第一部分HBV相關肝癌p16^INK4A/RB途徑相關基因異常甲基化目的抑癌基因甲基化、p16^INK4A等基因表達失活和HBV感染均為肝癌形成過程中的常見現(xiàn)象,但他們之間的相互關系并不清楚。本文旨在探討:（1）肝癌p16^INK4A/RB途徑相關基因異常甲基化情況;（2）p16^INK4A/RB途徑相關基因異常甲基化形成是否與HBV感染有關。方法采用ELISA法檢測HBV感染標志物;用酚/氯仿抽提、乙醇沉淀法提取組織DNA,用血液微量DNA提取試劑提取術前外周血液中DNA,經(jīng)重亞硫酸鈉轉(zhuǎn)換,將未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)換成尿嘧啶,再經(jīng)純化,甲基化特異性聚合酶鏈反應。用甲基化特異性PCR檢測抑癌基因甲基化產(chǎn)物;用實時定量PCR檢測HBV-DNA和抑癌基因表達水平;用SPSS12.0軟件進行統(tǒng)計分析。結(jié)果共檢測了44例肝癌組織DNA中p14^ARF、p15^INK4B、p16^INK4A和RB的甲基化情況,上述四個基因的甲基化產(chǎn)物檢測頻率分別為:15/44（... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

real-PCRPCR儀設置示意圖

22p16INK4A圖 4 p16INK4A、p15INK4B、p14ARF和 GAPDH 熔點曲線圖與甲基化陰性的癌旁組織表達水平的均值比較，正常表達量 0.7-1.1 為陽性表達.4-0.699 為弱陽性表達，小于 0.4 倍正常表達量為陰性表達。

實時定量PCR檢測HBV-DNA結(jié)果示意圖


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