背景與目的腸道粘膜免疫反應(yīng)功能失調(diào)被認(rèn)為是炎癥性腸�。↖BD）發(fā)病機(jī)制中的重要環(huán)節(jié),其中損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）激發(fā)腸道免疫炎癥損傷這一機(jī)制得到廣泛關(guān)注。血小板微粒（PMPs）作為血小板活化后的重要產(chǎn)物,可表達(dá)多種重要的DAMPs信號(hào)。研究表明PMPs在系統(tǒng)性硬化癥中表現(xiàn)出誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞產(chǎn)生中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)（NETs）的能力,其是否參與IBD炎癥損傷機(jī)制尚不清楚,因此探討PMPs對(duì)于腸道炎癥影響及其可能機(jī)制對(duì)于IBD的防治具有重要的理論意義。本研究旨在探討炎癥性腸病中PMPs的表達(dá)情況及其與疾病活動(dòng)程度的關(guān)聯(lián),并分析PMPs對(duì)DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎癥的影響及其可能機(jī)制。方法1、招募118例IBD確診患者及35例健康對(duì)照,分為潰瘍性結(jié)腸炎組（UC組,n=54）、克羅恩病組（CD組,n=64）及健康對(duì)照組（HCs組,n=35）,采集標(biāo)本,應(yīng)用多參數(shù)（CD61、膜聯(lián)蛋白V）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PMPs含量,通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析PMPs表達(dá)與疾病活動(dòng)度的關(guān)聯(lián)。2、收集IBD患者腸管嚴(yán)重病損部位及正常部位的腸粘膜標(biāo)本,使用免疫熒光法標(biāo)記,在激光掃描共聚焦顯微鏡（LCSM）下觀察用于標(biāo)記PMPs的CD... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PMPs流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果橫坐標(biāo)表示異硫氰酸熒光素（FITC），縱坐標(biāo)表示藻紅蛋白（PE）

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文25圖2不同來(lái)源的PMPs表達(dá)水平與正常對(duì)照組相比，UC及CD患者外周血中PMPs表達(dá)水平增加，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。UC及CD組患者中PMPs增加程度無(wú)明顯不同（P＞0.05）。5.1.3血漿中PMPs表達(dá)與IBD疾病活動(dòng)之間的相關(guān)性分析在UC患者中，輕度、中度、重度PMPs表達(dá)水平分別為1832.94±1746.09/μL，2097.68±1581.15/μL及5291.17±3730.62/μL（圖3）。如圖，輕度與中度組間無(wú)差異（P＞0.05），輕度與重度、中度與重度組間存在差異（P＜0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在CD患者中，緩解期、輕度、中度及重度PMPs水平分別為1831.00±1009.17/μL，1858.56±1642.68/μL，2648.45±2365.78/μL及6164.44±2728.23/μL（圖4）。如圖，緩解期與重度、輕度與重度、中度與重度組間存在差異（P<0.05），其余組間無(wú)明顯差異，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文27傷變形，腺體融合或被大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，尤其是UC組結(jié)腸隱窩膿腫處CD61表達(dá)明顯增強(qiáng)。圖5-APMPs在IBD腸粘膜中的表達(dá)（×40倍鏡）圖中藍(lán)色為DAPI標(biāo)記的DNA，紅色為Cy5標(biāo)記的CD61。正常對(duì)照（NC）組中，腸粘膜上皮組織大致正常，腺體結(jié)構(gòu)完整，可見少量CD61表達(dá)。在CD組及UC組中，CD61表達(dá)明顯增加，可見腸粘膜部分上皮損傷變形，腺體融合或被大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，尤其是UC組結(jié)腸隱窩膿腫處CD61表達(dá)明顯增強(qiáng)。5.2.2NETs在IBD腸粘膜中的表達(dá)與分布為觀察腸粘膜局部是否有NETs形成，我們對(duì)各組的結(jié)腸組織進(jìn)行預(yù)處理后，使用DAPI、MPO及H3多重免疫熒光染色，僅在某例重癥UC患者的結(jié)腸標(biāo)本局部見到如下圖（圖5-B）結(jié)構(gòu)，中性粒細(xì)胞胞核扭曲解旋，顆粒蛋白MPO粘附在外放的染色質(zhì)中，MPO和DNA便出現(xiàn)共定位，考慮系NETs形成。圖5-BPMPs在IBD腸粘膜中的表達(dá)（×63倍油鏡）圖中藍(lán)色為DAPI標(biāo)記的DNA，綠色為FITC標(biāo)記的髓過(guò)氧化物酶（MPO），紅色為AlexaFluor555標(biāo)記的組蛋白Histone3（H3）。中性粒細(xì)胞胞核扭曲解旋，顆粒蛋白MPO粘附在外放的染色質(zhì)中，MPO和DNA便出現(xiàn)共定位，考慮系NETs形成。5.3PMPs誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞釋放NETs

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見（2018年·北京）[J]. 吳開春,梁潔,冉志華,錢家鳴,楊紅,陳旻湖,何瑤.  中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志. 2018(09)
[2]慢性阻塞性肺疾病患者支氣管肺泡灌洗液中血小板及內(nèi)皮細(xì)胞微粒變化的探討[J]. 但小蘋,邱倩,楊再興,焦燕,熊瑋.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(24)



本文編號(hào)：3029516