【研究目的】阻塞性黃疸存在著多種病理生理改變,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)阻塞性黃疸動物存在血管內皮的損傷及創(chuàng)傷修復延遲。血管新生是創(chuàng)傷修復及手術后傷口修復的重要環(huán)節(jié),但是阻塞性黃疸是否直接抑制了創(chuàng)傷修復未見報道;而又是何種因素在血管內皮損傷中發(fā)揮作用也尚未清楚。既往有關創(chuàng)傷修復及血管新生的報道也多與內皮祖細胞相關,但多與血管新生經典VEGF信號通路相關;本研究旨在對阻塞性黃疸、膽汁酸與其膜受體對內皮祖細胞在缺血損傷修復中的作用進行研究�！狙芯糠椒ā勘菊n題的主要研究方法為:（1）分析阻塞性黃疸對皮損創(chuàng)傷傷口修復的影響,采用免疫熒光傷口處的血管新生情況;（2）采用缺血損傷的經典模型股動脈結扎分析阻塞性黃疸對缺血損傷修復的影響;（3）分別觀察膽汁酸與膽紅素對股動脈結扎后缺血損傷修復的影響;（4）體外分離培養(yǎng)原代內皮祖細胞并采用免疫熒光和流式細胞術等多種方法進行鑒定;（5）采用小干擾RNA對內皮祖細胞膽汁酸核受體FXR與膜受體TGR5分別進行干擾并采用Western blotting驗證,然后采用膽汁酸進行孵育,觀察內皮祖細胞的遷移與成管能力;（6）原代內皮祖細胞采用膽汁酸進行孵育后,PCR檢測多種... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
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中文摘要
Abstract
前言
1 實驗材料
    1.1 .實驗動物
    1.2 實驗細胞
    1.3 實驗儀器設備和耗材
    1.4 試劑配劑
    1.5 主要試劑配方
2 實驗方法
    2.1 小鼠皮損創(chuàng)傷動物模型建立
    2.2 小鼠股動脈結扎模型建立
    2.3 流式細胞術
    2.4 激光多普勒血流掃描
    2.5 免疫熒光染色
    2.6 免疫組織化學染色
    2.7 免疫蛋白印記分析
    2.8 實時定量熒光PCR
    2.9 原代細胞分離培養(yǎng)
    2.10 小干擾RNA干擾實驗
    2.11 細胞劃痕實驗
    2.12 細胞成管實驗
    2.13 細胞Transwell實驗
    2.14 細胞回輸實驗
    2.15 統(tǒng)計分析
3 實驗結果
    3.1 阻塞性黃疸小鼠存在皮損創(chuàng)傷術后修復延遲現(xiàn)象
    3.2 阻塞性黃疸抑制股動脈結扎后血管新生
    3.3 膽汁酸而非膽紅素抑制股動脈結扎術后血流灌注與組織血管密度
    3.4 體外分離培養(yǎng)內皮祖細胞并鑒定
    3.5 膽汁酸作用于內皮祖細胞膽汁酸膜受體 TGR5 抑制內皮祖細胞遷移、分化與成管能力。
    3.6 膽汁酸孵育抑制內皮祖細胞各種促血管新生因子表達
4 討論
5 結論
6 參考文獻
7 綜述
    綜述參考文獻
9 致謝



本文編號：3031423