目的觀察三氧化二砷（As₂O₃）對小鼠肝臟祖細(xì)胞（AHPCs）增殖及代謝的影響。方法應(yīng)用改良Seglen二步法原位灌注結(jié)合機(jī)械離心獲取AHPCs,體外培養(yǎng)并持續(xù)觀察超過40 d。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)對AHPC及其形成的克隆進(jìn)行白蛋白、甲胎蛋白（AFP）和細(xì)胞角蛋白19（CK19）染色。取原代培養(yǎng)12 d的細(xì)胞隨機(jī)分為3組:對照組（不含As₂O₃）、低濃度組（含2μmol/L As₂O₃）和高濃度組（含4μmol/L As₂O₃）。干預(yù)48 h后,采用免疫熒光法觀察細(xì)胞核增殖抗原（Ki-67）陽性細(xì)胞所占的比例,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)檢測Ki-67基因的表達(dá),Westem blot技術(shù)檢測增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）蛋白的表達(dá)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測細(xì)胞上清液中尿素濃度的變化。結(jié)果體外培養(yǎng)的AHPC可持續(xù)擴(kuò)增超過40 d,培養(yǎng)第1天強(qiáng)陽性表達(dá)白蛋白,培養(yǎng)第5天細(xì)胞克隆開始表達(dá)AFP,第35天... 

【文章來源】：中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2013,30(10)北大核心CSCD

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三氧化二砷抑制肝癌細(xì)胞RhoC基因表達(dá)對其侵襲轉(zhuǎn)移行為的影響[J]. 孔慶志,馮覺平,黃濤,王亞萍,方靜,李敏.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2008 (09)
[2]bc1-2/bax mRNA在三氧化二砷體外誘導(dǎo)人膽管癌細(xì)胞株凋亡中的表達(dá)[J]. 周軍,湯恢煥,馬列,常實(shí),王憲偉.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2006(08)



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