長期以來，關(guān)于原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）患者自身抗體譜與疾病進展程度的相關(guān)性了解不夠清楚。此外，患者血液中和肝內(nèi)浸潤的T細(xì)胞參與了PBC的病理損傷過程，失衡的T細(xì)胞導(dǎo)致自身反應(yīng)性T細(xì)胞大量增殖引起PBC患者的免疫紊亂，但是肝硬化不同階段PBC患者T細(xì)胞與臨床指標(biāo)的相關(guān)性研究目前不夠深入。熊去氧膽酸（UDCA）是目前唯一公認(rèn)的治療PBC的藥物。UDCA治療應(yīng)答的患者可有效延緩疾病進展，延長生存時間。然而，超過40％的患者對UDCA治療表現(xiàn)為不完全應(yīng)答，因此，對這些不完全應(yīng)答的患者在臨床上急需發(fā)展有效的治療方法。 研究目的 1.觀察自身抗體譜與PBC患者臨床表現(xiàn)及疾病進展的相關(guān)性。 2.分析PBC患者與健康人以及PBC患者不同分組間T細(xì)胞亞群變化，并進一步分析肝硬化不同階段PBC患者T細(xì)胞亞群與臨床指標(biāo)的相關(guān)性。 3.初步研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（UC-MSCs）治療PBC的臨床安全性及有效性。 研究內(nèi)容和方法 1.通過間接免疫熒光法檢測外周血自身抗體(ANA、AMA)，免疫印跡法檢測AMA-M2、anti-PML、anti-gp210、anti-Sp100、anti-BPO、anti-52KD，我們對123例PBC患者進行了自身抗體檢測，并查閱患者相關(guān)臨床資料、實驗室及B超、影像學(xué)檢查資料。 2.采用流式細(xì)胞染色技術(shù)，我們對49例肝硬化不同階段PBC患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群進行頻率檢測。 3.利用人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（UC-MSCs）外周靜脈回輸給7例對UDCA不完全應(yīng)答的PBC患者，觀察UC-MSCs治療PBC的安全性及初步有效性。 研究結(jié)果 1.通過比較肝硬化期與非肝硬化期患者血清中ANA、AMA、AMA-M2、anti-PML、anti-SP100、anti-52KD陽性檢測率，我們發(fā)現(xiàn)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。anti-gp210陽性率肝硬化組顯著高于非肝硬化組。anti-gp210陽性的PBC患者轉(zhuǎn)氨酶、膽紅素及堿性磷酸酶水平顯著高于anti-gp210陰性患者，而膽堿酯酶及白蛋白水平較之偏低。 2.與健康人相比，PBC患者外周CD4+T細(xì)胞頻率升高, CD8+T細(xì)胞頻率降低，CD4/CD8比例上升，且失代償期PBC患者比值明顯高于代償期；CD8+T細(xì)胞頻率與ALB、CHE、PA顯著正相關(guān)，而與PT和INR顯著負(fù)相關(guān)；CD4/CD8T細(xì)胞的比值與PT和INR顯著正相關(guān)，與ALB、PA和CHE顯著負(fù)相關(guān)。Th1細(xì)胞亞群頻率和CHE、自身抗體數(shù)目呈顯著正相關(guān)，而與TBA、PT、INR顯著負(fù)相關(guān)。Th17細(xì)胞亞群頻率和自身抗體數(shù)目呈顯著正相關(guān)，與ALB、ALB/GLO呈顯著負(fù)相關(guān)。 3.UC-MSCs回輸治療PBC后病人沒有發(fā)生近期及遠期不良反應(yīng)；UC-MSCs輸注可顯著降低血清ALP水平，且在48周的隨訪期間的MRS保持穩(wěn)定，同時可以改善PBC患者的生活質(zhì)量，減輕疲勞和皮膚瘙癢癥狀。UC-MSCs回輸后某些患者的肝功能和臨床癥狀均改善。 結(jié)論 1.本研究發(fā)現(xiàn)：與anti-gp210陰性的患者相比，anti-gp210陽性的患者有更嚴(yán)重的膽汁淤積和肝功能損害，anti-gp210對疾病的進展有一定的預(yù)測價值。 2.PBC患者外周CD8+T細(xì)胞的數(shù)量顯著減少，特別是失代償期階段患者，可能促進了疾病的進展。此外升高的外周CD4+T細(xì)胞很可能間接破壞了肝臟的合成功能。Th17細(xì)胞可能影響了PBC患者肝臟的蛋白合成功能。 3.對于UDCA治療不完全應(yīng)答的PBC患者，通過外周靜脈輸注UC-MSCs是安全和可行的。
【學(xué)位單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R575.22
【部分圖文】：

