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c-met慢病毒載體的構建及穩(wěn)定轉染骨髓間充質(zhì)干細胞

發(fā)布時間:2019-04-17 06:02
【摘要】:構建肝細胞生長因子受體(c-met)慢病毒載體,并穩(wěn)定轉染骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)。將c-met連接到慢病毒載體GV358上,重組獲得慢病毒載體GV358-c-met。再將該重組體與病毒輔助質(zhì)粒共轉染293T細胞,包裝生產(chǎn)慢病毒并測定其滴度為2×10~8TU/ml。將此慢病毒轉染BMSCs,經(jīng)嘌呤霉素篩藥后,熒光顯微鏡下檢測熒光陽性率達100%,且Western blot證實該細胞株表達c-met蛋白。成功構建了c-met慢病毒載體,并建立了穩(wěn)定表達c-met的BMSCs。
[Abstract]:Construction of hepatocyte growth factor receptor (c-met) lentivirus vector and stable transfection of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). The c-met was ligated into the lentivirus vector GV358, and the lentivirus vector GV358-c-met. was obtained by recombination. The recombinant plasmid was co-transfected into 293T cells to produce lentivirus and its titer was determined to be 2 脳 10 脳 10 ~ 8 TU / ml. After the lentivirus was transfected into BMSCs, by puromycin screening, the fluorescence positive rate was 100% under fluorescence microscope, and the expression of c-met protein was confirmed by Western blot. C-met lentiviral vector was successfully constructed and BMSCs. expressing c-met stably was established.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院感染科;南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院兒科;南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院感染科;
【基金】:國家自然科學基金(編號:81271713) 吉利德肝病科學研究項目-亞洲
【分類號】:Q78;R575.3

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