背景肝纖維化（hepatic fibrosis,HF）是一種以多種病因?qū)е碌穆愿闻K損害為基礎(chǔ)、涉及多個(gè)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而發(fā)生自我修復(fù)所產(chǎn)生的病理改變,其最終結(jié)局可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。大量研究表明,在HF發(fā)生的病理過程中,甚至是早期肝硬化階段,經(jīng)采取有效的防治措施后,其病理進(jìn)程是有可能逆轉(zhuǎn)的。研究證實(shí),活化的肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cell,HSCs）在HF發(fā)展的病理進(jìn)程中起到舉足輕重的作用。自噬（autophagy）,是真核細(xì)胞中廣泛存在的一種代謝過程,正常細(xì)胞中,胞內(nèi)衰老的細(xì)胞器及其他結(jié)構(gòu)被自噬體吞噬并轉(zhuǎn)運(yùn)至線粒體進(jìn)行β氧化,提供能量。在HSCs中,儲(chǔ)存于內(nèi)的脂滴被自噬體吞噬并轉(zhuǎn)運(yùn)至線粒體進(jìn)行β氧化,為HSCs的活化提供能量。有研究結(jié)果顯示,降低HSCs內(nèi)自噬的水平,可降低肝纖維化程度。褪黑素（melatonin,MEL）,擁有抗氧化作用,課題組前期研究結(jié)果表明,MEL可通過抑制氧化應(yīng)激及TGF-β/Smad信號通路從而發(fā)揮抗肝纖維化作用,而MEL對肝纖維化模型及HSCs中自噬作用的影響仍未完全清楚,本文旨在四氯化碳（carbon tetrachloride,C... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮寫詞匯表
中文摘要
英文摘要
1.前言
2.材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 藥物及試劑
        2.1.3 部分實(shí)驗(yàn)試劑制備方法
        2.1.4 部分實(shí)驗(yàn)設(shè)備和儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 CCl4誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性肝纖維化大鼠模型的建立
        2.2.2 大鼠肝臟組織病理檢查
        2.2.3 免疫組化法測定肝組織中肝星狀細(xì)胞激活水平及自噬表達(dá)水平
        2.2.4 western blotting測定肝組織中肝星狀細(xì)胞激活水平及自噬表達(dá)水平
        2.2.5q RT-PCR測定肝組織中自噬表達(dá)水平
        2.2.6 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.7 MTT實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 western blotting測定肝星狀細(xì)胞激活水平及自噬表達(dá)水平
        2.2.9 qRT-PCR測定肝星狀細(xì)胞中自噬表達(dá)水平
        2.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3.結(jié)果
    3.1 褪黑素對肝纖維化大鼠模型中肝星狀細(xì)胞的激活及自噬作用的影響
        3.1.1 大鼠肝臟病理實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1.2 免疫組化法測定肝組織中肝星狀細(xì)胞激活水平及自噬表達(dá)水平
        3.1.3 western blotting法測定肝組織中肝星狀細(xì)胞激活水平及自噬表達(dá)水平
        3.1.4 qRT-PCR測定肝纖維化組織中自噬表達(dá)水平
    3.2 褪黑素對肝星狀細(xì)胞HSC-T6的激活及自噬作用的影響
        3.2.1 MTT法測定褪黑素對PDGF-BB激活的HSC-T6細(xì)胞增殖的影響
        3.2.2 western blotting測定HSCs激活水平、COLⅠ表達(dá)水平及自噬表達(dá)
        3.2.3 qRT-PCR測定褪黑素對肝星狀細(xì)胞HSC-T6自噬表達(dá)水平的影響
4.討論
    4.1 CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化模型的建立
    4.2 HSCs與肝纖維化的關(guān)系
    4.3 自噬與肝纖維化的關(guān)系
    4.4 褪黑素對HF作用及其對自噬的影響
5.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]褪黑素抑制肝星狀細(xì)胞增殖的機(jī)制研究[J]. 謝園園,洪汝濤,汪玉榮.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(09)
[2]褪黑素對大鼠肝纖維化的保護(hù)作用及其對TGF-β1表達(dá)的影響[J]. 汪玉榮,洪汝濤,謝園園.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(09)
[3]肝纖維化發(fā)生機(jī)制研究新進(jìn)展[J]. 陳宵瑜,楊長青.  實(shí)用肝臟病雜志. 2016(01)
[4]腹腔注射低濃度四氯化碳建立小鼠肝纖維化模型[J]. 李少華,邱玲,程歆琦,李霽,杜順達(dá),毛一雷.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2014(12)
[5]肝星型細(xì)胞分離方法和功能研究進(jìn)展[J]. 李嚴(yán)嚴(yán),姜穎.  生物工程學(xué)報(bào). 2014(07)
[6]誘導(dǎo)活化肝星狀細(xì)胞凋亡主要信號通路的研究進(jìn)展[J]. 潘圓未,平鍵,徐列明.  臨床肝膽病雜志. 2014(02)
[7]三種不同給藥途徑建立小鼠肝硬化模型的比較[J]. 田源,鄧媛媛.  山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào). 2012(05)
[8]大鼠肝纖維化模型建立及肝纖維化的檢測[J]. 黃迪,古維立,胡志文,張帥,王成興.  廣州醫(yī)藥. 2012(05)
[9]褪黑素對大鼠肝纖維化的影響及部分機(jī)制研究[J]. 洪汝濤,許建明,沈繼龍,梅俏,胡元生,羅慶禮.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2012(08)
[10]Hepatitis B:Epidemiology and prevention in developing countries[J]. Elisabetta Franco,Barbara Bagnato,Maria Giulia Marino,Cristina Meleleo,Laura Serino,Laura Zaratti.  World Journal of Hepatology. 2012(03)



本文編號：3172390