TRPM7通過(guò)STAT3途徑參與肝細(xì)胞增殖和肝再生
發(fā)布時(shí)間:2021-04-03 18:59
肝臟是人體內(nèi)唯一具有強(qiáng)大再生能力的實(shí)質(zhì)性器官。各種物理、化學(xué)、生物等因素均可導(dǎo)致肝臟疾病的發(fā)生。如果不及時(shí)治療可能會(huì)進(jìn)一步導(dǎo)致肝纖維化、肝硬化乃至肝癌。肝再生能力不足是晚期肝病的一個(gè)共同特征,因此深入探究肝再生的分子機(jī)制對(duì)于提高患者的總體生存率具有非常重要的臨床意義。M型瞬時(shí)受體電位通道7(transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)是一種具有離子通道和激酶雙功能的膜蛋白,參與調(diào)節(jié)多種生理功能和病理進(jìn)程。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)TRPM7參與肝星狀細(xì)胞(Hepatic stellate cells,HSC)的活化和增殖,而在肝再生及肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞增殖中的作用未被報(bào)道和研究,F(xiàn)通過(guò)經(jīng)典的70%肝切除術(shù)(partial hepatectomy,PHx)肝再生模型探討TRPM7是否參與肝再生。為探究TRPM7參與肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞增殖的分子機(jī)制,分別選用人源性的L-02細(xì)胞株及鼠源性的AML-12細(xì)胞株進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn),觀察TRPM7對(duì)于肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制。本研究可劃分為以下三個(gè)部分。1.PHx術(shù)后肝再生過(guò)程中TRPM7的蛋白表達(dá)變化TRPM7作為具有...
【文章來(lái)源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
PHx術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)肝臟重量及肝重比變化n=5
安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文28較:***P<0.001Fig.2HEpathologicalstainingandELASAmethodtodetectthechangesofALTandASTenzymeproteinatdifferenttimepointsafterPHx.HE×200A:HEpathologicalstainingatdifferenttimepointsduringliverregenerationafterPHx;B:ALTenzymeproteinlevelduringliverregenerationafterPHx;C:ASTenzymeproteinlevelduringliverregenerationafterPHx;Comparisonwith0h:***P<0.0014.1.2PHx術(shù)后肝再生過(guò)程中TRPM7、PCNA的蛋白表達(dá)變化為觀察TRPM7是否參與PHx術(shù)后的肝再生進(jìn)程,運(yùn)用westernblot法檢測(cè)PHx術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)TRPM7及細(xì)胞增殖指標(biāo)蛋白PCNA的蛋白表達(dá)變化。western-blot結(jié)果顯示:PHx術(shù)后細(xì)胞增殖指標(biāo)蛋白PCNA的蛋白水平在PHx術(shù)后上升,在36h達(dá)到高峰,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖3A。而TRPM7的蛋白水平同樣在術(shù)后上升并且持續(xù)至72h,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P<0.05)見(jiàn)圖3B。圖3Western-blot法檢測(cè)PHx術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)TRPM7及PCNA蛋白的表達(dá)水平A:PHx術(shù)后肝再生過(guò)程中PCNA蛋白表達(dá)情況;B:PHx術(shù)后肝再生過(guò)程中TRPM7蛋白表達(dá)情況;與0h比較:**P<0.01;與0h比較:***P<0.001
安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文31圖4.阻斷TRPM7通道對(duì)L-02、AML12細(xì)胞活力的影響。(A)運(yùn)用不同濃度(25、50、100、200和400μmol/l)2-APB處理不同時(shí)間(3、6、12、24和48小時(shí))后通過(guò)MTT評(píng)價(jià)L-02細(xì)胞活力的變化。(B)運(yùn)用不同濃度(25、50、100、200和400μmol/l)2-APB處理不同時(shí)間(3、6、12、24和48小時(shí))后通過(guò)MTT評(píng)價(jià)AML12細(xì)胞活力的變化。(C)不同濃度(25、50、100、200和400μmol/l)2-APB處理L-02細(xì)胞24或48小時(shí)后觀察細(xì)胞形成集落能力的變化。(D)不同
本文編號(hào):3116900
【文章來(lái)源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
PHx術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)肝臟重量及肝重比變化n=5
安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文28較:***P<0.001Fig.2HEpathologicalstainingandELASAmethodtodetectthechangesofALTandASTenzymeproteinatdifferenttimepointsafterPHx.HE×200A:HEpathologicalstainingatdifferenttimepointsduringliverregenerationafterPHx;B:ALTenzymeproteinlevelduringliverregenerationafterPHx;C:ASTenzymeproteinlevelduringliverregenerationafterPHx;Comparisonwith0h:***P<0.0014.1.2PHx術(shù)后肝再生過(guò)程中TRPM7、PCNA的蛋白表達(dá)變化為觀察TRPM7是否參與PHx術(shù)后的肝再生進(jìn)程,運(yùn)用westernblot法檢測(cè)PHx術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)TRPM7及細(xì)胞增殖指標(biāo)蛋白PCNA的蛋白表達(dá)變化。western-blot結(jié)果顯示:PHx術(shù)后細(xì)胞增殖指標(biāo)蛋白PCNA的蛋白水平在PHx術(shù)后上升,在36h達(dá)到高峰,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖3A。而TRPM7的蛋白水平同樣在術(shù)后上升并且持續(xù)至72h,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P<0.05)見(jiàn)圖3B。圖3Western-blot法檢測(cè)PHx術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)TRPM7及PCNA蛋白的表達(dá)水平A:PHx術(shù)后肝再生過(guò)程中PCNA蛋白表達(dá)情況;B:PHx術(shù)后肝再生過(guò)程中TRPM7蛋白表達(dá)情況;與0h比較:**P<0.01;與0h比較:***P<0.001
安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文31圖4.阻斷TRPM7通道對(duì)L-02、AML12細(xì)胞活力的影響。(A)運(yùn)用不同濃度(25、50、100、200和400μmol/l)2-APB處理不同時(shí)間(3、6、12、24和48小時(shí))后通過(guò)MTT評(píng)價(jià)L-02細(xì)胞活力的變化。(B)運(yùn)用不同濃度(25、50、100、200和400μmol/l)2-APB處理不同時(shí)間(3、6、12、24和48小時(shí))后通過(guò)MTT評(píng)價(jià)AML12細(xì)胞活力的變化。(C)不同濃度(25、50、100、200和400μmol/l)2-APB處理L-02細(xì)胞24或48小時(shí)后觀察細(xì)胞形成集落能力的變化。(D)不同
本文編號(hào):3116900
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