乳鐵蛋白（Lactoferrin, LF）是一種鐵結(jié)合糖蛋白,屬于轉(zhuǎn)鐵蛋白家族。乳鐵蛋白主要由粘膜上皮細胞和多形核淋巴細胞產(chǎn)生,并分泌到乳汁、唾液、鼻腔粘膜分泌物、淚液、腸粘液、生殖道分泌物中。乳鐵蛋白的生理功能廣泛,包括維持鐵穩(wěn)態(tài)、廣譜抗菌、抗病毒、抗炎、抗腫瘤等。作為一種天然免疫分子,乳鐵蛋白在預(yù)防病原微生物感染和抑制過度炎癥反應(yīng)方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。EB病毒（Epstein-Barr virus, EBV）在人類廣泛傳播,是單核細胞增多癥的病因,并與多種腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),如霍奇金病、伯基特淋巴瘤和鼻咽癌。EBV具有明顯的親B細胞嗜性。EB病毒能夠選擇性地黏附到B細胞表面,主要是通過病毒包膜糖蛋白與B細胞表面CD21分子（EB病毒的受體）之間的交互作用；進入細胞之后,EB病毒可使B細胞永生化。上皮細胞中也可檢出EB病毒,其是潛在的致癌因素。新近研究發(fā)現(xiàn),EBV能直接感染單核／巨噬細胞等多種免疫細胞,誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生大量的炎癥因子,在早期可起到抗感染作用,但過度的炎癥反應(yīng)可對器官造成損傷。我們的前期研究對18個湖南鼻咽癌高發(fā)家系進行了單體型分析和連鎖分析,發(fā)現(xiàn)染色體3p21為鼻咽癌易感基因... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞簡表
第一章 前言
    乳鐵蛋白在鼻咽癌組織中顯著下調(diào)，是鼻咽癌候選抑癌基因
    乳鐵蛋白是一種分泌蛋白，是天然免疫系統(tǒng)的重要組成成分
    孰鐵蛋白的抗病毒感染作用及機制
    乳鐵蛋白抗炎作用機理及其意義
    EB病毒感染與鼻咽癌
    EB病毒感染與天然免疫
    科學(xué)假設(shè)
    技術(shù)路線
第二章 材料與方法
    1 材料
        1.1 細胞和細胞系
        1.2 病毒
        1.3 菌株和質(zhì)粒
        1.4 試劑
        1.5 主要儀器
    2 方法
        2.1 外周血單個核細胞分離（密度梯度離心法,Ficoll法）
+B淋巴細胞">        2.2 磁珠分選CD19⁺B淋巴細胞
        2.3 THP1誘導(dǎo)成為巨噬細胞
        2.4 EB病毒的制備和滴度測定
        2.5 流式細胞術(shù)
        2.6 間接免疫熒光
        2.7 EB病毒DNA抽提
        2.8 細胞總RNA抽提
        2.9 消化RNA中痕量DNA
        2.10 逆轉(zhuǎn)錄
        2.11 實時熒光定量PCR（Real-time PCR）
        2.12 熒光原位雜交（FISH）
        2.13 質(zhì)粒抽提（小量）
        2.14 表達載體的構(gòu)建
        2.15 質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染
        2.16 siRNA的轉(zhuǎn)染
        2.17 病毒DNA的轉(zhuǎn)染
        2.18 CpG DNA處理細胞
        2.19 細胞蛋白的抽提
        2.20 BCA法測蛋白濃度
        2.21 免疫共沉淀
        2.22 Western blot
        2.23 熒光素酶報告活性檢測
        2.24 統(tǒng)計學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    第一部分 LF抑制EB病毒感染及其機制
        1.1 LF抑制EBV與B淋巴細胞的結(jié)合
        1.2 LF抑制EBV進入B淋巴細胞
        1.3 LF與CD21存在交互作用
        1.4 LF不影響B(tài)細胞中EBV的復(fù)制
        1.5 LF能抑制B淋巴細胞向鼻咽上皮細胞傳遞EBV
    第二部分 LF抑制EBV感染介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的機制
        2.1 LF通過降低NF-κB的活性抑制EBV誘導(dǎo)的IL-8和MCP-1表達上調(diào)
        2.2 LF通過與TLR2結(jié)合抑制TLR2介導(dǎo)的NF-κB的活化
        2.3 LF通過抑制EBV DNA對TLR9通路的誘導(dǎo),而下調(diào)IL-8表達
        2.4 CD14促進EBV DNA誘導(dǎo)IL-8的表達
        2.5 LF具有抑制CD14促進EBV DNA誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的功能
        2.6 LF抑制CD14與TLR9的結(jié)合,進而抑制炎癥反應(yīng)
第四章 討論
    第一部分 乳鐵蛋白抑制EB病毒感染宿主細胞
    第二部分 乳鐵蛋白抑制EB病毒感染性炎癥的機制
結(jié)論
參考文獻
綜述一
    參考文獻
綜述二
    參考文獻
致謝
攻讀博士學(xué)位期間主要研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]乳鐵蛋白與腫瘤關(guān)系的研究進展[J]. 李洪波,周強,滕國新,許曉曦.  食品工業(yè)科技. 2010(01)
[2]乳鐵蛋白在腫瘤治療中的作用機制[J]. 陳曉泓,張博恒.  復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2010(01)
[3]細胞周期調(diào)控與腫瘤[J]. 鄒向陽,李連宏.  國際遺傳學(xué)雜志. 2006(01)

博士論文
[1]鼻咽癌發(fā)病不同階段分子標志物的鑒定及差異表達基因相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建[D]. 張文玲.中南大學(xué) 2009
[2]染色體3p21鼻咽癌易感基因區(qū)LTF基因的篩查及其抑制鼻咽癌細胞增殖的功能研究[D]. 周艷宏.中南大學(xué) 2007
[3]Epstein-Barr病毒在Burkitt淋巴瘤細胞（Raji）染色體上整合的初步研究[D]. 高建明.中南大學(xué) 2006



本文編號：2965387