核激素受體（Nuclear20hormone20receptors,20NHRs）是一類配體依賴性的轉(zhuǎn)錄因子,參與體內(nèi)眾多的生理過(guò)程。他們能與小分子配體結(jié)合而調(diào)節(jié)其靶基因表達(dá)。法尼酯衍生物X受體（Farnesoid20X20Receptor,20FXR）是核激素受體超家族成員之一。FXR具有典型的NHR家族結(jié)構(gòu)。目前的研究發(fā)現(xiàn)FXR在調(diào)控膽汁酸、脂蛋白和葡萄糖代謝、肝再生、腸道細(xì)菌生長(zhǎng)以及肝毒素應(yīng)答反應(yīng)等過(guò)程中扮演重要作用。FXR被視為體內(nèi)膽汁酸感應(yīng)器,通過(guò)調(diào)節(jié)膽汁酸合成限速酶cholesterol20720alpha-hydroxylase20（CYP7A1）活性而調(diào)控體內(nèi)膽汁酸的穩(wěn)態(tài)。在肝臟中,膽固醇被代謝形成膽汁酸。最近的研究發(fā)現(xiàn)膽汁酸不僅可以作為生理溶劑以有利于脂溶性維生素和脂肪的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和分布,還可以作為信號(hào)分子以激活核受體并調(diào)節(jié)膽汁酸和膽固醇代謝。膽汁酸也具有細(xì)胞毒性,當(dāng)膽汁酸在體內(nèi)超過(guò)正常水平時(shí),從而引起肝損傷,引起膽汁淤積,甚至肝癌。三萜類化合物廣泛存在于植物界、中草藥以及人們的飲食中。到目前,人們已發(fā)現(xiàn)超過(guò)4000種不同三萜類化合物。甘草次酸（Glycyrrheti... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 核激素受體
        1.1.1 核激素受體分類
        1.1.2 核激素受體結(jié)構(gòu)
            1.1.2.1 調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域（modulator）
            1.1.2.2 DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（DNA-binding domain, DBD）
            1.1.2.3 鉸鏈區(qū)（hinge region）
            1.1.2.4 配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域（ligand-binding domain, LBD）
        1.1.3 核激素受體發(fā)生作用的機(jī)制
        1.1.4 法呢醇X受體（Farnesoid X Receptor, FXR）
            1.1.4.1 FXR基因分類
            1.1.4.2 FXR結(jié)構(gòu)
            1.1.4.3 共調(diào)節(jié)因子（coregulator）
            1.1.4.4 FXR與膽汁酸代謝
            1.1.4.5 FXR與肝保護(hù)
            1.1.4.6 FXR與肝再生
            1.1.4.7 FXR與炎癥反應(yīng)
    1.2 三萜類化合物甘草次酸和齊墩果酸
        1.2.1 甘草次酸（6a）和甘草甜素（6b）
        1.2.2 齊墩果酸
第二章 前言
第三章 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 質(zhì)粒和細(xì)胞系
            3.1.1.1 質(zhì)粒
            3.1.1.2 細(xì)胞系
        3.1.2 試劑
        3.1.3 儀器及耗材
        3.1.4 溶液
    3.2 方法
        3.2.1 質(zhì)粒構(gòu)建與表達(dá)
            3.2.1.1 質(zhì)粒構(gòu)建
            3.2.1.2 感受態(tài)制作
            3.2.1.3 轉(zhuǎn)化
        3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
            3.2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
            3.2.2.2 細(xì)胞傳代
            3.2.2.3 細(xì)胞凍存
            3.2.2.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)
            3.2.2.5 細(xì)胞活力檢測(cè)
        3.2.3 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        3.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR
            3.2.4.1 細(xì)胞總RNA提取
            3.2.4.2 逆轉(zhuǎn)錄PCR
        3.2.5 蛋白表達(dá)和純化
            3.2.5.1 蛋白表達(dá)
            3.2.5.2 蛋白純化
        3.2.6 BIAcore3000 分子間相互作用分析
        3.2.7 統(tǒng)計(jì)分析
第四章 結(jié)果與分析
    4.1 甘草次酸選擇性調(diào)節(jié)FXR
        4.1.1 GL30 下調(diào)CDCA引起的FXR-LBD活性
        4.1.2 LC/MS分析甘草甜素（GL）成分
        4.1.3 β-GA對(duì)FXR-LBD活性的影響
        4.1.4 β-GA對(duì)其他核激素受體活性的影響
        4.1.5 FXR表達(dá)與純化
        4.1.6 β-GA與FXR-LBD蛋白相互結(jié)合并且能部分地阻止FXR-LBD蛋白與共激活因子SRC-3 的相互作用
        4.1.7 β-GA對(duì)SHP啟動(dòng)子的影響
        4.1.8 β-GA對(duì)FXR靶基因的影響
        4.1.9 討論
    4.2 OA是FXR選擇性的調(diào)節(jié)子
        4.2.1 OA抑制FXR-LBD活性
        4.2.2 OA與FXR-LBD蛋白相互結(jié)合并且能部分地阻止FXR-LBD蛋白與共激活因子SRC-3 的相互作用
        4.2.3 OA對(duì)FXR靶基因的影響
        4.2.4 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間取得的與學(xué)位論文相關(guān)的成果



本文編號(hào)：3178758