肝泡型包蟲病合并膽道侵犯膽汁中外泌體研究
發(fā)布時(shí)間:2021-03-11 11:48
目的:檢測(cè)肝泡型包蟲病合并膽道侵犯患者膽汁中外泌體miRNAs的表達(dá)情況,尋找膽道侵犯生物標(biāo)記物,為后期研究膽道侵犯機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:收集2017年8月至2018年10月就診于青海大學(xué)附屬醫(yī)院、診斷為肝泡型包蟲病的病人膽汁樣本共12例,觀察組(膽道侵犯組)與對(duì)照組(非膽道侵犯組)各6例。經(jīng)超速離心法提取、WB檢測(cè)及透射電鏡觀察聯(lián)合鑒定膽汁中的外泌體結(jié)構(gòu)后,采用Trizol法提取外泌體總RNA,再經(jīng)miRNAs表達(dá)譜芯片實(shí)驗(yàn)檢測(cè)并尋找差異表達(dá)的miRNAs。根據(jù)差異miRNAs預(yù)測(cè)膽道侵犯靶基因,并進(jìn)行通路富集分析。結(jié)果:經(jīng)超速離心法提取的各膽汁樣本中外泌體濃度均可滿足WB檢測(cè)及miRNAs表達(dá)譜芯片上樣要求。經(jīng)芯片實(shí)驗(yàn),觀察組與對(duì)照組比較,共有74個(gè)差異表達(dá)的miRNAs,其中9個(gè)表達(dá)上調(diào),65個(gè)表達(dá)下調(diào)。根據(jù)差異miRNAs預(yù)測(cè)到45個(gè)膽道侵犯靶基因,如AFF3、STK4、PIK3R1等。經(jīng)Pathway分析,靶基因主要富集在Pathways in cancer(腫瘤發(fā)生)、Phosphatidylinositol signaling system(磷脂酰肌醇信號(hào)系統(tǒng))、PTEN等...
【文章來源】:青海大學(xué)青海省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
超速離心法提取膽汁中外泌體流程圖
Biotin HSR RNA Labeling Kit 各試劑s 的生物信息分析分析過程包括:芯片數(shù)據(jù)的質(zhì)量評(píng)價(jià)的功能分析等內(nèi)容。A 組相對(duì)于 B 組數(shù) Fold Change=對(duì)照組觀察組;若組。以|Fold Change|>2 作為顯著性差 miRNAs,在 Targetscan,miRNA.O測(cè),選取 Count 數(shù)(即該基因在數(shù)據(jù)iRNA 的靶基因,以提高可信度。以 FD-value 經(jīng) Fisher 精確檢驗(yàn)后,再經(jīng) Be性指標(biāo),進(jìn)行 Pathway 分析及 GO 注
WB檢測(cè)各特異性蛋白條帶
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Exosome及其他胞外囊泡在病原微生物中的研究進(jìn)展[J]. 賀平,袁東亞,吳忠道. 中國病原生物學(xué)雜志. 2017(04)
[2]全國重點(diǎn)寄生蟲病的防控形勢(shì)與挑戰(zhàn)[J]. 嚴(yán)俊,胡桃,雷正龍. 中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2015(06)
[3]原發(fā)性肝癌侵犯膽道的ERCP特征[J]. 王錦波,何振平,陳維亮. 實(shí)用醫(yī)藥雜志. 2004(11)
[4]原發(fā)性肝癌侵犯膽道的診斷及治療[J]. 王錦波,何振平. 肝膽外科雜志. 1999(03)
本文編號(hào):3076407
【文章來源】:青海大學(xué)青海省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
超速離心法提取膽汁中外泌體流程圖
Biotin HSR RNA Labeling Kit 各試劑s 的生物信息分析分析過程包括:芯片數(shù)據(jù)的質(zhì)量評(píng)價(jià)的功能分析等內(nèi)容。A 組相對(duì)于 B 組數(shù) Fold Change=對(duì)照組觀察組;若組。以|Fold Change|>2 作為顯著性差 miRNAs,在 Targetscan,miRNA.O測(cè),選取 Count 數(shù)(即該基因在數(shù)據(jù)iRNA 的靶基因,以提高可信度。以 FD-value 經(jīng) Fisher 精確檢驗(yàn)后,再經(jīng) Be性指標(biāo),進(jìn)行 Pathway 分析及 GO 注
WB檢測(cè)各特異性蛋白條帶
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Exosome及其他胞外囊泡在病原微生物中的研究進(jìn)展[J]. 賀平,袁東亞,吳忠道. 中國病原生物學(xué)雜志. 2017(04)
[2]全國重點(diǎn)寄生蟲病的防控形勢(shì)與挑戰(zhàn)[J]. 嚴(yán)俊,胡桃,雷正龍. 中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2015(06)
[3]原發(fā)性肝癌侵犯膽道的ERCP特征[J]. 王錦波,何振平,陳維亮. 實(shí)用醫(yī)藥雜志. 2004(11)
[4]原發(fā)性肝癌侵犯膽道的診斷及治療[J]. 王錦波,何振平. 肝膽外科雜志. 1999(03)
本文編號(hào):3076407
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/xiaohjib/3076407.html
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