發(fā)布時(shí)間：2020-12-06 06:08

　　目的：研究HBV感染是否會(huì)引起宿主細(xì)胞Golgi M I活性升高,通過(guò)抑制Golgi M I介導(dǎo)的HBV去甘露聚糖修飾,觀察對(duì)DC-SIGN識(shí)別及DC成熟和功能的影響,來(lái)闡明DC-SIGN在HBV感染中介導(dǎo)的作用,并初步探討HBV通過(guò)去甘露聚糖修飾逃逸DC-SIGN的識(shí)別,限制DC的活化的機(jī)制。方法：一.研究HBV感染是否會(huì)引起宿主細(xì)胞Golgi M I活性升高1.培養(yǎng)HepG2細(xì)胞和HepG2.2.15細(xì)胞,采用蔗糖密度梯度離心法分離純化高爾基復(fù)合體；2.比色法檢測(cè)兩種細(xì)胞高爾基復(fù)合體中Golgi M I的活性；3. RT-PCR法檢測(cè)基因MAN1A1、MAN1A2和MANIC1 mRNA的表達(dá)；4. Western blot檢測(cè)上述3種基因編碼的蛋白的表達(dá)情況。二. DC-SIGN在識(shí)別HBV并活化DC中介導(dǎo)作用的研究1.將不同終濃度的Golgi M I抑制劑——基夫堿加到HepG2.2.15細(xì)胞的培養(yǎng)基中,作用24小時(shí)后分離高爾基體,比色法檢測(cè)Golgi M I的活性；2.在HepG2.2.15細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入終濃度為5ug/ml的基夫堿,持續(xù)處理5天后收集其培養(yǎng)上清液,提取得... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：96 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
研究背景
    參考文獻(xiàn)
第一部分 研究HBV感染與宿主細(xì)胞Golgi MI活性的關(guān)系
    摘要
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 DC-SIGN在識(shí)別HBV并活化DC中介導(dǎo)作用的研究
    摘要
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 HBV去甘露聚糖修飾逃逸DC-SIGN免疫識(shí)別的機(jī)制初探
    摘要
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
全文小結(jié)
綜述 DC對(duì)HBV免疫識(shí)別的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
附錄1 中英文縮略詞表
附錄2 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2900869