目的:檢測肝泡型包蟲病合并膽道侵犯患者膽汁中外泌體miRNAs的表達情況,尋找膽道侵犯生物標記物,為后期研究膽道侵犯機制奠定基礎(chǔ)。方法:收集2017年8月至2018年10月就診于青海大學附屬醫(yī)院、診斷為肝泡型包蟲病的病人膽汁樣本共12例,觀察組（膽道侵犯組）與對照組（非膽道侵犯組）各6例。經(jīng)超速離心法提取、WB檢測及透射電鏡觀察聯(lián)合鑒定膽汁中的外泌體結(jié)構(gòu)后,采用Trizol法提取外泌體總RNA,再經(jīng)miRNAs表達譜芯片實驗檢測并尋找差異表達的miRNAs。根據(jù)差異miRNAs預測膽道侵犯靶基因,并進行通路富集分析。結(jié)果:經(jīng)超速離心法提取的各膽汁樣本中外泌體濃度均可滿足WB檢測及miRNAs表達譜芯片上樣要求。經(jīng)芯片實驗,觀察組與對照組比較,共有74個差異表達的miRNAs,其中9個表達上調(diào),65個表達下調(diào)。根據(jù)差異miRNAs預測到45個膽道侵犯靶基因,如AFF3、STK4、PIK3R1等。經(jīng)Pathway分析,靶基因主要富集在Pathways in cancer（腫瘤發(fā)生）、Phosphatidylinositol signaling system（磷脂酰肌醇信號系統(tǒng)）、PTEN等... 

【文章來源】：青海大學青海省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

超速離心法提取膽汁中外泌體流程圖

Biotin HSR RNA Labeling Kit 各試劑s 的生物信息分析分析過程包括：芯片數(shù)據(jù)的質(zhì)量評價的功能分析等內(nèi)容。A 組相對于 B 組數(shù) Fold Change=對照組觀察組；若組。以|Fold Change|>2 作為顯著性差 miRNAs，在 Targetscan，miRNA.O測，選取 Count 數(shù)（即該基因在數(shù)據(jù)iRNA 的靶基因，以提高可信度。以 FD-value 經(jīng) Fisher 精確檢驗后，再經(jīng) Be性指標，進行 Pathway 分析及 GO 注

WB檢測各特異性蛋白條帶

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3076407