目的：研究HBV感染是否會引起宿主細胞Golgi M I活性升高,通過抑制Golgi M I介導(dǎo)的HBV去甘露聚糖修飾,觀察對DC-SIGN識別及DC成熟和功能的影響,來闡明DC-SIGN在HBV感染中介導(dǎo)的作用,并初步探討HBV通過去甘露聚糖修飾逃逸DC-SIGN的識別,限制DC的活化的機制。方法：一.研究HBV感染是否會引起宿主細胞Golgi M I活性升高1.培養(yǎng)HepG2細胞和HepG2.2.15細胞,采用蔗糖密度梯度離心法分離純化高爾基復(fù)合體；2.比色法檢測兩種細胞高爾基復(fù)合體中Golgi M I的活性；3. RT-PCR法檢測基因MAN1A1、MAN1A2和MANIC1 mRNA的表達；4. Western blot檢測上述3種基因編碼的蛋白的表達情況。二. DC-SIGN在識別HBV并活化DC中介導(dǎo)作用的研究1.將不同終濃度的Golgi M I抑制劑——基夫堿加到HepG2.2.15細胞的培養(yǎng)基中,作用24小時后分離高爾基體,比色法檢測Golgi M I的活性；2.在HepG2.2.15細胞的培養(yǎng)基中加入終濃度為5ug/ml的基夫堿,持續(xù)處理5天后收集其培養(yǎng)上清液,提取得... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
研究背景
    參考文獻
第一部分 研究HBV感染與宿主細胞Golgi MI活性的關(guān)系
    摘要
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第二部分 DC-SIGN在識別HBV并活化DC中介導(dǎo)作用的研究
    摘要
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第三部分 HBV去甘露聚糖修飾逃逸DC-SIGN免疫識別的機制初探
    摘要
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
全文小結(jié)
綜述 DC對HBV免疫識別的研究進展
    參考文獻
附錄1 中英文縮略詞表
附錄2 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2900869