背景 轉(zhuǎn)化生長因子β1被認為是典型的多功能細胞因子，參與調(diào)節(jié)重要的細胞功能諸如增殖、分化以及組織增生、免疫等基本的生理作用。近來發(fā)現(xiàn)TGF-β1還有一個重要的功能，它可以抑制多種人類腫瘤的生長。對TGF-β1敏感性的喪失據(jù)認為是肝硬化及肝癌的重要致病因素。闡釋肝細胞生長與凋亡調(diào)控的分子和細胞學機制，也許能為肝臟疾病的防治提供新的思路。 目的 本研究旨在明確正常和硬化肝細胞及肝癌細胞中TGF-β1的作用及其與凋亡的關(guān)系。正常肝細胞是否比硬化肝細胞對TGF-β1誘導的凋亡更為敏感?TGF-β1是否能夠誘導肝癌細胞發(fā)生凋亡?在TGF-β1誘導的凋亡信號轉(zhuǎn)導通路中，p53和Smad以及caspase各自扮演何種角色? 方法 通過50％CCL₄腹腔注射，用8W時間誘發(fā)BALB／c小鼠形成肝硬化模型。應用改良的膠原酶原位灌注法分離正常和肝硬化小鼠的肝細胞。利用1.5％的瓊脂糖凝膠電泳觀察DNA梯形條帶來觀測TGF-β1誘導的凋亡。為檢測TGF-β1（5ng／ml）及caspase誘導的凋亡，應用DNA熒光染料Hoechst 33342對肝細胞核進行了染色，并在熒光... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學院北京市

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

鼠肝細胞DNA電泳圖象本實驗共對由肝硬變模型小鼠及正常小鼠的肝組織分離純化的36，，

GF一pl對肝細胞再生分化及凋亡的調(diào)控作用機制加信號轉(zhuǎn)導，但間接調(diào)節(jié)TGF一p的作用。雖然由TGF一pl和TGF-型受體各自的亞單位構(gòu)成的早聚體在信號轉(zhuǎn)導過程中具有一定意但多數(shù)資料顯示，由TGF一pl和TGF一pn型受體形成的異二聚體在一p信號轉(zhuǎn)導中起主導作用。TGF一p的生物學效應是通過與相應受體結(jié)合，特別是與TGF一pl和一pn型受體異二聚體結(jié)合后實現(xiàn)的。TGF一p受體不同于其他信號受處是，TGF一p必須同時與兩種受體(I和n型)結(jié)合才能激活信號轉(zhuǎn)而與一種受體結(jié)合是無效的。利用免疫沉淀技術(shù)證實，TGF一pl和TGF-型受體總是相互伴隨存在，利用TGF一pn型受體阻斷實驗進一步肯這種關(guān)系。受體激活的一個重要步驟就是受體磷酸化，TGF一p首先與跨膜蛋白TGF一pn型受體結(jié)合，形成TpRll一TGF一p一Tp租復合復合物中的Tp班被Tp租I磷酸化，目前I型和n型受體的磷酸化位被確定。磷酸化的Tp獄將信號放大并進一步向后傳遞，從而產(chǎn)生的生物學效應。


本文編號：3094418