【摘要】： 第一部分實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜TLR2、TLR4、TLR9的表達(dá) 目的:觀察TLR2、TLR4、TLR9在實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織中的表達(dá),探討TLR2、TLR4、TLR9在IBD發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法:三硝基苯磺酸(TNBS)+乙醇灌腸制備實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠模型,肉眼及光鏡下觀察黏膜損傷程度及組織學(xué)變化;免疫組化S-P法觀察TLR2、TLR4、TLR9的表達(dá),RT-PCR檢測(cè)其mRNA相對(duì)含量;紫外分光光度法、黃嘌呤氧化酶法分別檢測(cè)組織中MPO、SOD含量的變化。 結(jié)果:造模后結(jié)腸固有層及黏膜下層可見大量中性粒細(xì)胞、部分淋巴細(xì)胞和少許嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn),并可見隱窩膿腫、肉牙組織及黏膜肌層增厚;與正常組相比,模型組腸黏膜MPO含量顯著上升(P0.01),SOD含量明顯下降(P0.01);正常組TLR2、TLR4在黏膜下層及固有層炎性細(xì)胞胞膜和胞漿上有少量表達(dá),TLR9未見表達(dá),造模后腸組織TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)明顯增加(P均0.01),且見TLR2表達(dá)于腸上皮近腸腔側(cè)胞膜,TLR4表達(dá)于腸上皮近腸腔側(cè)胞膜及腺上皮近腺腔側(cè)胞膜;RT-PCR檢測(cè)三者mRNA相對(duì)含量增高,而正常對(duì)照組三者均未能檢出;TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)與MPO呈正相關(guān),與SOD呈負(fù)相關(guān)(P均0.05)。 結(jié)論:TNBS+乙醇模型實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)增強(qiáng),可能與腸道的自我免疫損傷有關(guān)。 第二部分不同微生態(tài)制劑應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)變化 目的:觀察美常安、麗珠腸樂應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠后TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)的變化,探討其作用機(jī)制,并與柳氮磺胺吡啶(SASP)比較。 方法:三硝基苯磺酸(TNBS)+乙醇灌腸制備實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠模型后,美常安、麗珠腸樂及SASP每日灌胃一次,10天后處死,肉眼及光鏡下觀察黏膜損傷程度及組織學(xué)變化;免疫組化S-P法觀察TLR2、TLR4、TLR9的表達(dá),RT-PCR檢測(cè)其mRNA相對(duì)含量;紫外分光光度法、黃嘌呤氧化酶法分別檢測(cè)組織中MPO、SOD含量的變化。 結(jié)果:美常安及SASP治療后肉眼及組織學(xué)變化好轉(zhuǎn),與模型組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.01),TLR2、TLR4、TLR9陽(yáng)性率下降,其mRNA含量降低,與模型組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05),腸黏膜MPO含量下降,SOD含量上升,與模型對(duì)照組相比差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.01)。美常安及SASP兩組之間上述指標(biāo)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。麗珠腸樂治療后上述改變與模型組相比均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)與MPO呈正相關(guān),與SOD呈負(fù)相關(guān),(MPO: r = 0.515, 0.386, 0.537; P均 0.01; SOD: r =-0.523, -0.474, -0.566; P均 0.01)。 結(jié)論:美常安及SASP應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型大鼠有效,可能于下調(diào)TLR2、TLR4、TLR9的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R574.6

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2622602