發(fā)布時(shí)間：2021-05-06 01:09

　　目的：探討同種異體移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠重癥急性胰腺炎并發(fā)心肌、肺損傷的價(jià)值及其機(jī)制，為臨床應(yīng)用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療重癥急性胰腺炎心肌、肺損傷提供實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。方法：通過全骨髓貼壁法培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）至第三代備用；經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)鑒定BMSCs。將90只健康雌性SD大鼠，體重200±20g,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組（S組）、模型組（SAP組）和治療組（B組）。SAP組、B組采用胰腺被膜下多點(diǎn)注射4％�；悄懰徕c（0.5ml/kg）復(fù)制SAP模型。造模后24h經(jīng)大鼠尾靜脈注射1mlBMSCs懸液（1.0×106個(gè)/mL）于S組和B組，而SAP組只注射1mlPBS。于移植后第1、7、14d通過腹主動(dòng)脈放血法將大鼠分批處死，采集血清檢測血淀粉酶（AMY）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）；用ELISA法檢測血清TNF-a、IL-10；并將胰腺、心肌及肺組織置于4%中性甲醛溶液中固定，常規(guī)切片、HE染色；采用免疫組織化學(xué)方法檢測心肺組織中TNF-a、IL-10的表達(dá)。結(jié)果：1、通過全骨髓貼壁法可提取骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，10h后可見少許細(xì)胞貼壁，培養(yǎng)至第10天即可生長約90%融合，... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞對(duì)照表
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        2.1.2 藥品及試劑
        2.1.3 主要儀器及器材
    2.2 方法
        2.2.1 動(dòng)物分組
        2.2.2 大鼠 BMSCs 的提取、分離、擴(kuò)增、培養(yǎng)與鑒定
        2.2.3 重癥急性胰腺炎模型的建立和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的移植
        2.2.4 標(biāo)本的獲取及處理
        2.2.5 血清淀粉酶和 CK-MB 檢測
        2.2.6 血清 TNF-α的測定
        2.2.7 血清 IL-10 的測定
        2.2.8 BMSCs 的在體鑒定
        2.2.9 胰腺組織、肺臟組織、心臟組織病理學(xué)變化
        2.2.10 免疫組織化學(xué)染色
        2.2.11 統(tǒng)計(jì)方法
第3章 結(jié)果
    3.1 大鼠 BMSCs 的提取、分離、擴(kuò)增、培養(yǎng)
    3.2 大鼠 BMSCs 的鑒定：流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果
    3.3 血清 AMY 及 CK-MB 的變化
    3.4 血清 TNF-α、IL-10 的變化
        3.4.1 血清 TNF-α的變化
        3.4.2 血清 IL-10 的變化
    3.5 BMSCs 在胰腺、肺臟、心臟組織中的定植
    3.6 胰腺、肺臟、心臟病理學(xué)觀察
        3.6.1 胰腺組織病理學(xué)評(píng)價(jià)
        3.6.2 肺臟組織病理學(xué)評(píng)價(jià)
        3.6.3 心臟組織病理評(píng)分
    3.7 肺臟、心臟免疫組織化學(xué)染色評(píng)分
        3.7.1 肺臟 TNF-α、IL-10 免疫組織化學(xué)染色評(píng)分
        3.7.2 心臟 TNF-α、IL-10 免疫組織化學(xué)染色評(píng)分
第4章 討論
    4.1 關(guān)于重癥急性胰腺炎模型的制備
    4.2 重癥急性胰腺炎并發(fā)肺臟損傷
    4.3 重癥急性胰腺炎并發(fā)心臟損傷
    4.4 BMSCs 對(duì)大鼠 SAP 并發(fā)心肺損傷的保護(hù)作用
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3170941