【摘要】：應激性潰瘍(SU)是嚴重身心應激的常見并發(fā)癥。病理研究顯示：SU常 表現(xiàn)為表淺但廣泛的糜爛。應激因素持續(xù)存在時，病情常呈進行性力重；如及 時解除應激因素，粘膜病變可逐漸恢復至正常狀態(tài)，而無疤痕形成等結構改變。 這對傳紡觀念認為的應激因素作用于胃粘膜造成細胞被動降解、壞死，進而形 成潰瘍的理論提出挑戰(zhàn)。研究發(fā)現(xiàn)，生理、病理狀態(tài)下，還存在一種與被動壞 死不同的、由基因調控、耗能的主動死亡過程，該過程中形成的凋亡小體，為 臨近細胞吞噬，不伴有炎癥反應。正常胃粘膜細胞存在凋亡，它與細胞增殖共 同調節(jié)著胃粘膜結構和功能的穩(wěn)態(tài)。進一步研究在朋Bcl-2/Bax，F(xiàn)as/Fas-L基因 的表達與凋亡的發(fā)生關系密切。應激狀態(tài)下，大鼠胃粘膜細胞的死亡形式及其 發(fā)生機制，目前仍不明確。在胃粘膜遭受到應激性損傷時，胃粘膜細胞相互之 間通過局部的信息傳遞所做出的快速、應激性反應，可能是維護細胞功能的重 要因素。NO是一種可在細胞間進行快速、廣泛信息交換的小分子化合物， 能通過不同途徑對細胞凋亡迸行精細調節(jié)。此外，細胞間信息傳遞還可通過細 胞膜上的特殊區(qū)城-細胞間隙連接來完成。結構連接蛋白43(CX43)是主要的 細胞間隙連接蛋白之—。應激性潰瘍發(fā)生發(fā)展過程中，這些與信息傳遞有關的 因子的表達變化以及與胃粘膜細胞改變的關系，尚未見報道。對其機制的研究， 就是對其防治提供更有力的理論依據(jù)，目制臨床常用防治消化系潰瘍的藥物對 應激牲潰瘍的防治療效以及胃粘膜細胞完整性的維護作用如何，不甚明確。 本課題分四部分，研究應激性潰瘍發(fā)生發(fā)展過程中大鼠胃粘膜的形態(tài) 學、生化改變及其調控機制。 一、應激性潰瘍模型的制備 本實驗參考Brodie的方法制備大鼠水浸-束縛應激(WRS)潰瘍模型； 觀察WRS 2h、3.5h、WRS結束后2h、5h、8h、12h、24h，樹間點胃粘膜損 傷情況，按Guth標準評估胃粘膜損傷潰瘍指數(shù)(UI);并于光鏡下觀察組織病 理學改變。結果：對照組大鼠胄粘膜未見損傷性政變，光鏡下可見表層上皮結 構完整；WRS2h大鼠胃粘膜充血，腺胃部有散在點狀出血點，鏡下可見粘膜層 充血、水腫，少量上皮細胞脫落WRS 3.5h～WRS結束后2h，大鼠胃粘膜面 附有大量血痂，腺胃部彌漫點線狀出血灶，UI達最高值(P0.01)，鏡下可見 粘膜表層上皮細胞受損、雌，中斷，腺體結構郊L，其間有大量紅 細胞聚桌堿賄的呈火山口狀，有的深達肌層；WRS結束后扣－l出腕、 出血…少，UI逐漸下陣…胃粘膜上皮結構逐浙腹，粘膜充血、 水腫咸鎮(zhèn)至WRS結肪24h，粘膜面僅殘留少量出血點，胃粘膜形態(tài)結構基 本阿羹u常M。結么bWRS可成功命限應激囹貴瘍模型。應激源作用仇 體時，胃粘膜病變是一個時間胸性進展、加重的脆但當應硼去橢受 損的胃＊占胭給鄉(xiāng)溝酗青咖葉自我陜復的脆 二、應淤 中胃粘膜細胞死亡形式和增殖功能的檢測 guw態(tài)學角度研究 SU Mud中胃3isnlgmBW．uxmp式 及書輪直功能的變化。繃原位才歷林林己（TUNEL）法描硯IJ WRS jkkstg不同時 間點細胞調亡的發(fā)生；于透射電銘oWM到淘胞形態(tài)的變0駕 伽…ABC 法原仁杉覦不同時間點PCNA蛋白的表忒結裊1、棉大鼠胃粘膜上皮散在 TUNEb細哦LWRSZhTUNEDjatHEax，rsRgR明顯增引Pd．of）；WRS3．sh－ 刪結輻o陽性細胞數(shù)量達躲刪3．o－刪后D，，代表細腔杯死的 淺染 多。WRS后shng時間漲IUNEbfatB8arffiti＆． 少，仁逐W24 仍高于正常水平（Pd．05）；2、淑…姑g粘膜細胞形茲狽IJ，核 形贓。而發(fā)生凋亡的蛐，有賬染色體發(fā)生蹦，在核膜周邊聚集彤挪月 椰；有的染色體發(fā)生固縮，娜柵，核膜表面凹凸不平；有的核發(fā)生破裂， 在細胞漿內礬空艄多；有的g叫奪形湘亡，1體。3、正常胃腆蟈PCNA 主要在胃腺頸部靠近腎］、…中等陽性表屯W衛(wèi)Z出、3．扣至WRS結束后出 PCNA…少（P＜0．olX WRS結束后sh表達逐漸恢瓦 WRS8folZh表達達昨明顯高于和照組O卅．of X至W24表達基本恢復 至正常水平0川．05）。結蝕1、應觸胃粘膜細賅調亡明顯增加，增殖能力下 降，它們之間的失街是潰痞發(fā)生的重要原因；2、隨著應激程度的撒民凋濰 晚期階段呈現(xiàn)壞死賤些特征3、在應激住損傷恢復的早期階段，大量細胞凋 亡跳哈可sbo動細腳駒眺必翻附；4、凋亡細胞形劫崎9＋4隊 三、應逝性潰瘍發(fā)虹M出準＋細胞凋亡發(fā)紡喇獺附 （一）凋飾慫困FbdFb＋L、kH阻吠私盼娜 本實驗主要探討應激性潰瘍發(fā)生發(fā)展過程中，凋材目舷困BcM、 F一硼…娜一的關系。用原賤妹淑U WRS結束 M根胃3A5nssRFaS、Ft、BcLInRNA的表達，免痰綢附幼知IJBctw 蛋白的表忒瞅l、正常對照組FaS、F旺幾1llttro．ra無明顯表達，F(xiàn)t InRNA 3 在WRS3．sh至WRS結垢sh Al6gKAsedMtl出頤陽性－中等陽性表達，但 組間表達無明趾異，WRS后l1K失。E婦InRNA在WRS結束后 sh－sh fohMk＆ffe＆efl出賊陽性表達，WRS蹌…肖丸2、破胃 粘膜組織BclAIAde白主要在胃腳呈中等陽性表達，Bax蛋白主?
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2001
【分類號】：R573.1

【參考文獻】

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本文編號：2611070