發(fā)布時(shí)間：2021-03-10 00:14

　　第一部分HBV相關(guān)肝癌p16^INK4A/RB途徑相關(guān)基因異常甲基化目的抑癌基因甲基化、p16^INK4A等基因表達(dá)失活和HBV感染均為肝癌形成過程中的常見現(xiàn)象,但他們之間的相互關(guān)系并不清楚。本文旨在探討:（1）肝癌p16^INK4A/RB途徑相關(guān)基因異常甲基化情況;（2）p16^INK4A/RB途徑相關(guān)基因異常甲基化形成是否與HBV感染有關(guān)。方法采用ELISA法檢測HBV感染標(biāo)志物;用酚/氯仿抽提、乙醇沉淀法提取組織DNA,用血液微量DNA提取試劑提取術(shù)前外周血液中DNA,經(jīng)重亞硫酸鈉轉(zhuǎn)換,將未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)換成尿嘧啶,再經(jīng)純化,甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)。用甲基化特異性PCR檢測抑癌基因甲基化產(chǎn)物;用實(shí)時(shí)定量PCR檢測HBV-DNA和抑癌基因表達(dá)水平;用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果共檢測了44例肝癌組織DNA中p14^ARF、p15^INK4B、p16^INK4A和RB的甲基化情況,上述四個(gè)基因的甲基化產(chǎn)物檢測頻率分別為:15/44（... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：148 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

real-PCRPCR儀設(shè)置示意圖

22p16INK4A圖 4 p16INK4A、p15INK4B、p14ARF和 GAPDH 熔點(diǎn)曲線圖與甲基化陰性的癌旁組織表達(dá)水平的均值比較，正常表達(dá)量 0.7-1.1 為陽性表達(dá).4-0.699 為弱陽性表達(dá)，小于 0.4 倍正常表達(dá)量為陰性表達(dá)。

實(shí)時(shí)定量PCR檢測HBV-DNA結(jié)果示意圖


本文編號(hào)：3073718