發(fā)布時(shí)間：2020-12-04 19:36

　　目的：建立非接觸式共培養(yǎng)誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞（human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSCs）分化為人肝樣細(xì)胞的培養(yǎng)體系,比較不同誘導(dǎo)體系與hAMSCs誘導(dǎo)前后基因及蛋白表達(dá)的差異。方法：采用機(jī)械分離和二酶消化法培養(yǎng)hAMSCs,流式細(xì)胞儀術(shù)和免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定hAMSCs,非接觸式共培養(yǎng)和細(xì)胞因子誘導(dǎo)hAMSCs向肝樣細(xì)胞分化,細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察,糖原、油紅染色及免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定肝樣細(xì)胞,ELISA法檢測白蛋白含量,基因芯片檢測各組細(xì)胞基因表達(dá)水平異同。結(jié)果：第3、4代hAMSCs表達(dá)CD44、CD2、CD73、CD166和CD49d,高純度表達(dá)波形蛋白,基本不表達(dá)CD34和CD45。第4代hAMSCs與正常肝細(xì)胞系HL-7702非接觸式共培養(yǎng),HGF和bFGF-2誘導(dǎo)培養(yǎng)hAMSCs,21d后,可見多角形細(xì)胞呈非典型的巢狀排列,糖原染色陽性,油紅染色可見較多脂滴存在,與未誘導(dǎo)hAMSCs比較,所誘導(dǎo)肝樣細(xì)胞表達(dá)HNF-3β明顯增高,而CK-18改變不明顯,共培養(yǎng)誘導(dǎo)組肝樣細(xì)胞表達(dá)甲胎蛋白增加。hAMSCs和誘導(dǎo)的肝樣細(xì)胞,胞漿均表達(dá)白蛋白... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略詞對照表
第一部分 共培養(yǎng)hAMSCs向肝樣細(xì)胞分化體系建立與基因表達(dá)譜分析
    中文摘要
    Abstract
    前言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 硫普羅寧聯(lián)合hAMSCs移植治療急性肝損傷實(shí)驗(yàn)研究
    中文摘要
    Abstract
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在讀研期間論文發(fā)表、參加學(xué)術(shù)活動(dòng)情況
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞在大鼠受損肝組織中分化為肝細(xì)胞[J]. 宮黎明,方寧,陳代雄,萬衛(wèi)紅,章濤,劉祖林,余麗梅,趙春華.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(36)
[2]成纖維生長因子-2與肝細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為肝細(xì)胞樣細(xì)胞的作用比較[J]. 王佐周,胡晶,牟玲,羅恩杰.  微生物學(xué)雜志. 2010(04)
[3]骨髓來源的原代樹突狀細(xì)胞對細(xì)菌顆�？乖徊娉蔬f的動(dòng)力學(xué)研究[J]. 鄒麗云,萬瑛,劉婷,李娜,張晉宇,李景怡,吳玉章.  免疫學(xué)雜志. 2008(06)
[4]經(jīng)門靜脈骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療小鼠急性肝損傷的療效[J]. 劉迎娣,楊云生,王韞芳,南雪,彭麗華,孫剛,李明陽,裴雪濤.  中華肝臟病雜志. 2008 (09)
[5]黃酮類化合物對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性肝損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J]. 郭菁菁,楊秀芬.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2008(01)
[6]人羊膜上皮細(xì)胞有向心肌樣細(xì)胞分化的特性[J]. 張路,方寧,陳代雄,劉祖林,萬衛(wèi)紅,劉金偉,章濤.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(03)
[7]細(xì)胞因子直接誘導(dǎo)正常人CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生IL-17和IFN-γ[J]. 范艷瑩,吳長有.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2007(10)
[8]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植治療終末期肝病初步臨床應(yīng)用[J]. 高志良,彭亮,崇雨田,彭曉謀,謝仕斌,林炳亮,謝冬英,陳幼明,李建國,顧琳,黃仰甦.  中華傳染病雜志. 2007(03)
[9]肝細(xì)胞核因子4α和3β在人主要器官中的表達(dá)[J]. 龍?jiān)?唐紅,劉聰,何芳,劉麗,趙連三,黃飛駿.  世界華人消化雜志. 2006(25)
[10]急性肝功能哀竭動(dòng)物模型的建立[J]. 李亞明,張晶,趙軍,陳煜,段鐘平.  肝臟. 2006(03)



本文編號：2898135