發(fā)布時(shí)間：2021-05-06 01:09

　　目的：探討同種異體移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠重癥急性胰腺炎并發(fā)心肌、肺損傷的價(jià)值及其機(jī)制，為臨床應(yīng)用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療重癥急性胰腺炎心肌、肺損傷提供實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。方法：通過(guò)全骨髓貼壁法培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）至第三代備用；經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)鑒定BMSCs。將90只健康雌性SD大鼠，體重200±20g,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組（S組）、模型組（SAP組）和治療組（B組）。SAP組、B組采用胰腺被膜下多點(diǎn)注射4％�；悄懰徕c（0.5ml/kg）復(fù)制SAP模型。造模后24h經(jīng)大鼠尾靜脈注射1mlBMSCs懸液（1.0×106個(gè)/mL）于S組和B組，而SAP組只注射1mlPBS。于移植后第1、7、14d通過(guò)腹主動(dòng)脈放血法將大鼠分批處死，采集血清檢測(cè)血淀粉酶（AMY）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）；用ELISA法檢測(cè)血清TNF-a、IL-10；并將胰腺、心肌及肺組織置于4%中性甲醛溶液中固定，常規(guī)切片、HE染色；采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)心肺組織中TNF-a、IL-10的表達(dá)。結(jié)果：1、通過(guò)全骨髓貼壁法可提取骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，10h后可見(jiàn)少許細(xì)胞貼壁，培養(yǎng)至第10天即可生長(zhǎng)約90%融合，... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞對(duì)照表
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        2.1.2 藥品及試劑
        2.1.3 主要儀器及器材
    2.2 方法
        2.2.1 動(dòng)物分組
        2.2.2 大鼠 BMSCs 的提取、分離、擴(kuò)增、培養(yǎng)與鑒定
        2.2.3 重癥急性胰腺炎模型的建立和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的移植
        2.2.4 標(biāo)本的獲取及處理
        2.2.5 血清淀粉酶和 CK-MB 檢測(cè)
        2.2.6 血清 TNF-α的測(cè)定
        2.2.7 血清 IL-10 的測(cè)定
        2.2.8 BMSCs 的在體鑒定
        2.2.9 胰腺組織、肺臟組織、心臟組織病理學(xué)變化
        2.2.10 免疫組織化學(xué)染色
        2.2.11 統(tǒng)計(jì)方法
第3章 結(jié)果
    3.1 大鼠 BMSCs 的提取、分離、擴(kuò)增、培養(yǎng)
    3.2 大鼠 BMSCs 的鑒定：流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果
    3.3 血清 AMY 及 CK-MB 的變化
    3.4 血清 TNF-α、IL-10 的變化
        3.4.1 血清 TNF-α的變化
        3.4.2 血清 IL-10 的變化
    3.5 BMSCs 在胰腺、肺臟、心臟組織中的定植
    3.6 胰腺、肺臟、心臟病理學(xué)觀察
        3.6.1 胰腺組織病理學(xué)評(píng)價(jià)
        3.6.2 肺臟組織病理學(xué)評(píng)價(jià)
        3.6.3 心臟組織病理評(píng)分
    3.7 肺臟、心臟免疫組織化學(xué)染色評(píng)分
        3.7.1 肺臟 TNF-α、IL-10 免疫組織化學(xué)染色評(píng)分
        3.7.2 心臟 TNF-α、IL-10 免疫組織化學(xué)染色評(píng)分
第4章 討論
    4.1 關(guān)于重癥急性胰腺炎模型的制備
    4.2 重癥急性胰腺炎并發(fā)肺臟損傷
    4.3 重癥急性胰腺炎并發(fā)心臟損傷
    4.4 BMSCs 對(duì)大鼠 SAP 并發(fā)心肺損傷的保護(hù)作用
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3170941