【摘要】：目的:探討谷氨酰胺(Gln)對DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎的治療作用及機(jī)制。方法:8周齡BALB/c小鼠隨機(jī)分為3組:Control組:對照;Gln組:DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎(4%DSS,7 d)+Gln治療(1.5 g/kg,4周);DSS組:DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎。4周后處死小鼠評估結(jié)腸炎癥、疾病活動度、上皮細(xì)胞凋亡、腸黏膜炎癥因子及NF-κb(p65)信號通路。結(jié)果:Gln顯著降低了DSS模型小鼠的結(jié)腸炎癥、疾病活動度及上皮細(xì)胞凋亡。Gln抑制了腸黏膜NF-κb(p65)信號通路。結(jié)論:Gln治療可減輕腸道炎癥,降低腸上皮細(xì)胞凋亡,這可能是通過抑制腸黏膜NF-κB(p65)信號通路。
【圖文】：

縭?方法參照文獻(xiàn)［6］，依據(jù)說明書提取細(xì)胞核和細(xì)胞漿蛋白，采用Bradford法定量蛋白，按1∶4比例加入5×loading沸水中煮10min，變性，按每孔加入35微克蛋白，電泳、轉(zhuǎn)膜后封閉1h，加入p65、IKK、I-κB、H3或β-actin(1∶1000，Abcam公司)一抗稀釋液，4℃搖床12h，加入二抗后，洗膜，滴加ECL顯影液，采用ImageJ軟件進(jìn)行灰度值分析。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以x±s表示，比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05定義為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1Gln對DSS小鼠結(jié)腸炎癥程度及疾病活動度的影響如圖1A所示，經(jīng)7dDSS誘導(dǎo)成功建立了結(jié)腸炎模型，Control組無明顯炎癥，Gln組經(jīng)4周Gln治療結(jié)腸炎癥顯著減輕。結(jié)腸炎癥評分顯示(圖1B):Gln組小鼠結(jié)腸炎癥評分高于Control組，但顯著低于DSS組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。小鼠疾病活動度評估顯示(圖1C):Gln組小鼠DAI評分高于Control組，但顯著低于DSS組，圖1結(jié)腸炎癥及疾病活動度Fig．1ColoninflammationanddiseaseactivityNote:Magnification:200times;thedataareexpressedasthex±s，*.P＜0.05.差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。2.2Gln對小鼠腸上皮細(xì)胞凋亡的影響如圖2所示，DSS模型小鼠腸上皮細(xì)胞凋亡數(shù)目顯著高于Control組(P＜0.05);Gln組小鼠腸上皮細(xì)胞凋亡數(shù)目高于對照組(P＜0.05)，卻低于DSS組(P＜0.05)。2.3Gln對腸黏膜炎癥因子的影響如圖3所示Gln治療后，小鼠腸黏膜TNF-α低于DSS組(P＜0.05)，與Control組相比無明顯差異(P＞0.05);三組小鼠腸黏膜IL-10含量無明顯差異(P＞0.05);Gln組小鼠腸黏膜IL-1β及IL-6高于Control組，卻低于DSS組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。2.4Gln對小鼠腸黏膜NF-κB(p65)的影響如圖4所示DSS組小鼠腸黏膜p65及p

經(jīng)7dDSS誘導(dǎo)成功建立了結(jié)腸炎模型，Control組無明顯炎癥，Gln組經(jīng)4周Gln治療結(jié)腸炎癥顯著減輕。結(jié)腸炎癥評分顯示(圖1B):Gln組小鼠結(jié)腸炎癥評分高于Control組，但顯著低于DSS組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。小鼠疾病活動度評估顯示(圖1C):Gln組小鼠DAI評分高于Control組，但顯著低于DSS組，圖1結(jié)腸炎癥及疾病活動度Fig．1ColoninflammationanddiseaseactivityNote:Magnification:200times;thedataareexpressedasthex±s，*.P＜0.05.差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。2.2Gln對小鼠腸上皮細(xì)胞凋亡的影響如圖2所示，DSS模型小鼠腸上皮細(xì)胞凋亡數(shù)目顯著高于Control組(P＜0.05);Gln組小鼠腸上皮細(xì)胞凋亡數(shù)目高于對照組(P＜0.05)，卻低于DSS組(P＜0.05)。2.3Gln對腸黏膜炎癥因子的影響如圖3所示Gln治療后，，小鼠腸黏膜TNF-α低于DSS組(P＜0.05)，與Control組相比無明顯差異(P＞0.05);三組小鼠腸黏膜IL-10含量無明顯差異(P＞0.05);Gln組小鼠腸黏膜IL-1β及IL-6高于Control組，卻低于DSS組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。2.4Gln對小鼠腸黏膜NF-κB(p65)的影響如圖4所示DSS組小鼠腸黏膜p65及p-p65表達(dá)均顯著圖2腸上皮細(xì)胞凋亡Fig．2IntestinalepithelialcellapoptosisNote:Magnification.200times;Thedataareexpressedasthex±s，*.P＜0.05.圖3Gln對腸黏膜炎癥因子的影響Fig．3ImpactofGlnonintestinalmucosainflammat-ionfactorsNote:Thedataareexpressedasthex±s.*.P＜0.05.·964·中國免疫學(xué)雜志2015年第31卷
【作者單位】： 湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院急診外科;湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院普外科;湖北恩施州中心醫(yī)院婦產(chǎn)科;武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【分類號】：R574.62

【共引文獻(xiàn)】

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3 李W毲

本文編號：2553078