【摘要】：目的探討NADPH氧化酶家族(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidases,NOXs)的主要成員NOX1、NOX2和雙氧化物酶(dual oxidase,DUOX)2(人:NOX1、NOX2和DUOX2;小鼠:Nox1、Nox2和Duox2)在人炎癥性腸病和小鼠腸炎模型結(jié)腸中的表達(dá)。方法人結(jié)腸標(biāo)本選自于通過結(jié)腸鏡活檢或手術(shù)切除的炎癥性腸病組織及距離病變組織邊緣5 cm以上正常組織;同時(shí)選用8~10周齡的C57BL/6雌性小鼠建立結(jié)腸炎模型,采用擲硬幣法將其隨機(jī)分為對(duì)照組和慢性腸炎組,慢性腸炎組先自由飲用1.0%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))葡聚糖硫酸鈉7 d,然后自由飲水14 d,循環(huán)3次;通過體質(zhì)量變化和HE染色方法評(píng)估腸道炎性反應(yīng)程度。采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)和免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)結(jié)腸組織中NOX1、NOX2及DUOX2 mRNA和蛋白表達(dá)情況,并分析在人炎癥性腸病中三者表達(dá)情況與臨床特征之間的關(guān)系。結(jié)果 NOX1、NOX2和DUOX2 mRNA在人炎癥性腸病結(jié)腸組織中的表達(dá)量均顯著高于自身正常對(duì)照組織,分別增高2.8、2.0和3.3倍(P均0.01);與人不同,Nox1和Duox2 mRNA在小鼠慢性腸炎結(jié)腸組織中的表達(dá)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Nox2 mRNA增加2.4倍(P0.01)。Nox1蛋白在正常結(jié)腸上皮細(xì)胞刷狀緣和胞質(zhì)中表達(dá);Nox2蛋白主要表達(dá)于浸潤的吞噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞;Duox2蛋白在正常結(jié)腸黏膜組織中低表達(dá);三者在人炎癥性腸病結(jié)腸組織中表達(dá)均上調(diào)(均P0.01);在小鼠慢性腸炎模型中,Nox2和Duox2蛋白上調(diào)(均P0.01),而Nox1無變化。除了NOX2 mRNA在男性病人表達(dá)高于女性病人外,未發(fā)現(xiàn)這些氧化酶與病人臨床特征之間有關(guān)聯(lián)。結(jié)論NOX1、NOX2和DUOX2不但在維持機(jī)體正常生理功能過程中發(fā)揮重要作用,而且在炎癥性腸病初期階段的發(fā)病中也起一定的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the main members of NADPH oxidase family (nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidases,NOXs (NOX1,NOX2 and dual oxidase,DUOX) 2 (human: NOX1,NOX2 and DUOX2;) Mouse: Nox1,Nox2 and Duox2) expression in colon of human inflammatory bowel disease and mouse enteritis model. Methods Human colon specimens were collected from inflammatory bowel disease tissues and normal tissues which were more than 5 cm from the margin of the lesion by colonoscopic biopsy or surgical resection. At the same time, female C57BL/6 mice aged 8 ~ 10 weeks were used to establish colitis model. The mice were randomly divided into control group and chronic enteritis group by coin toss method. The chronic enteritis group drank 1.0% sodium dextran sulfate for 7 days. Then drinking water freely for 14 days and then circulating for 3 times; The degree of intestinal inflammatory response was evaluated by body mass change and HE staining. The expression of NOX1,NOX2, DUOX2 mRNA and protein in colon tissue was detected by real-time quantitative PCR and immunohistochemistry, and the relationship between the expression of NOX1,NOX2, DUOX2 mRNA and protein in human inflammatory bowel disease was analyzed. Results the expression of NOX1,NOX2 and DUOX2 mRNA in human inflammatory bowel disease colon was significantly higher than that in normal control group (2.8U 2.0 and 3.3fold, respectively) (P 0.01). There was no significant difference in the expression of Nox1 and Duox2 mRNA in colonic tissues of mice with chronic enteritis, and Nox2 mRNA increased 2.4-fold (P0.01). Nox1 protein was expressed in brushes and cytoplasm of normal colonic epithelial cells. Nox2 protein was mainly expressed in infiltrating phagocytes and neutrophils, Duox2 protein was low expressed in normal colonic mucosa, all three proteins were up-regulated in human inflammatory bowel disease colon tissue (P0.01). In mouse chronic enteritis model, Nox2 and Duox2 proteins were up-regulated (P0.01), but Nox1 did not change. There was no correlation between the expression of NOX2 mRNA and clinical features except in males and females. Conclusion NOX1,NOX2 and DUOX2 not only play an important role in maintaining the normal physiological function of the body, but also play a certain role in the early stage of inflammatory bowel disease.
【作者單位】： 河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京康復(fù)醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81370487)~~
【分類號(hào)】：R574.62

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本文編號(hào)：2360278