人源靜息態(tài)胰腺星狀細胞的改良分離方法
發(fā)布時間:2021-04-11 00:07
背景:胰腺星狀細胞(Pancreatic stellate cells,PSCs)是一種位于胰腺小葉和腺泡周圍區(qū)域之間的間質(zhì)細胞。在正常胰腺組織中,PSCs的主要功能是儲脂,富含脂滴,內(nèi)含大量維生素A,增殖緩慢,呈靜息態(tài)表型。在各種理化因素的刺激下,PSCs激活后可以轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞樣細胞。而活化的胰腺星狀細胞作為胰腺導(dǎo)管癌(Pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)和慢性胰腺炎(Chronic pancreatitis,CP)中胰腺纖維化進程中的主要間質(zhì)細胞,分泌大量細胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM),加速了胰腺疾病的發(fā)生發(fā)展。隨著近年來PSCs領(lǐng)域研究的不斷推進,最新的證據(jù)發(fā)現(xiàn),PSCs在內(nèi)分泌細胞功能,胰島纖維化和糖尿病中也起著重要作用。然而,人源靜息態(tài)的胰腺星狀細胞分離由于胰腺組織的自溶性導(dǎo)致原代細胞成活率和分離成功率不夠穩(wěn)定,所以我們在現(xiàn)有PSCs原代分離的技術(shù)上,進一步簡化優(yōu)化了方案,為能夠更好的推進胰腺星狀細胞領(lǐng)域的研究提供了實驗依據(jù)。目的:探討一種簡便、高產(chǎn)的人靜息態(tài)胰腺星狀細胞(Normal Pancre...
【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
NPSCs的分離和培養(yǎng)
安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文A:Percoll 密度梯度離心分層B:NPSCs 分離后活細胞計數(shù)(200×)C:新鮮分離的 NPSCs 細胞形態(tài)(200×)D:培養(yǎng) 12 小時后逐漸貼壁的 NPSCs 細胞形態(tài)(200×)縮略詞:NPSCs(normal pancreatic stellate cells,靜息態(tài)胰腺星狀細胞)Figure 1 Isolation and culture of NPSCs.(A) Percoll density gradient centrifugation layering;(B) cell count after isolation (200×);(C) the cell morphology of freshly isolated NPSCs (200×);(D) cell morphology of NPSCs gradually adhering after 12 hours of culture (200×)Abbreviation: NPSC, normal pancreatic stellate cell.
培養(yǎng)時段的 PSCs 活化相關(guān)標(biāo)志物蛋白表達量的新鮮分離體外培養(yǎng) 3 天的 NPSCs;10d 組細胞為PSCsPSCs(normal pancreatic stellate cells,靜息態(tài)胰腺tellate cells,活化態(tài)胰腺星狀細胞);Vimentin(GFAP(膠質(zhì)細胞酸性蛋白);Desmin(結(jié)蛋白ctivation-related indicator expression of differenion.ns: APSCs, activated pancreatic stellate cells; NPSCs; PSCs, pancreatic stellate cells; 3 d, freshly isolatedAPSCs cultured for 10 days; GFAP, glial fibrillary
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Shattering the castle walls: Anti-stromal therapy for pancreatic cancer[J]. Ozkan Kanat,Hulya Ertas. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2018(08)
[2]Pancreatic stellate cell: Pandora’s box for pancreatic disease biology[J]. Ratnakar R Bynigeri,Aparna Jakkampudi,Ramaiah Jangala,Chivukula Subramanyam,Mitnala Sasikala,G Venkat Rao,D Nageshwar Reddy,Rupjyoti Talukdar. World Journal of Gastroenterology. 2017(03)
[3]腹主動脈灌注法分離胰腺星狀細胞及其培養(yǎng)、鑒定[J]. 周龍安,楊桂元,錢祝銀. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2007(01)
[4]大鼠胰星狀細胞的分離與培養(yǎng)[J]. 賈一韜,李兆申. 胰腺病學(xué). 2003(03)
本文編號:3130581
【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
NPSCs的分離和培養(yǎng)
安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文A:Percoll 密度梯度離心分層B:NPSCs 分離后活細胞計數(shù)(200×)C:新鮮分離的 NPSCs 細胞形態(tài)(200×)D:培養(yǎng) 12 小時后逐漸貼壁的 NPSCs 細胞形態(tài)(200×)縮略詞:NPSCs(normal pancreatic stellate cells,靜息態(tài)胰腺星狀細胞)Figure 1 Isolation and culture of NPSCs.(A) Percoll density gradient centrifugation layering;(B) cell count after isolation (200×);(C) the cell morphology of freshly isolated NPSCs (200×);(D) cell morphology of NPSCs gradually adhering after 12 hours of culture (200×)Abbreviation: NPSC, normal pancreatic stellate cell.
培養(yǎng)時段的 PSCs 活化相關(guān)標(biāo)志物蛋白表達量的新鮮分離體外培養(yǎng) 3 天的 NPSCs;10d 組細胞為PSCsPSCs(normal pancreatic stellate cells,靜息態(tài)胰腺tellate cells,活化態(tài)胰腺星狀細胞);Vimentin(GFAP(膠質(zhì)細胞酸性蛋白);Desmin(結(jié)蛋白ctivation-related indicator expression of differenion.ns: APSCs, activated pancreatic stellate cells; NPSCs; PSCs, pancreatic stellate cells; 3 d, freshly isolatedAPSCs cultured for 10 days; GFAP, glial fibrillary
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Shattering the castle walls: Anti-stromal therapy for pancreatic cancer[J]. Ozkan Kanat,Hulya Ertas. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2018(08)
[2]Pancreatic stellate cell: Pandora’s box for pancreatic disease biology[J]. Ratnakar R Bynigeri,Aparna Jakkampudi,Ramaiah Jangala,Chivukula Subramanyam,Mitnala Sasikala,G Venkat Rao,D Nageshwar Reddy,Rupjyoti Talukdar. World Journal of Gastroenterology. 2017(03)
[3]腹主動脈灌注法分離胰腺星狀細胞及其培養(yǎng)、鑒定[J]. 周龍安,楊桂元,錢祝銀. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2007(01)
[4]大鼠胰星狀細胞的分離與培養(yǎng)[J]. 賈一韜,李兆申. 胰腺病學(xué). 2003(03)
本文編號:3130581
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