【摘要】：目的:在前期研究糞便微生物移植(FMT)治療小鼠潰瘍性結(jié)腸炎(UC)的基礎(chǔ)上,制備海藻酸鈉微球,探討糞便微生物微球移植對UC的治療作用。同時(shí)研究海藻酸鈉微球包裹小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16抗原對小鼠免疫系統(tǒng)的激活作用,期望為臨床免疫治療黑色素瘤提供新的思路。方法:1將BALB/c小鼠分組,采用葡聚糖硫酸鈉(DSS)進(jìn)行UC造模,采用銳孔凝固浴法制得含菌微球,對UC小鼠進(jìn)行灌胃治療,另外一組UC模型進(jìn)行FMT治療。觀察小鼠體重和DAI指數(shù)變化;取不同分組的小鼠結(jié)腸進(jìn)行組織學(xué)觀察,并對其進(jìn)行16S RNA基因測序分析研究其菌群變化。2建立C57BL/6J小鼠的黑色素瘤模型。研究B16細(xì)胞抗原激活DC對黑色素瘤的抑制作用,觀察比較小鼠體內(nèi)腫瘤的生長情況;采用組織病理學(xué)方法,觀察小鼠脾臟結(jié)構(gòu)的變化。采用微乳法制備包有B16細(xì)胞抗原的海藻酸鈉微球,給C57BL/6J小鼠免疫之后通過ELISA實(shí)驗(yàn)測定血清中IFN-γ、IL-12等細(xì)胞因子水平的變化。結(jié)果:1、采用銳孔凝固浴法制備的海藻酸鈉微球大小在500μm左右,符合小鼠灌胃要求;耐酸性和腸溶性實(shí)驗(yàn)表明海藻酸鈉微球可以抵抗胃酸的強(qiáng)酸環(huán)境,在腸液和結(jié)腸液中逐漸崩解,釋放糞便微生物;經(jīng)DSS造模后,小鼠的體重出現(xiàn)明顯下降、DAI指數(shù)逐漸升高。造模7天后,進(jìn)行不同的處理,其中糞菌移植組和糞菌微球組,連續(xù)治療7天,小鼠體重自治療第二天開始上升,DAI指數(shù)治療一天后開始下降,直至降到0左右;沒有給予治療組和用空微球灌胃治療組,體重均呈逐漸下降趨勢,DAI指數(shù)逐步上升,第11天(停止DSS后的第三天)死亡或因?yàn)閲?yán)重腹瀉而被處死。另外,組織病理學(xué)研究結(jié)果表明UC模型小鼠結(jié)腸組織黏膜表面有潰爛,有多處凸起,隱窩數(shù)量減少;經(jīng)過糞便菌群移植或者采用糞菌微球連續(xù)治療7天后,小鼠的結(jié)腸組織粘膜層與正常小鼠的組織結(jié)構(gòu)相似,黏膜層恢復(fù)光滑。將小鼠結(jié)腸進(jìn)行16S rRNA基因測序分析發(fā)現(xiàn),DSS處理組與健康組相比,其結(jié)腸內(nèi)螺桿菌、大腸桿菌和擬桿菌的數(shù)量顯著增多,乳桿菌數(shù)量明顯下降;經(jīng)含糞菌微球治療后螺桿菌、大腸桿菌和擬桿菌的數(shù)量顯著下降,乳桿菌數(shù)量顯著回升。2、小鼠黑色素瘤模型結(jié)果:接種B16細(xì)胞抗原激活的DC小鼠未見腫瘤生長;接種B16細(xì)胞1周后再接種B16細(xì)胞激活的DC細(xì)胞的小鼠,與只接種B16細(xì)胞的小鼠比較,腫瘤體積有顯著性減小。荷瘤小鼠的脾臟結(jié)構(gòu)有顯著變化:C57BL/6J小鼠接種B16細(xì)胞14天后,脾臟的濾泡結(jié)構(gòu)增加;而接種B16細(xì)胞激活的DC細(xì)胞后,小鼠脾臟的濾泡結(jié)構(gòu)顯著減少。小鼠接種包含B16細(xì)胞抗原后進(jìn)行血清細(xì)胞因子的測定,與對照小鼠比較,發(fā)現(xiàn)IFN-γ和IL-12的水平顯著增加。結(jié)論:采用糞便微生物微球化移植治療UC有效果,可考慮作為FMT的替代治療方法;給荷瘤小鼠接種被黑色素瘤抗原激活后的DC細(xì)胞,可以抑制腫瘤生長;將黑色素瘤B16細(xì)胞抗原微球化后對小鼠進(jìn)行免疫能夠增加IFN-γ和IL-12細(xì)胞因子水平,具有潛在的抗腫瘤效果。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R574.62;R739.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 司春楓;魯美鈺;周玲;徐茂磊;楊小平;;腫瘤疫苗免疫策略研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2016年15期

2 張莉華;李科;卜方方;;海藻酸鈉在藥物制劑中的應(yīng)用進(jìn)展[J];中南藥學(xué);2016年01期

3 孟冉冉;張躍偉;趙廣生;張寧;;樹突狀細(xì)胞腫瘤疫苗抗腫瘤研究進(jìn)展[J];中華腫瘤防治雜志;2012年20期

4 楊汝德,張麗君,陳惠音,郭勇;雙歧聯(lián)菌株微膠囊的制備條件(英文)[J];華南理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2001年10期

，

本文編號：2283082