本文基于液相色譜-三級四極桿串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-DAD-MS/MS)技術(shù),建立了同時定量糖耐量受損(IGT)患者血清中9種嘌呤嘧啶代謝物和肝硬化患者尿樣中17種嘌呤嘧啶代謝物的方法。在定量分析的基礎(chǔ)上對糖耐量受損患者橫斷面及給藥前后數(shù)據(jù)進行了統(tǒng)計分析,同時也對肝硬化患者嘌呤嘧啶代謝橫斷面數(shù)據(jù)進行了統(tǒng)計分析并找出了5種與肝硬化相關(guān)的差異性代謝物。從定量代謝組學(xué)的角度闡述了嘌呤嘧啶代謝紊亂與糖耐量受損和肝硬化的相關(guān)性,為疾病的早期診斷及相關(guān)機理研究開創(chuàng)了新途徑。 IGT是介于正常糖耐量與糖尿病之間的一種中間狀態(tài)。在本課題組前期對糖尿病及糖尿病腎病研究的基礎(chǔ)上,選取可能與糖尿病發(fā)生發(fā)展相關(guān)性較大的9種關(guān)鍵代謝物,首先應(yīng)用HPLC-DAD-MS/MS技術(shù)建立了同時定量糖耐量受損患者血清中9種嘌呤嘧啶代謝物的方法,然后通過對橫斷面數(shù)據(jù)的分析找出了尿酸、黃嘌呤、肌酐等3種與糖耐量受損相關(guān)的差異代謝物,最后應(yīng)用化學(xué)計量學(xué)主成分分析法(PCA)就IGT患者在天芪降糖膠囊給藥前后的差異進行了對比分析和療效評判。 肝硬化在我國是一種常見的惡性慢性疾病,是很多慢性肝病特別是病毒性肝炎發(fā)展到晚期的結(jié)果,同時也是主要死亡病因之一�；诟斡不颊吲c嘌呤嘧啶代謝紊亂的相關(guān)性,以HPLC-DAD-MS/MS聯(lián)用技術(shù)為主要分析手段,建立了同時定量肝硬化患者尿液中17種嘌呤嘧啶代謝物的方法。通過橫斷面、Child-Pugh肝功能分級、中醫(yī)辨證分型等3個層次的對比分析進一步揭示了肝硬化與嘌呤嘧啶代謝的相關(guān)性,找出了5種(尿酸、黃嘌呤、次黃嘌呤、黃苷和肌苷)差異性較明顯的代謝物并探討了其生物意義,為疾病的診斷、病情監(jiān)測及研究提供了參考。
【學(xué)位單位】：華東理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類】：R575.2
【部分圖文】：

其他化合物在正離子模式下的離子化效率優(yōu)于在負離子模式下的離子化效率，所以質(zhì)譜檢測選用正離子模式。在正離子模式下相關(guān)的儀器參數(shù)如電離電壓、離子源溫度、碰撞氣、霧化氣、氣簾氣及輔助干燥氣等亦均進行了優(yōu)化。圖2.2是幾種化合物的紫外全波長掃描圖，其中次黃嘿吟、尿普紫外掃描圖與黃嘿吟相似，在255一265nm處有最大吸收。在條件達到最優(yōu)后的色譜及質(zhì)譜圖見圖2.3。

圖2.4是一個正常樣本和一個IGT患者的紫外色譜圖和提取離子質(zhì)譜圖的對比分析圖，從圖中可以很明顯的看出黃嗓吟、尿酸等含量有不同程度的變化。尿酸在正常人中的峰寬和峰高均大于IGT患者，而正常人中黃嘿吟的峰高則明顯低于IGT患者，其他代謝物的峰高和峰寬從圖中很難看出有明顯變化。 51015為乃 30355呀 01520全 53035圖2.4正常對照組和IGT組樣本的紫外圖和提取離子圖(a)正常樣本紫外圖;(b)正常樣本提取離子流圖 ;(c)IGT樣本紫外圖;(d)IGT樣本提取離子流圖 Fig.2.4UVandmultiPleextractedionehromatogramsofcontrolsubjeetandIGTPatieni(a)UVehromatogr田舊ofaeontrolsubjeet:(b)multiPleextractedionehromatogr田爪sofaeontrolsubjeet: (c)UVchromatograJ舊 ofaIGTPatieni:(d)multiPleextraetedionehromatogr田舊 5ofaIGTPatient此外，以exeel為統(tǒng)計工具，統(tǒng)計結(jié)果以x士、表示，組間比較采用方差齊性檢驗及單因素方差分析，由方差齊性檢驗結(jié)果選擇方差齊或不齊。對正常對照組和IGT組所有化合物的含量進行統(tǒng)計分析，各個化合物的含量結(jié)果見表2.5。

圖2.5尿酸、黃嚓吟和肌配在各組之間的水平對比 Fig.2.5ComParisonofurieacid， xanthineandcreatinineamongthegrouPs圖2.5是三種差異代謝物在對照組和IGT組之間的含量變化柱狀圖。通過t檢驗發(fā)現(xiàn)，各個代謝物在正常對照組和IGT組之間均存在顯著性差異(尸<0.05)，其中尤以尿酸和黃嚓吟的變化較為顯著(P<0.01)。尿酸在機體內(nèi)能作為一種還原性物質(zhì)，在參與氧化還原反應(yīng)上具有抗氧化、抗DNA損傷等有益作用;然而，它同時也能促進血管平滑肌增生，導(dǎo)致內(nèi)皮功能紊亂等有害作用[70]。一般來講，正常人空腹血尿酸水平是受血肌配水平和空腹甘油三酷濃度決定的。研究表明，尿酸與低腎臟血流相關(guān)，能使血管收縮降低

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本文編號：2812091