目的肝纖維化是由于各種急慢性炎癥刺激肝臟導(dǎo)致?lián)p傷修復(fù)反應(yīng)而產(chǎn)生的結(jié)果,其中,肝星狀細胞（hepatic stellate cells,HSC）的活化被認為是纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié),現(xiàn)研究已證實骨髓間充質(zhì)干細胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）移植治療能改善甚至逆轉(zhuǎn)肝纖維化,但其具體機制尚不清楚。本研究通過用人 BMSCs（human bone marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs）培養(yǎng)上清誘導(dǎo)HSC,觀察誘導(dǎo)后對HSC增殖周期及表達的基質(zhì)金屬蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）及組織抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-1（tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1）的影響。方法在無菌條件下抽取肝硬化志愿者骨髓5ml,采用密度梯度離心法分離HBMSCs,接種于25cm2塑料培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),收集原代培養(yǎng)7d的HBMSCs培養(yǎng)上清,加入HSC中共培... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖４－１原代培養(yǎng)７ｄ的骨髓間充質(zhì)干細胞呈梭形，貼壁生長（倒置顯微鏡，ｘｌ〇）??

蘭州大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文??圖４－２?ＨＢＭＳＣｓ細胞表面標(biāo)志??４．?３流式細胞儀分析ＨＢＭＳＣｓ培養(yǎng)上清與ＨＳＣ共培養(yǎng)后ＨＳＣ細胞周期??流式細胞儀檢測結(jié)果顯示，ＨＳＣ和ＨＢＭＳＣｓ培養(yǎng)上清共培養(yǎng)２４ｈ組與ＨＳＣ??培養(yǎng)２４ｈ組相比，ＨＳＣ未見明顯的抑制（ｐ?＞?０．０５）。而ＨＳＣ和ＨＢＭＳＣｓ培養(yǎng)上清??培養(yǎng)４８ｈ組與ＨＳＣ培養(yǎng)４８ｈ組相比，Ｇ１期細胞顯著增加（／ＫｆｔＷ），Ｓ期細胞減??少（／Ｋ０．Ｗ），見圖４－３及表４－１。??２２??

培養(yǎng)上清共培養(yǎng)組分別培養(yǎng)２４ｈ和４８ｈ后，ＭＭＰ－２表達量均下降，低于ＨＳＣ培養(yǎng)??組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（；？＜０．Ｗ）。表明ＨＢＭＳＣｓ可抑制ＨＳＣ表達ＭＭＰ－２，??結(jié)果見圖４－４及表４－２。??１?２?３?４?５??］：ＨＢＭＳＣｓ陰性對照組；２：?ＨＳＣ培養(yǎng)２４ｈ組；３：?ＨＳＣ培養(yǎng)４８ｈ組；??４：?ＨＳＣ和ＨＢＭＳＣｓ培養(yǎng)上清共培養(yǎng)２４ｈ組；５：?ＨＳＣ和ＨＢＭＳＣｓ培養(yǎng)上清共培養(yǎng)４８ｈ組??圖４－４各組中ＭＭＰ－２蛋白的表達???表４－２?各組中ＭＭＰ－２蛋白的表達（ｘ?土?ｓ）?????ｎ?ＭＭＰ－２?（ＩＯＤ）??ＨＢＭＳＣｓ?陰性對照?３?６８１．３８７２±６７．１９８９??ＨＳＣ?培養(yǎng)?２４ｈ?３?６４４．０４８７±６６．７１６］??ＨＳＣ?培養(yǎng)?４８ｈ?３?７７１．０３３４±８６．２７５．８??ＨＳＣ?和?ＨＢＭＳＣｓ?培養(yǎng)上清共培養(yǎng)?２４ｈ?３?３８４．９０２?ｌ±７４．３３９０ａ??ＨＳＣ?和?ＨＢＭＳＣｓ?培養(yǎng)上清共培養(yǎng)?４８ｈ?３?２２９．１７７２±４７．９０８７ｂ??注：＾ＨＳＣ培養(yǎng)２４ｈ組相比較，％ＨＳＣ培養(yǎng)４８ｈ組相比較，??４．５?ＥＬＩＳＡ法檢測各實驗組細胞上清液中ＭＭＰ－１、ＴＩＭＰ－１蛋白的表達??ＥＬＩＳＡ法結(jié)果顯示，ＨＢＭＳＣｓ可以促進體外培養(yǎng)的ＨＳＣ?ＭＭＰ－１的表達，??ＨＢＭＳＣｓ誘導(dǎo)ＨＳＣ２４ｈ、４８ｈ，與ＨＳＣ培養(yǎng)２４ｈ、４８ｈ相比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意??義（Ｐ＜０．０５），同時結(jié)果顯示，ＨＢＭＳＣｓ可以抑制體外培養(yǎng)的ＨＳＣＴＩＭＰ－１的表達，??ＨＢＭＳＣｓ培養(yǎng)上清和ＨＳＣ共培養(yǎng)２４ｈ、４８ｈ

