發(fā)布時間：2021-04-27 13:39

　　幽門螺桿菌（Helicobacter pylori,H.pylori）感染是消化性胃潰瘍、慢性胃炎和胃癌等多種消化道疾病的重要致病因素,根除H.pylori是預防胃腸道疾病的有效手段。而目前的療法頻繁使用抗生素,H.pylori出現的抗藥性以及患者的不良反應大大降低了其治療有效性。大量細胞和動物實驗證明乳桿菌具有拮抗H.pylori并降低其定殖的作用效果,然而相關的臨床研究數量較少,且主要集中在國外商業(yè)菌株如鼠李糖乳桿菌GG。因此,本研究擬通過體外體內實驗篩選潛在抗H.pylori感染的菌株,并評價其臨床作用效果,以期開發(fā)可用于干預治療H.pylori感染的自主知識產權乳桿菌。首先評價了98株乳桿菌體外抑菌能力和降低H.pylori粘附胃上皮細胞的作用效果,發(fā)現其中66株乳桿菌有不同程度的抑菌作用（抑菌圈直徑在9.41-13.88 mm之間）,其中9株乳桿菌能顯著降低H.pylori粘附（粘附率降低值在24.76%-31.26%之間）。選取了7株可有效抑菌和降低H.pylori粘附的乳桿菌,并進一步結合16S rRNA擴.增子測序和實時熒光定量PCR技術考察其在小鼠胃部的定殖能力。結果... 

