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外源性硫化氫對大鼠結(jié)腸平滑肌細胞L-型鈣通道的調(diào)節(jié)作用

發(fā)布時間:2021-01-14 10:52
  背景:硫化氫(H2S),作為一種氣體信號分子,能在大鼠結(jié)腸組織內(nèi)源性產(chǎn)生,也可以通過腸道細菌代謝產(chǎn)生。外源性和內(nèi)源性H2S都在腸道發(fā)揮重要作用,如降低內(nèi)臟敏感性,調(diào)節(jié)腸道Cajal細胞的活動,調(diào)節(jié)腸道動力等。L-型鈣通道在結(jié)腸平滑肌層和黏膜下層組織中都有表達。該通道參與腸道平滑肌收縮和細胞興奮性調(diào)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)一些腸道動力疾病存在L-型鈣通道的表達異常。因此,L-型鈣通道可能是腸道動力障礙疾病的潛在治療靶點。H2S可以調(diào)控L-型鈣通道,但其作用因組織不同或動物種屬不同而存在差異。我們前期研究結(jié)果提示外源性H2S抑制大鼠結(jié)腸平滑肌細胞L-型鈣通道的激活,但具體分子機制仍未明確。硫氫化鈉(NaHS)和二烯丙基三硫化物(DATS)均作為H2S外源性供體,用于實驗研究。本研究主要探討NaHS和DATS作用于結(jié)腸平滑肌細胞L-型鈣通道的可能機制以及對結(jié)腸動力的相關(guān)影響。第一部分 硫氫化鈉對大鼠結(jié)腸平滑肌細胞L-型鈣通道的調(diào)節(jié)機制目的:探討硫氫化鈉(NaHS)對結(jié)腸平滑肌細胞L-型鈣通道的直接調(diào)節(jié)作用及可能機制。方法:選取健康雄性Wistar大鼠中段結(jié)腸組織,膠原酶消化法急性分離平滑肌細胞。采用全細... 

【文章來源】:武漢大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:83 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

外源性硫化氫對大鼠結(jié)腸平滑肌細胞L-型鈣通道的調(diào)節(jié)作用


圖1.2急性分離的結(jié)腸平滑肌細胞鏡下觀(400X)??

示意圖,大鼠,結(jié)腸,示意圖


外源性硫化氫對大鼠結(jié)腸平滑肌細胞L-型鈣通道的調(diào)節(jié)作用驗結(jié)果??鼠結(jié)腸分段及平滑肌細胞的特點??近端結(jié)腸起始于盲腸末端,特征性的黏膜走向與縱軸成45°,有近端結(jié)腸有一個派伊爾結(jié),為集合淋巴小結(jié)。中段結(jié)腸被認為是至距第二個派伊爾結(jié)向下lcm處。中段結(jié)腸有較小的縱向排列的結(jié)腸是被認為從中結(jié)腸末端延伸到第三個派伊爾結(jié)的地方,終止近(圖1.1)。??、?、一-?w---???

曲線,峰電流密度,鈣通道,電壓


中加入NaHS,使終濃度為300?uM,孵育3分鐘,記錄電流。??以刺激電壓為X軸,峰電流密度為Y軸,作電流-電壓(I-V)曲線。300?u?M?NaHS??使I-V曲線明顯右移(圖1.3?C)。給藥前L-型鈣通道峰電流在OmV刺激電壓時??出現(xiàn),300?uMNaHS作用后需要去極化到+20mV達到峰值。OmV刺激電壓時給予??300?uM?NaHS后電流密度明顯減小,從-2.54±0.41?pA/pF降低到-1.31?±0.34??pA/pF?(P<0.?05,?vs.?normal,n=6)(圖?1.?3?A,B),而在整個刺激時程中,+20mV??刺激電壓時峰電流密度增大到-4.?16土0.62?pA/pF?(圖1.3?B,C)。??為了觀測NaHS對L-型鈣通道穩(wěn)態(tài)激活的影響,用Boltzmann方程進行擬合,??G/Grax?=?l/[l+exp(VT?-?V1/2/k:)],用?1/1_?代替?G/G^?I/Imx表示各個刺激電??壓下峰電流值除以整個刺激時程的峰電流值,VT表示去極化刺激電壓,V1/2代表??半數(shù)激活電壓

【參考文獻】:
期刊論文
[1]外源性硫化氫對人宮頸癌HeLa細胞的影響及作用機制[J]. 馮曉冰,陳建國,楊翼鷹,陳景福,甄育蘭.  山東醫(yī)藥. 2016(37)
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[3]Hydrogen sulfide-induced enhancement of gastric fundus smooth muscle tone is mediated by voltagedependent potassium and calcium channels in mice[J]. Xiang-Min Meng,Xu Huang,Chun-Mei Zhang,Dong-Hai Liu,Hong-Li Lu,Young-chul Kim,Wen-Xie Xu.  World Journal of Gastroenterology. 2015(16)
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[6]大蒜素對大鼠心室肌細胞L-型鈣通道的影響[J]. 鄧春玉,莊寧寧,單志新,錢衛(wèi)民,阮小薇,吳書林,林曙光.  中藥藥理與臨床. 2005(03)

碩士論文
[1]硫化氫對健康雄性大鼠胃運動的影響及其機制研究[D]. 葉艷芳.山東大學 2009



本文編號:2976768

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