【摘要】：目的：腹膜淋巴孔是由腹膜間皮細(xì)胞伸出的胞質(zhì)突起與相鄰細(xì)胞的胞質(zhì)突起相互連接而成，為毛細(xì)淋巴管在腹膜間皮面上的開口。作為人體的一種恒定結(jié)構(gòu)，腹膜淋巴孔的形態(tài)結(jié)構(gòu)被許多研究人員關(guān)注，眾多的實驗已被證實腹膜淋巴孔與腹水轉(zhuǎn)歸、腹腔內(nèi)腫瘤轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)，但腹膜淋巴孔與腹腔內(nèi)感染性物質(zhì)內(nèi)毒素的轉(zhuǎn)運的關(guān)系資料甚少。本實驗采用電鏡技術(shù)，對腹膜淋巴孔途徑進行超微形態(tài)學(xué)觀察，通過腹腔內(nèi)注射示蹤標(biāo)記的外源性內(nèi)毒素，連續(xù)動態(tài)觀察其在腹膜淋巴孔途徑中的轉(zhuǎn)運及特點，并與門靜脈途徑作差異性比較，為進一步開展腹膜淋巴孔的功能研究提供證據(jù)。 方法：1.結(jié)合文獻資料，獲取大鼠腹膜組織，透射電鏡(ScanningElectron Microscope,SEM)觀察腹膜淋巴孔的超微結(jié)構(gòu),掃描電鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)觀察腹膜淋巴孔分布、大小及形態(tài)。使用Elescope計算機圖像處理軟件分析掃描電鏡下腹膜淋巴孔圖像，應(yīng)用SPSS19.0軟件對圖像數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，得到大鼠腹膜淋巴孔的平均直徑(μm)及分布密度（/0.01mm2）等指標(biāo)。2.在大鼠腹腔內(nèi)注射FITC標(biāo)記的內(nèi)毒素，分別于注射后的5min、30min、1h、2h、3h取大鼠腹膜、乳糜池、門靜脈組織及門靜脈血、乳糜池液，各組織行冰凍切片，熒光顯微鏡觀察FITC標(biāo)記的內(nèi)毒素在腹膜、乳糜池、門靜脈的轉(zhuǎn)運情況，使用IMAGE-PRO PLUS6.0圖像處理軟件分析腹膜上、乳糜池壁、門靜脈壁的FITC的熒光強度，使用熒光分光光度計分析門靜脈血及乳糜池液的FITC的熒光強度，應(yīng)用SPSS19.0軟件對得到數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，并做差異性比較。3.在大鼠腹腔內(nèi)注射納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素，分別于注射后的5min、30min、1h、2h、3h取大鼠的腹膜、乳糜池、門靜脈組織，應(yīng)用掃描電鏡及透射電鏡同時觀察納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素在腹膜淋巴孔途徑動態(tài)轉(zhuǎn)運情況，使用Elescope計算機圖像處理軟件分析掃描電鏡下腹膜淋巴孔、乳糜池、門靜脈上的納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素的分布密度（/0.01mm2），使用SPSS19.0軟件對得到的分布密度進行統(tǒng)計分析，并對納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素在腹膜淋巴孔途徑及門脈途徑的轉(zhuǎn)運做差異性比較。 結(jié)果：1.在掃描電鏡下，可以觀察到腹膜淋巴孔是位于腹膜立方間皮細(xì)胞之間的空洞，是由立方間皮細(xì)胞伸出的指狀突起與相鄰的細(xì)胞之間的指狀胞質(zhì)突起相連而成的，呈圓形、橢圓形，平均直徑約為8.23+2.34μm，，分布密度為1.2+0.7（/0.01mm2），其底部有間皮下結(jié)締組織纖維。在透射電鏡下，腹膜淋巴孔是由腹膜立方間皮細(xì)胞及其胞質(zhì)突起圍繞而成的，立方間皮細(xì)胞胞體清晰，細(xì)胞核較大，核仁明顯，立方間皮細(xì)胞邊緣發(fā)出胞質(zhì)突起，腹膜淋巴孔是毛細(xì)淋巴管在腹膜上的出口，并且向下通過腹膜下小管和淋巴引流單位（LDU）、淋巴陷窩與毛細(xì)淋巴管相連。2.熒光顯微鏡下，注射后的5min時，腹膜上即可出現(xiàn)FITC標(biāo)記的內(nèi)毒素，30min時腹膜上內(nèi)毒素的吸附量逐漸上升并達(dá)到峰值，1h時開始出現(xiàn)下降趨勢（與30min相比，P0.05），2h后明顯下降（與30min相比，P0.05）。每個時相點，乳糜池的變化如下：注射后的5min，乳糜池中出現(xiàn)了少量FITC標(biāo)記的內(nèi)毒素，30min逐漸上升，1h到達(dá)峰值，2h出現(xiàn)下降趨勢（與1h相比，P0.05），3h下降明顯（與1h相比，P0.05）。