【文章來源】：江南大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮寫詞對照表
1 緒論
    1.1 幽門螺桿菌及其潛在致病效應
        1.1.1 H.pylori的生理特性和致病機制
        1.1.2 H.pylori感染的臨床影響
        1.1.3 H.pylori感染的防治策略
    1.2 乳桿菌抗H.pylori感染的研究進展
        1.2.1 乳桿菌抗H.pylori感染的體外實驗研究
        1.2.2 乳桿菌抗H.pylori感染的動物實驗研究
        1.2.3 乳桿菌抗H.pylori感染的臨床實驗研究
    1.3 乳桿菌抗H.pylori感染的機理研究
        1.3.1 抑制H.pylori生長
        1.3.2 抑制H.pylori粘附
        1.3.3 降低H.pylori體內定殖
        1.3.4 其他機理
    1.4 研究內容與意義
        1.4.1 立題背景與意義
        1.4.2 主要研究內容
2 材料與方法
    2.1 實驗材料與設備
        2.1.1 實驗菌株和細胞株
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要設備
    2.2 體外實驗方法
        2.2.1 實驗菌株的保藏和培養(yǎng)
        2.2.2 乳桿菌抑菌效果的測定
        2.2.3 乳桿菌抑制H.pylori粘附能力的測定
        2.2.4 細胞IL-8分泌量的測定
        2.2.5 乳桿菌下調H.pylori毒力因子表達的測定
        2.2.6 抗生素對乳桿菌最低抑制濃度的測定
        2.2.7 乳桿菌安全性預測
    2.3 動物實驗方法
        2.3.1 灌胃菌株的制備
        2.3.2 動物實驗設計
        2.3.3 乳桿菌在胃部定殖量的測定
        2.3.4 乳桿菌在胃部豐度變化的測定
    2.4 臨床實驗方法
        2.4.1 臨床病例選擇標準
        2.4.2 實驗分組與設計
        2.4.3 實驗產品及其活菌數的測定
        2.4.4 臨床指標的測定
    2.5 數據統(tǒng)計與分析
3 結果與討論
    3.1 拮抗H.pylori乳桿菌的體外初篩
        3.1.1 乳桿菌對H.pylori生長的抑制作用
        3.1.2 乳桿菌對H.pylori粘附AGS細胞的抑制作用
        3.1.3 復篩動物實驗菌株的選擇
    3.2 基于乳桿菌在小鼠胃部定殖能力對乳桿菌的復篩
        3.2.1 不同乳桿菌在小鼠胃部的定殖時間及定殖量變化情況
        3.2.2 小鼠胃部菌群中乳桿菌比例的變化及其對菌群組成的影響
    3.3 乳桿菌抗H.pylori感染的臨床效果評價
        3.3.1 臨床受試者基線信息
        3.3.2 實驗產品活菌數變化情況
        3.3.3 乳桿菌干預對受試者體內H.pylori定殖量的影響
        3.3.4 乳桿菌干預對受試者GSRS評分的影響
        3.3.5 乳桿菌干預對受試者血清PG水平的影響
        3.3.6 乳桿菌干預對受試者血清炎癥因子水平的影響
        3.3.7 乳桿菌干預對受試者腸道菌群的影響
        3.3.8 體外效果與臨床效果的相關性分析
    3.4 乳桿菌安全性的初步評估
        3.4.1 乳桿菌的抗侵襲能力分析
        3.4.2 乳桿菌的潛在毒力基因分析
        3.4.3 乳桿菌的耐藥基因分析
        3.4.4 乳桿菌的抗生素耐藥性表型分析
主要結論與展望
致謝
參考文獻
附錄 Ⅰ:作者在攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文
附錄 Ⅱ:實驗相關圖表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]副干酪乳桿菌的基因多樣性及其抗生素耐受性分析[J]. 李曉姝,殷瑞敏,毛丙永,崔樹茂,趙建新.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2019(14)
[2]沙門氏菌CRISPR位點的結構特征比較[J]. 曲道峰,沈楊,張聰聰,韓劍眾.  微生物學報. 2018(02)
[3]Nonbismuth concomitant quadruple therapy for Helicobacter pylori eradication in Chinese regions: A meta-analysis of randomized controlled trials[J]. Lien-Chieh Lin,Tzu-Herng Hsu,Kuang-Wei Huang,Ka-Wai Tam.  World Journal of Gastroenterology. 2016(23)
[4]Anti-Helicobacter pylori activities of Chenopodium ambrosioides L. in vitro and in vivo[J]. Hui Ye,Yu Liu,Ning Li,Jing Yu,Hong Cheng,Jiang Li,Xue-Zhi Zhang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(14)
[5]Lactobacillus plantarum B7 inhibits Helicobacter pylori growth and attenuates gastric inflammation[J]. Chompoonut Sunanliganon,Duangporn Thong-Ngam,Somying Tumwasorn,Naruemon Klaikeaw.  World Journal of Gastroenterology. 2012(20)
[6]幽門螺桿菌感染對胃內正常菌群結構的影響[J]. 蒲瑞雪,郭紅,廖亞玲,鄒全明,郭剛.  第三軍醫(yī)大學學報. 2010(05)
[7]Two stomach-originated lactobacillus strains improve Helicobacter pylori infected murine gastritis[J]. Yi Cui,Chun-Lian Wang,Xiao-Wei Liu,Xue-Hong Wang,Xin Zhao,Nian Fu,Fang-Gen Lu,Department of Gastroenterology,The Second Xiangya Hospital of Central South University,Changsha 410011,Hunan Province,China Lin-Lin Chen,Department of Gastroenterology,Xiangya Hospital of Central South University,Changsha 410008,Hunan Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(04)

博士論文
[1]健康人群腸道中低豐度擬桿菌的篩選及生理作用研究[D]. 譚惠子.江南大學 2019

碩士論文
[1]植物乳桿菌CCFM8610緩解鎘暴露誘導腸道損傷的效果評價及機制探究[D]. 吳江萍.江南大學 2019
[2]格氏乳桿菌與副格氏乳桿菌的篩選、基因組比較及安全性評價[D]. 周興雅.江南大學 2019
[3]乳桿菌對幽門螺桿菌感染性胃炎中炎癥因子的影響及機制[D]. 蔣杰.鄭州大學 2018
[4]乳酸菌對空腸彎曲桿菌毒力基因表達的影響[D]. 張婷婷.江南大學 2016



本文編號：3163566