圖 1-2 gp210 陽性患者肝組織熒光切片圖圖示：gp210 陽性（肝片）：熒光鏡下肝細(xì)胞核呈均勻熒光，核周增強，呈特征性環(huán)狀。圖 1-3 免疫印跡法檢測條帶，免疫印跡法測 gp210+++討 論迄今，PBC的病因不明，目前認(rèn)為是與多種因素的相互作用有關(guān)，主要包

圖 1-3 免疫印跡法檢測條帶，免疫印跡法測 gp210+++討 論迄今，PBC的病因不明，目前認(rèn)為是與多種因素的相互作用有關(guān)，主要包括環(huán)境[29]、免疫、感染[30]及遺傳基因[31]等因素。發(fā)病機制認(rèn)為是感染、環(huán)境等因素作用于遺傳易感人群，使機體自身免疫耐受機制破壞，體內(nèi)自身反應(yīng)性T和B淋巴細(xì)胞活化或過度活化，免疫耐受打破或免疫調(diào)節(jié)異常導(dǎo)致。PBC的起病隱匿，自然病程進展個體差異性大，因此早期診斷、預(yù)測及治療顯得尤為重要。UDCA是目前FDA認(rèn)可的治療PBC有效的藥物。按13～15mg-1kg-1day-1的標(biāo)14

C 患者 Th1、Th17 細(xì)胞占 CD4+T 細(xì)胞的比例與健康對照比例 ， PBC 患者 CD4/CD8 T 細(xì)胞的比值高于代償期分析了代償期 PBC 患者和失代償期 PBC 患者 T 細(xì)胞亞圖 2-3、圖 2-4 所示：代償期 PBC 患者 CD3+T 細(xì)胞、CD胞占淋巴細(xì)胞百分比和失代償期 PBC 患者比較差異無統(tǒng)值得一提的是失代償期 PBC 患者 CD4/CD8 T 細(xì)胞的比高于代償期(2.50 士 1.43%)(P<0.05)。從分泌細(xì)胞因子的患者Th1類細(xì)胞和Th17類細(xì)胞占CD4+T 細(xì)胞比例與代償 0.05)。
【參考文獻】

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1 唐映梅;包維民;夏華向;尤麗英;朱森林;楊晉輝;;原發(fā)性膽汁性肝硬化患者肝臟和外周血淋巴細(xì)胞活化狀態(tài)與γ干擾素、白介素2表達的研究[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年07期

2 汪群英;徐蕓;李建生;王進;;原發(fā)性膽汁性肝硬化患者外周血T細(xì)胞表型及細(xì)胞因子的變化及意義[J];臨床薈萃;2008年07期

3 梁艷;楊再興;曾賢銘;曹魯寧;周曄;鄧安梅;仲人前;;原發(fā)性膽汁性肝硬化患者外周血APRIL基因表達水平初探[J];臨床檢驗雜志;2007年01期

4 何文革,孫永濤,鄒愛民;原發(fā)性膽汁性肝硬化外周血T細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子的檢測[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2004年05期

5 宮顏英;王斯文;房淑華;劉維新;;晚期原發(fā)性膽汁性肝硬化患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞表達分析[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年03期

6 劉燕敏,閆惠平,汪俊韜;肝功能異�；颊咧凶陨砜贵w及自身免疫性肝病的檢測[J];中華肝臟病雜志;2004年06期

7 周琳,范列英,王皓,楊丹榕,屠小卿,侯曉菁,譚龍益,孔憲濤,仲人前;人B細(xì)胞激活因子基因表達水平的熒光定量測定[J];中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2004年05期

8 胡安斌,何曉順,蔡繼業(yè),鄭啟昌;胚胎干細(xì)胞向膽管上皮細(xì)胞定向分化的體外實驗研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年36期

9 陳燕;周曄;鄧安梅;陳波;蔣天舒;仲人前;;中國東部漢族人群原發(fā)性膽汁性肝硬化與HLA-DRB1相關(guān)性分析[J];中國免疫學(xué)雜志;2006年12期

本文編號：2893716