【摘要】：目的:探討IL-6通過L型鈣離子通道對急性胰腺炎(Acute pancreatitis,AP)結(jié)腸動力的調(diào)控。方法:將20只180~220g健康雄性SD大鼠隨機分為兩組,分別制作對照組和AP組模型,AP組腹腔注射雨蛙肽50ug/kg,連續(xù)6次,每次間隔1h,在末次注射雨蛙肽后,加1次腹腔注射脂多糖10mg/kg,同時對照組大鼠腹腔內(nèi)注射等體積生理鹽水;分別記錄兩組大鼠造模前1天的排便粒數(shù),造模結(jié)束24h內(nèi)觀察并記錄兩組大鼠排便粒數(shù),觀察兩組大鼠排便粒數(shù)及結(jié)腸肌條的自發(fā)性收縮變化,分別取大鼠結(jié)腸制作縱行肌條,并使用張力換能器及生物機能實驗系統(tǒng)記錄兩組肌條的自發(fā)性收縮,觀察縱行肌條經(jīng)不同濃度外源性IL-6處理后對其自發(fā)性收縮強度與收縮周期的影響;對兩組胰腺進行肉眼觀,同時HE染色后,在顯微鏡下觀察,參照Schmidt等的評分標(biāo)準(zhǔn)進行胰腺組織病理評分,對二組的差異進行對比;通過酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)雙抗體夾心法檢測兩組大鼠血清IL-6的水平,比較兩組間的差異;取結(jié)腸標(biāo)本洗凈腸內(nèi)容物后行免疫組化法觀察IL-6在兩組大鼠結(jié)腸的分布;用急性酶解法消化分離結(jié)腸平滑肌細(xì)胞,運用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)檢測外源性IL-6作用前后平滑肌細(xì)胞L型鈣離子通道(I_(Ca,L))在設(shè)定的刺激模式下的峰電流和電流密度的變化。結(jié)果:AP組大鼠24h排便粒數(shù)明顯少于對照組(P0.0001);AP組肌條收縮幅度小于對照組(P0.05),收縮周期較對照組延長(P0.05);外源性IL-6作用下對照組肌條收縮周期由(115.6±7.547)s逐漸延長為(173.9±15.08)s(P0.01),但加入外源性IL-6后對肌條的自發(fā)性收縮幅度無影響;胰腺組織病理評分AP組與對照組相比有顯著差異(P0.0001);ELISA檢測出AP組血清IL-6濃度明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(n=10,P0.01);兩組大鼠結(jié)腸免疫組化顯示IL-6在對照組大鼠結(jié)腸中表達(dá)較彌散,而在AP組腸腺體、粘膜及粘膜下層中均可見明顯表達(dá);外源性IL-6作用結(jié)腸平滑肌細(xì)胞后,其I_(Ca,L)峰電流仍在0mV左右,但電流密度由(-3.344±0.432)pA/pF降低為(-2.317±0.390)pA/pF,以自身為對照比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。結(jié)論:(1)IL-6可能與AP結(jié)腸收縮周期延長有關(guān)。(2)IL-6可能通過抑制L型鈣通道活性來調(diào)節(jié)結(jié)腸動力。
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R576
【圖文】：

行兩獨立樣本 t 檢驗，顯著性差異為 P < 0.05。2 結(jié)果2.1 胰腺肉眼觀及病理學(xué)改變AP 組大鼠開腹后，可見淡黃色或淡紅色腹水, 量多, 胃腸擴張較對照組明顯;胰腺呈暗紅色, 表面及周圍腹膜、腸系膜見皂化斑;對照組腹腔無腹水形成, 腹內(nèi)器官未見異常改變。光鏡下 AP 組胰腺小葉間質(zhì)水腫嚴(yán)重，腺泡間隙增大，腺泡間隙可見多處點狀出血，較多腺泡壞死，存在脂肪浸潤，有大量炎癥細(xì)胞浸潤; 對照組胰腺正常(圖 1)。胰腺組織病理評分 AP 組與對照組相比有顯著差異[(8 ± 0.4216, n=10)vs(0.5 ± 0.2687, n=10)，P<0.0001]。

圖 2 AP 組造模前后及兩組大鼠排便粒數(shù)比較A． AP 組造模前后排便粒數(shù)比較（P <0.0001）；B. 兩組大鼠排便粒數(shù)比較（P <0.0001）Figure 2 Comparison of the number of defecations in the AP group before and after modeling：AComparison of the number of defecations before and after modeling in the AP group (P <0.0001); BComparison of the number of defecations in the two groups (P <0.0001)2.3 兩組大鼠結(jié)腸平滑肌條自發(fā)性收縮活性比較以臺氏液灌流肌條穩(wěn)定自發(fā)收縮時的幅度值作為基礎(chǔ)值,對照組與 AP組的肌條收縮幅度分別為(1.029 ± 0.07135)g、(0.7423 ± 0.07874)g，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(n=10，P=0.0147,圖 3B)；且收縮周期分別為(104.1 ± 6.14) s、(128.9 ± 8.053)s,差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(n=10，P=0.025,圖 3C)。（*表示 P

圖 3 兩組大鼠結(jié)腸平滑肌條自發(fā)性收縮活性比較A.兩組大鼠結(jié)腸平滑肌條的收縮情況；B．兩組大鼠結(jié)腸平滑肌條收縮強度的比較（P <0.05）；C.造模后，兩組大鼠結(jié)腸平滑肌條收縮周期的比較（P <0.05）Figure 3 Comparison of this kind of contractile activity in two groups of rats：The contraction of colonicsmooth muscle strips in the two groups of rats; B. The contraction strength of colonic smooth muscle stripsin the two groups was compared (P <0.05); C. The contraction cycle of colonic smooth muscle strips in thetwo groups (P <0.05)2.4 兩組大鼠血清 IL-6 濃度測定通過 ELISA 檢測兩組大鼠血清 IL-6 濃度，AP 組血清 IL-6 濃度明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(n=10，P <0.01) （*表示 P <0.05）。

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本文編號：2768521