目的:肝臟缺血/再灌注損傷（LIRI）是肝臟移植以及肝臟外科手術(shù)中常見的并發(fā)癥,對(duì)肝臟外科手術(shù)的效果以及術(shù)后患者肝功能的恢復(fù)有著巨大的影響。多少年來,如何減少肝臟損傷,盡最大可能做到對(duì)肝臟的保護(hù)并且提高患者預(yù)后,一直是肝臟手術(shù)中研究的熱點(diǎn)以及難點(diǎn)。近年來,對(duì)于LIRI具體機(jī)制的相關(guān)研究不斷增多,然而尚未完全闡明。本研究通過探索小鼠LIRI中miR-101的表達(dá)情況以及細(xì)胞自噬活性的變化來探討miR-101介導(dǎo)自噬在小鼠LIRI中的作用,進(jìn)而揭示miR-101在LIRI中自噬調(diào)節(jié)的潛在功能和機(jī)制,以期為LIRI的臨床治療和研究提供一種新的思路。方法:建立小鼠肝臟節(jié)段性（70%肝葉夾閉）缺血以及再灌注損傷模型,血生化指標(biāo)檢測(cè)小鼠血清中轉(zhuǎn)氨酶（ALT、AST）含量的變化,HE染色觀察小鼠肝臟組織病理學(xué)損傷變化,TUNEL試劑盒檢測(cè)小鼠肝臟細(xì)胞凋亡情況,免疫組化觀察小鼠肝臟細(xì)胞增殖與凋亡情況,qRT-PCR檢測(cè)各組miR-101、AMPK mRNA、mTOR mRNA 的變化情況,Western Blot 檢測(cè)各組 AMPK、mTOR、p-mTOR、P62、Caspase-3 與 LC3 的表... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１各組小鼠血清ＡＳＴ／ＡＬＴ水平??

時(shí)間的加長逐漸加重，與Ｓｈａｍ組相比，在再灌注１２?ｈ時(shí)損傷最為嚴(yán)重（尸＜０．００１?），??再灌注２４?ｈ時(shí)損傷有所緩解。通過Ｓｕｚｕｋｉ病理學(xué)評(píng)分量化了缺血／再灌注誘導(dǎo)的??肝損傷情況，結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜〇．〇〇ｌ，見圖１．２）。證明小鼠肝臟發(fā)生??缺血／再灌注后損傷情況隨著再灌注時(shí)間的延長而不斷加重，在再灌注１２?ｈ時(shí)病??理損傷最為嚴(yán)重，再灌注２４?ｈ由于肝臟部分細(xì)胞增殖，損傷又有所減輕。??Ｓｈａｍ?ＩＲ＝２ｈ?ＩＲ＝６ｈ?ＩＲ＝１２ｈ?ＩＲ＝２４ｈ??〇?１０．１??ｌ??０＾?＞．?＊＊＊??＾３?６－?丁?＊＊＊??ｆＬｉｉｌｉ??Ｗ?Ｓｈａｍ?ＩＲ＝２ｈ?ＩＲ＝６ｈ?ＩＲ＝１２ｈ?ＩＲ＝２４ｈ??與?Ｓｈａｍ?組相比：０．０５，＊＊Ｐ＜?０．０１，＊＊＊Ｐ＜?０．００１??圖１．２各組小鼠肝臟病理學(xué)改變以及Ｓｕｚｕｋｉ病理學(xué)評(píng)分（ＨＥ，ｘ２００）??１．２．?３免疫組織化學(xué)檢測(cè)各組ＰＣＮＡ以及Ｃａｓｐａｓｅ－３表達(dá)結(jié)果??免疫組化檢測(cè)ＬＩＲＩ后肝細(xì)胞的增殖和凋亡情況發(fā)現(xiàn)，與Ｓｈａｍ組相比再灌??注各組增殖標(biāo)志物ＰＣＮＡ的核內(nèi)表達(dá)明顯下降，在再灌注１２?ｈ表達(dá)降低最明顯??（尸＜?０．００１），再灌注２４ｈ表達(dá)有所回升（Ｐ＜?０．０１）。與Ｓｈａｍ組相比，凋亡標(biāo)志??物Ｃａｓｐａｓｅ－３的胞質(zhì)表達(dá)在再灌注各組肝細(xì)胞中逐漸增加

核染為藍(lán)色，結(jié)果示，與Ｓｈａｍ組相比再灌注各組凋亡細(xì)胞數(shù)量隨著再灌注時(shí)間??的延長逐漸增加，其中再灌注１２ｈ時(shí)凋亡最為嚴(yán)重（尸＜０．００１），再灌注２４ｈ凋??亡有所減輕（尸＜０．０５，見圖１．４）。通過ＴＵＮＥＬ的檢測(cè)更進(jìn)一步證實(shí)了隨著再灌??注時(shí)間的延長凋亡逐漸增加。??１９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2899341