMSCs。體外培養(yǎng)BMSCs,進(jìn)行分組:BMSCs細(xì)胞組（正常對(duì)照組）、pcDNA3.1（+）-HK組（過(guò)表達(dá)RhoA空載體組）、pcDNA3.1（+）-RhoA組（過(guò)表達(dá)RhoA組）、pLVX-shRNA1-HK組（沉默RhoA空載體組）、pLVX-shRNA1-RhoA組（沉默RhoA組）。2.細(xì)胞轉(zhuǎn)染后,每組加入20ng/ml濃度的肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（Hepatocyte growth factor HGF）體外誘導(dǎo)培養(yǎng),運(yùn)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。用免疫熒光法檢測(cè)各組BMSCs中肝細(xì)胞特異蛋白甲胎蛋白（AFP）的表達(dá)情況。Western blot技術(shù)檢測(cè)各組BMSCs的相關(guān)蛋白R(shí)hoA、RO... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
資金資助
摘要
Abstract
主要英文縮略語(yǔ)索引
第1章 前言
第2章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 試劑配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 細(xì)胞分組
        2.3.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.3.4 MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖
        2.3.5 Western Blot檢測(cè)
        2.3.6 免疫熒光染色
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 轉(zhuǎn)染后不同時(shí)間段BMSCs的光鏡下形態(tài)學(xué)改變
    3.2 MTT檢測(cè)調(diào)控RhoA對(duì) BMSCs增殖的影響
    3.3 調(diào)控RhoA基因?qū)MSCs內(nèi) RhoA/ROCK1 通路相關(guān)蛋白R(shí)hoA、ROCK1和p-MLC蛋白表達(dá)情況影響
    3.4 AFP的免疫熒光表
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
碩士期間撰寫論文及獲獎(jiǎng)情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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