目的利用桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)（Baculovirus expression vector system,BEVS）制備HBV核心顆粒,以用于新型抗病毒藥物體外抗病毒活性的實(shí)驗(yàn)研究。方法構(gòu)建含有乙型肝炎病毒聚合酶基因（HBV P基因）和核心蛋白基因（HBV C基因）的重組質(zhì)粒pFastbac Dual-P-C,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH10Bac進(jìn)行轉(zhuǎn)座,提取重組Bacmid DNA轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞,獲得含有HBV P基因和C基因的重組桿狀病毒。用重組桿狀病毒感染昆蟲Sf9細(xì)胞進(jìn)行蛋白表達(dá),然后通過免疫共沉淀純化目的蛋白,行SDS-PAGE電泳與銀染及RT-PCR檢測各成分。結(jié)果成功構(gòu)建了含HBV P基因和C基因的重組桿狀病毒,且能在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)目的蛋白并進(jìn)行純化,純化產(chǎn)物中含HBV聚合酶、核心蛋白和RNA。結(jié)論利用桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),能成功地構(gòu)建出含HBV P基因和C基因的重組桿狀病毒,在昆蟲細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá),并純化出HBV核心顆粒,為進(jìn)一步研究新型抗HBV藥物的作用機(jī)制等奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
主要縮寫詞
中文摘要
英文摘要
前言
一、材料與方法
二、結(jié)果
三、討論
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝



本文編號：3161817