發(fā)布時間：2021-04-22 20:08

　　炎癥性腸炎（IBD）是胃腸道一種慢性、易復發(fā)的自身免疫性疾病,細胞因子平衡失調所致的免疫異常是IBD的重要發(fā)病機制。深入研究IBD中重要細胞因子的調控過程不論對IBD發(fā)病機理的認識還是對IBD的治療都具有非常重要的意義。近年來研究發(fā)現(xiàn)miRNA對免疫系統(tǒng)具有調控作用,能夠微調控免疫反應過程,但是miRNA在IBD中對細胞因子的調控機制尚未得到深入的闡明。本論文在TNBS誘導的小鼠IBD模型中,通過miRNA芯片技術和生物信息學分析等方法建立IBD小鼠miRNA差異表達譜；從細胞因子的生物學功能出發(fā),利用TargetScan、Miranda和PicTar三個軟件預測調控趨化因子CXCL12的miR-141；并深入研究miR-141在IBD發(fā)生中的作用。我們應用熒光素酶報告系統(tǒng)在體外研究發(fā)現(xiàn),miR-141能直接作用于CXCL12的3’-UTR的種子序列,同時我們提取結腸上皮細胞對其mRNA水平和蛋白水平進行驗證,體內研究發(fā)現(xiàn)炎癥性結腸組織中miRNA-141表達和CXCL12蛋白的表達無論在小鼠腸炎模型以及CD病人的結腸組織中表達均呈負相關,這些結果提示miR-141可通過調控趨化因子C... 

【文章來源】：南京大學江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
綜述部分
    一、炎癥性腸炎的概述
        1 炎癥性腸炎簡介
        2 炎癥性腸炎致病機理
        3 炎癥性腸炎治療現(xiàn)狀
        4 炎癥性腸炎的動物模型
    二、炎癥性腸炎中的microRNA概述
        1 microRNA概述
        2 microRNA與炎癥性腸炎
        3 microRNA與疾病治療
    三、趨化因子在炎癥性腸炎中的作用
        1 趨化因子概述
    參考文獻
實驗部分
    一、引言
    二、實驗儀器和材料
        1 實驗儀器
        2 實驗材料
    三、實驗方法
        1 TNBS小鼠模型構建及給藥處理
        2 TNBS模型小鼠血清microRNA譜的測定
        3 TNBS小鼠模型結腸組織芯片及Q-PCR驗證
        4 microRNA靶點的理論預測
        5 熒光素酶報告載體構建
        6 細胞轉染實驗
        7 細胞遷移實驗
        8 Elisa實驗
        9 免疫熒光染色
        10 結腸上皮細胞提�。蟿┓ǎ�
        11 TNBS誘導腸炎小鼠的治療
        12 結腸組織HE病理分析
        13 髓過氧化物酶（MPO）活性測定
    四、實驗結果和討論
        1 TNBS誘導的結腸炎小鼠模型的構建結果
        2 microRNA表達譜測定結果
        3. miR-141與靶點CXCL12的表達相關性
        4 趨化實驗
        5 miRNA-141對TNBS結腸炎小鼠的治療結果
    五、小結
已發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]CXCR4 antagonist AMD3100 attenuates colonic damage in mice with experimental colitis[J]. Xian-Ming Xia,Fang-Yu Wang,Wen-An Xu,Zhen-Kai Wang,Jiong Liu,You-Ke Lu,Xin-Xin Jin,Heng Lu,Yun-Zhu Shen,Department of Gastroenterology and Hepatology,Jinling Hospital,Nanjing 210002,Jiangsu Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(23)



本文編號：3154391