第一部分幽門螺桿菌對(duì)胃上皮細(xì)胞間隙連接影響的實(shí)驗(yàn)研究目的觀察體外實(shí)驗(yàn)中CagA⁺H．pylori菌株對(duì)胃上皮細(xì)胞Cx32、Cx43表達(dá)、細(xì)胞增殖和細(xì)胞間隙連接超微結(jié)構(gòu)的影響，及抗H．pylori藥物干預(yù)后的變化，探討CagA⁺ H．pylori菌株與胃上皮細(xì)胞間隙連接超微結(jié)構(gòu)、Cx表達(dá)的關(guān)系。方法不同菌型H．pylori與BGC-823細(xì)胞按細(xì)菌／細(xì)胞比例20∶1、100∶1、500∶1共培養(yǎng)24h、48h，及細(xì)菌／細(xì)胞比例100∶1共培養(yǎng)16h后予抗H．pylori藥物干預(yù)；對(duì)照組不加H．pylori或不加藥物。用細(xì)胞免疫化學(xué)SABC法及計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)，檢測(cè)細(xì)胞Cx32、Cx43表達(dá)變化；四唑藍(lán)（MTT）比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況；原位固定與原位包埋法透射電鏡及掃描電鏡觀察細(xì)胞間隙連接超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果（1）Cx32、Cx43表達(dá)變化：Cx32在BGC-823細(xì)胞均為陰性表達(dá)。Cx43表達(dá)在未加H．pylori的對(duì)照組48h高于24h；NCTC J99不同比例組48h均低于24h，且低于對(duì)照組，24h及48h 500∶1組均低于100∶1組... 

【文章來(lái)源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：111 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

一l不加H.Pyfori對(duì)照組培養(yǎng)前:BGC一823細(xì)胞見(jiàn)較多Cx43圖1一2不加H.Pyfori對(duì)照組培養(yǎng)24小時(shí):BGC一823細(xì)胞Cx43陽(yáng)性圖1一3不加H.Pyfori對(duì)照組培養(yǎng)48小時(shí):BGC一823細(xì)胞Cx43

博士學(xué)位論文第一章長(zhǎng)表達(dá)增強(qiáng)(圖1一1一圖1一3);加 H.pyloriNCTCJ99后，隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)減弱(圖1一4一圖1一6)，且較對(duì)照組弱(圖1一7一圖1一8)。卜切.今辦贊月..直哪.食;曲，，!l甲心﹄娘幾協(xié)甲自.丫.君才’砂龜一今魂，，于毛毛每.和，圖1一l不加H.Pyfori對(duì)照組培養(yǎng)前:BGC一823細(xì)胞見(jiàn)較多Cx43陽(yáng)性表達(dá)顆粒，大多位于胞膜，少量位于胞質(zhì) (SABCX400)。圖1一2不加H.Pyfori對(duì)照組培養(yǎng)24小時(shí):BGC一823細(xì)胞Cx43陽(yáng)性表達(dá)顆粒增多(SABC/400)。圖1一3不加H.Pyfori對(duì)照組培養(yǎng)48小時(shí):BGC一823細(xì)胞Cx43陽(yáng)性表達(dá)顆粒明顯增多(SABC x400)。...匆..一穆l欲.令.l喊峨月圖l一 41:100組加 H.PyloriJ99前:BGC一823細(xì)胞可見(jiàn)較多Cx43陽(yáng)性表達(dá)顆粒，大多位于胞膜，少量位于胞質(zhì) (SABCx400)。心.圖l一51:100組加 H.pyloriJ99培養(yǎng)24

圖1一21聯(lián)用雷貝拉吐+羚氨千青霉素+克拉霉素組，BGC一823細(xì)胞生長(zhǎng)好，僅細(xì)胞間隙內(nèi)有少量壞死的H衛(wèi)yfor殘留體(箭頭所示，x4000)。圖卜22聯(lián)用雷貝拉哇+羚氨千青霉素+克拉霉素組，BGC一823細(xì)胞分布密集，細(xì)胞間隙明顯縮小，有較多細(xì)胞間隙連接形成(箭頭所示，x4000)。4討論胃癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，死亡率居惡性腫瘤之首。H.Pylori感染是胃癌的重要危險(xiǎn)因素，大量臨床流行病學(xué)資料表明H.Pylori感染與胃癌發(fā)生發(fā)展有關(guān)，H.pylori感染者患胃癌的危險(xiǎn)性比無(wú)感染者高2一4倍【‘”，20]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)H.py10ri可誘發(fā)蒙古沙土鼠胃腺癌[2’，22]，但H.Pyl。ri感染與胃癌的確切關(guān)系及致癌機(jī)制尚不清楚。GJIC是細(xì)胞間一種最普遍的通訊方式，GJ工C功能的抑制或缺陷是促癌變階段的重要機(jī)制，并與cx表達(dá)的減低或缺如有關(guān)[23!。cx32、cx43是胃上皮細(xì)胞重要的細(xì)胞間隙連接蛋白，其表達(dá)異常可能是導(dǎo)致胃癌GJIC功能障礙的主要原因之一。H.pylori菌株集中在上皮細(xì)胞連接處，可改變頂部連接復(fù)合物結(jié)構(gòu)和功能I‘’l，降低sGe一7901細(xì)胞GJIe功能I‘5]。但H.pylori與胃上皮

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]幽門螺桿菌感染與胃上皮細(xì)胞間隙連接功能的體外研究[J]. 陶然,方平楚,葉少菁,姜云水,邢美圓.  實(shí)用腫瘤雜志. 2005(02)
[2]Detection and location of Helicobacter pylori in human gastric carcinomas[J]. Yun-Lian Tang, Run-Liang Gan, Bi-Hua Dong, Ri-Chen Jiang, Rong-Jun Tang, Department of Pathology, Medical School, Nahua University, Hengyang 421001, Hunan Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2005(09)
[3]幽門螺桿菌和非甾體抗炎藥對(duì)胃上皮細(xì)胞增殖的影響[J]. 駱智琴,吳叔明,蕭樹(shù)東,童菊芳,羅鴻予,沈冠鳳.  中華消化雜志. 2004(12)
[4]細(xì)胞間隙連接通訊與腫瘤[J]. 孫華,劉耕陶.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2004(11)
[5]幽門螺桿菌cagA基因及蛋白序列多態(tài)性分析[J]. 周軍,曾潯,尹焱,郭欣,張建中.  世界華人消化雜志. 2004(06)
[6]胃癌組織Cx43表達(dá)的研究[J]. 王憲遠(yuǎn),任景麗,曾艷麗.  中國(guó)現(xiàn)代普通外科進(jìn)展. 2004(01)
[7]小鼠前胃癌誘導(dǎo)中Cx32表達(dá)的變化[J]. 李百祥,張曉峰,馬若波.  中國(guó)公共衛(wèi)生. 2003(09)
[8]細(xì)胞間隙連接蛋白在多種類型癌組織中的原位表達(dá)研究[J]. 范松青,周鳴,向秋,王潔如,熊偉,王蓉,魏?jiǎn)⒂?周金平,李桂源.  癌癥. 2003(07)
[9]中國(guó)幽門螺桿菌感染流行病學(xué)Meta分析[J]. 王凱娟,王潤(rùn)田.  中華流行病學(xué)雜志. 2003(06)
[10]p14ARF與p53抑癌基因?qū)σ认侔┥飳W(xué)行為的影響[J]. 陳笑雷,張群華,倪泉興.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(10)



本文編號(hào)：3134021