門靜脈的情況則是：注射后的5min，門靜脈中很難觀察到FITC標(biāo)記的內(nèi)毒素，隨著時間的推進，2h時門靜脈中內(nèi)毒素到達(dá)峰值，3h出現(xiàn)下降（與2h比較，P0.05）。在實驗的5min、30min、1h、2h、3h各個時相點，門靜脈的內(nèi)毒素的表達(dá)均低于乳糜池（P0.05）。熒光分光光度計分析門靜脈血及乳糜池液FITC的熒光強度的變化和門靜脈壁上及乳糜池壁上FITC的變化有相同的趨勢。3.在掃描電鏡下，注射后的5min時納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素開始在腹膜淋巴孔附近黏附，聚集，30min時腹膜淋巴孔的內(nèi)毒素的量逐漸上升并達(dá)到峰值，1h時出現(xiàn)下降趨勢（與30min比較，P0.05），2h下降明顯（與30min比較，P0.05）。乳糜池的情況為：注射后的5min時，乳糜池中出現(xiàn)了少量納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素，30min逐漸上升，1h時乳糜池中內(nèi)毒素到達(dá)峰值，2h時出現(xiàn)下降趨勢（與1h比較，P0.05），3h下降明顯（與1h比較，P0.05）。門靜脈則是：注射后的5min時，門靜脈中很難觀察到納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素，隨著時間的推進，2h時門靜脈中內(nèi)毒素到達(dá)峰值，3h出現(xiàn)下降（與2h比較，P0.05）。在實驗的5min、30min、1h、2h、3h各個時相點，門靜脈的內(nèi)毒素均低于腹膜淋巴孔及乳糜池（P0.05）。在透射電鏡下，我們發(fā)現(xiàn)了納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素出現(xiàn)在腹膜淋巴孔中，同時在其下的腹膜下小管，淋巴引流單位和毛細(xì)淋巴管中均發(fā)現(xiàn)了納米金標(biāo)記的內(nèi)毒素。 結(jié)論：通過本課題的研究，初步得到以下結(jié)論：1.以腹膜淋巴孔為結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)的腹膜淋巴回流途徑存在于大鼠體內(nèi)。2.腹膜淋巴孔回流途徑對腹腔游離內(nèi)毒素具有轉(zhuǎn)運作用的。3.腹膜淋巴回流途徑對腹腔游離內(nèi)毒素的轉(zhuǎn)運是通過腹膜淋巴孔，經(jīng)腹膜下小管，淋巴引流單位進入毛細(xì)淋巴管，再進入乳糜池而實現(xiàn)的。4.就腹腔游離內(nèi)毒素的轉(zhuǎn)運而言，腹膜淋巴孔途徑不但在時間上早于門脈途徑，同時在轉(zhuǎn)運強度上亦高于門脈途徑，提示腹膜淋巴孔途徑在其中起著重要作用。
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【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R57

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 李繼承,沈毅,Bruno TOTA,Giovanni ZUMMO;AngⅡ誘導(dǎo)的VEGF對食用蛙心包淋巴孔和間皮血竇的影響[J];動物學(xué)報;2002年03期

2 SotiriosZarogiannis;ChrissiHatzoglou;KonstantinosGourgoulianis;PaschalisAdamMolyvdas;;Role of human visceral pleura in pleural fluid turnover:Need for morphological evidence of lymphatic stomata[J];Chinese Medical Journal;2006年17期

3 李繼承，沈毅，高永晟，雍泰巍;膈腹膜吸收間皮掃描電鏡圖像處理系統(tǒng)定量研究[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報;1995年04期

4 李繼承,周吉林;REGULATING EFFECTS OF VASCULAR ENDOTHELIAL GROWTH FACTOR AND ANG Ⅱ ON FROG'S PERICARDIAL STOMATA, MESOTHELIUM AND ANGIOGENESIS[J];Chinese Medical Sciences Journal;2001年01期

本文編號：2266745