幽門螺桿菌（Helicobacter pylori,H.pylori）感染是消化性胃潰瘍、慢性胃炎和胃癌等多種消化道疾病的重要致病因素,根除H.pylori是預(yù)防胃腸道疾病的有效手段。而目前的療法頻繁使用抗生素,H.pylori出現(xiàn)的抗藥性以及患者的不良反應(yīng)大大降低了其治療有效性。大量細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明乳桿菌具有拮抗H.pylori并降低其定殖的作用效果,然而相關(guān)的臨床研究數(shù)量較少,且主要集中在國外商業(yè)菌株如鼠李糖乳桿菌GG。因此,本研究擬通過體外體內(nèi)實(shí)驗(yàn)篩選潛在抗H.pylori感染的菌株,并評(píng)價(jià)其臨床作用效果,以期開發(fā)可用于干預(yù)治療H.pylori感染的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)乳桿菌。首先評(píng)價(jià)了98株乳桿菌體外抑菌能力和降低H.pylori粘附胃上皮細(xì)胞的作用效果,發(fā)現(xiàn)其中66株乳桿菌有不同程度的抑菌作用（抑菌圈直徑在9.41-13.88 mm之間）,其中9株乳桿菌能顯著降低H.pylori粘附（粘附率降低值在24.76%-31.26%之間）。選取了7株可有效抑菌和降低H.pylori粘附的乳桿菌,并進(jìn)一步結(jié)合16S rRNA擴(kuò).增子測(cè)序和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)考察其在小鼠胃部的定殖能力。結(jié)果... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮寫詞對(duì)照表
1 緒論
    1.1 幽門螺桿菌及其潛在致病效應(yīng)
        1.1.1 H.pylori的生理特性和致病機(jī)制
        1.1.2 H.pylori感染的臨床影響
        1.1.3 H.pylori感染的防治策略
    1.2 乳桿菌抗H.pylori感染的研究進(jìn)展
        1.2.1 乳桿菌抗H.pylori感染的體外實(shí)驗(yàn)研究
        1.2.2 乳桿菌抗H.pylori感染的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
        1.2.3 乳桿菌抗H.pylori感染的臨床實(shí)驗(yàn)研究
    1.3 乳桿菌抗H.pylori感染的機(jī)理研究
        1.3.1 抑制H.pylori生長
        1.3.2 抑制H.pylori粘附
        1.3.3 降低H.pylori體內(nèi)定殖
        1.3.4 其他機(jī)理
    1.4 研究?jī)?nèi)容與意義
        1.4.1 立題背景與意義
        1.4.2 主要研究?jī)?nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株和細(xì)胞株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要設(shè)備
    2.2 體外實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)菌株的保藏和培養(yǎng)
        2.2.2 乳桿菌抑菌效果的測(cè)定
        2.2.3 乳桿菌抑制H.pylori粘附能力的測(cè)定
        2.2.4 細(xì)胞IL-8分泌量的測(cè)定
        2.2.5 乳桿菌下調(diào)H.pylori毒力因子表達(dá)的測(cè)定
        2.2.6 抗生素對(duì)乳桿菌最低抑制濃度的測(cè)定
        2.2.7 乳桿菌安全性預(yù)測(cè)
    2.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 灌胃菌株的制備
        2.3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.3.3 乳桿菌在胃部定殖量的測(cè)定
        2.3.4 乳桿菌在胃部豐度變化的測(cè)定
    2.4 臨床實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 臨床病例選擇標(biāo)準(zhǔn)
        2.4.2 實(shí)驗(yàn)分組與設(shè)計(jì)
        2.4.3 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品及其活菌數(shù)的測(cè)定
        2.4.4 臨床指標(biāo)的測(cè)定
    2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
3 結(jié)果與討論
    3.1 拮抗H.pylori乳桿菌的體外初篩
        3.1.1 乳桿菌對(duì)H.pylori生長的抑制作用
        3.1.2 乳桿菌對(duì)H.pylori粘附AGS細(xì)胞的抑制作用
        3.1.3 復(fù)篩動(dòng)物實(shí)驗(yàn)菌株的選擇
    3.2 基于乳桿菌在小鼠胃部定殖能力對(duì)乳桿菌的復(fù)篩
        3.2.1 不同乳桿菌在小鼠胃部的定殖時(shí)間及定殖量變化情況
        3.2.2 小鼠胃部菌群中乳桿菌比例的變化及其對(duì)菌群組成的影響
    3.3 乳桿菌抗H.pylori感染的臨床效果評(píng)價(jià)
        3.3.1 臨床受試者基線信息
        3.3.2 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品活菌數(shù)變化情況
        3.3.3 乳桿菌干預(yù)對(duì)受試者體內(nèi)H.pylori定殖量的影響
        3.3.4 乳桿菌干預(yù)對(duì)受試者GSRS評(píng)分的影響
        3.3.5 乳桿菌干預(yù)對(duì)受試者血清PG水平的影響
        3.3.6 乳桿菌干預(yù)對(duì)受試者血清炎癥因子水平的影響
        3.3.7 乳桿菌干預(yù)對(duì)受試者腸道菌群的影響
        3.3.8 體外效果與臨床效果的相關(guān)性分析
    3.4 乳桿菌安全性的初步評(píng)估
        3.4.1 乳桿菌的抗侵襲能力分析
        3.4.2 乳桿菌的潛在毒力基因分析
        3.4.3 乳桿菌的耐藥基因分析
        3.4.4 乳桿菌的抗生素耐藥性表型分析
主要結(jié)論與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 Ⅰ:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄 Ⅱ:實(shí)驗(yàn)相關(guān)圖表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3163566