目的:觀察Smad3小干擾RNA（siRNA-Smad3）沉默肝星狀細(xì)胞（HSCs）Smad3基因?qū)Ω涡菭罴?xì)胞增殖、凋亡的影響,并探討其可能機(jī)制。方法:肝星狀細(xì)胞株HSCs-T6分為3組:空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、siR-NA-Smad3轉(zhuǎn)染組。siRNA-Smad3轉(zhuǎn)染HSCs細(xì)胞株,轉(zhuǎn)染不同時(shí)間后,CCK-8檢測(cè)HSCs增殖的變化,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSCs凋亡的變化,免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)HSCs凋亡相關(guān)蛋白P53和Bcl-2表達(dá)的變化。結(jié)果:（1）24 h、48 h、72 h siRNA-Smad3轉(zhuǎn)染組HSCs增殖受到顯著抑制且凋亡明顯增多（P<0.01）。（2）轉(zhuǎn)染48 h后,siRNA-Smad3轉(zhuǎn)染組P53蛋白表達(dá)顯著增多,Bcl-2蛋白表達(dá)顯著減少（P<0.01）。結(jié)論:siRNA-Smad3沉默Smad3基因可以在一定時(shí)間內(nèi)顯著抑制HSCs的增殖并誘導(dǎo)其凋亡,其可能通過(guò)上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白P53表達(dá)、下調(diào)Bcl-2的表達(dá)來(lái)發(fā)揮誘導(dǎo)凋亡的作用;Smad3沉默有望成為抗肝纖維化治療的一個(gè)新途徑。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)病理生理雜志. 2011,27(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 材料和主要試劑
        1.1 細(xì)胞株和主要試劑
        1.2 siRNA的合成
    2 方法
        2.1 HSCs-T6細(xì)胞株的培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        2.2 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞的增殖抑制率
        2.3 Annexin V/PI雙標(biāo)法流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率
        2.4 免疫細(xì)胞化學(xué)染色法 （PowerVision二步法） 檢測(cè)P53和Bcl-2蛋白表達(dá)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 siRNA-Smad3轉(zhuǎn)染對(duì)HSCs增殖抑制的影響
    2 siRNA-Smad3轉(zhuǎn)染對(duì)HSCs凋亡的影響
    3 siRNA-Smad3轉(zhuǎn)染對(duì)HSCs P53、Bcl-2蛋白表達(dá)的影響
        3.1 P53蛋白的表達(dá)
        3.2 Bcl-2蛋白的表達(dá)
        3.3 免疫細(xì)胞化學(xué)染色圖像分析
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]siRNA沉默Smad3對(duì)人KFB細(xì)胞增殖、凋亡及合成MMP3的影響[J]. 劉波,張恒術(shù),果磊.  免疫學(xué)雜志. 2009(03)
[2]姜黃素誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞凋亡的相關(guān)分子機(jī)制的初步研究[J]. 舒建昌,何雅軍,呂霞,沈雁,潘潔,葉國(guó)榮.  中華消化雜志. 2006(11)
[3]丹芍化纖膠囊治療大鼠肝纖維化后肝星狀細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的變化[J]. 楊勤,羅新華,耿曉霞,謝汝佳,韓冰,李誠(chéng)秀,程明亮.  中國(guó)病理生理雜志. 2005(05)
[4]抗肝纖維化治療的趨勢(shì)[J]. 張定鳳.  中華肝臟病雜志. 2007 (10)



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