【參考文獻】：
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細胞共培養(yǎng)對肝星狀細胞增殖、凋亡和RohA表達的調(diào)控[J]. 陳國忠,姜海行,陸正峰,肖健,梁梓宇,覃山羽.  世界華人消化雜志. 2010(16)
[2]體外共培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞對肝星狀細胞增殖的影響:CyclinD1與P27表達調(diào)控[J]. 王東旭,姜海行,蘇思標(biāo),覃山羽,梁梓宇.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(10)
[3]人骨髓間質(zhì)干細胞對肝星狀細胞的體外調(diào)控[J]. 胡昆鵬,林楠,林繼宗,鄧美海,湯照峰,項鵬,許瑞云.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(27)
[4]成人骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、鑒定和生物學(xué)特性[J]. 杜振宗,任華,張超紀,宋劍非,鄭民,李牧.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(43)
[5]Prevalence of fatty liver disease and its risk factors in the population of South China[J]. Yong-Jian Zhou,Yu-Yuan Li,Min-Hu Chen,Pin-Jin Hu,Department of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital,Sun Yat-Sen University of Medical Sciences,Guangzhou 510080,Guangdong Province ,China Yong-Jian Zhou,Yu-Yuan Li,Yu-Qiang Nie,Sheng-Li Shi,Department of Gastroenterology and Hepatology,First Municipal People’s Hospital of Guangzhou,Guangzhou Medical College,Guangzhou 510180,Guangdong Province,China Jin-Xiang Ma,Department of Prevention Medicine,Guangzhou Medical College,Guangzhou 510182,Guangdong Province,China Lun-Gen Lu,Department of Gastroenterology,Renji Hospital,Shanghai Institute of Digestive Disease,Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai 200001,China.  World Journal of Gastroenterology. 2007(47)
[6]陜、甘兩省酒精性與非酒精性脂肪肝流行病學(xué)分析[J]. 延華,魯曉嵐,羅金燕,周小彥.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2007(04)
[7]肝星狀細胞激活的分子機制與抗肝纖維化治療[J]. 李婧婷,汪暉,廖長秀,平潔.  武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2007(02)
[8]Feasibility and safety of autologous bone marrow mononuclear cell transplantation in patients with advanced chronic liver disease[J]. Andre Castro lyra,Milena Botelho Pereira Soares,luiz Flavio Maia da Silva,Marcos Fraga Fortes,André Goyanna Pinheiro Silva,Augusto César de Andrade Mota,Sheilla A Oliveira,Eduardo lorens Braga,Wilson Andrade de Carvalho,Bernd Genser,Ricardo Ribeiro dos Santos,luiz Guilherme Costa lyra.  World Journal of Gastroenterology. 2007(07)
[9]實驗性肝纖維化基質(zhì)金屬蛋白酶-2基因表達與酶活性的變化[J]. 朱躍科,王寶恩,申鳳俊,賈繼東,馬紅.  中華肝臟病雜志. 2005(07)
[10]Effects of a plasmid expressing antisense tissue inhibitor of metalloproteinase-1 on liver fibrosis in rats[J]. JIANG Wei, WANG Ji-yao, YANG Chang-qing, LIU Wen-bin, WANG Yi-qing and HE Bo-ming Department of Gastroenterology, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China.  Chinese Medical Journal. 2005(03)



本文編號：2954912