IRE1α和IRE1β在DSS誘導(dǎo)的小鼠慢性結(jié)腸炎中的表達(dá)及意義
本文選題:炎癥性腸病 + 慢性結(jié)腸炎。 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年04期
【摘要】:目的探討肌醇需求酶1(IRE1)α和IRE1β在葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的小鼠慢性結(jié)腸炎中的表達(dá)及意義。方法選擇8~10周齡的C57BL/6雌性小鼠隨機(jī)分為兩組:對(duì)照組10只,正常飲水;慢性炎癥組10只,先給予1.0%DSS自由飲用7 d,然后正常飲水14 d如此作為一個(gè)周期,循環(huán)3個(gè)周期建立小鼠慢性結(jié)腸炎模型。通過疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分、結(jié)腸長(zhǎng)度測(cè)定和HE染色等方法評(píng)估腸道炎癥程度。采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)小鼠結(jié)腸組織中炎癥因子、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激因子IRE1α、IRE1β、非剪接型X-盒結(jié)合蛋白1(XBP1u)、剪接型X-盒結(jié)合蛋白1(XBP1s)和黏蛋白(MUC)2 mRNA表達(dá),免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)IRE1α、IRE1β和MUC2表達(dá)。結(jié)果對(duì)照組小鼠無腸炎表現(xiàn),而慢性炎癥組在3個(gè)周期末結(jié)腸出現(xiàn)炎癥表現(xiàn)。實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示白介素(IL)-6、IL-8和腫瘤壞死因子(TNF)-αmRNA在慢性炎癥組高于對(duì)照組(P0.05);XBP1s和IRE1αmRNA在兩組表達(dá)無明顯差異;XBP1u mRNA在慢性炎癥組表達(dá)低于對(duì)照組(P0.05)。IRE1β和MUC2 mRNA在慢性炎癥組表達(dá)均低于對(duì)照組(P0.05)。IRE1α蛋白主要表達(dá)于結(jié)腸上皮的刷狀緣、漿細(xì)胞等細(xì)胞的胞質(zhì)中,其表達(dá)量在炎癥組高于對(duì)照組,IRE1β蛋白和MUC2蛋白主要表達(dá)于結(jié)腸上皮細(xì)胞胞質(zhì)中,兩者表達(dá)量在炎癥組低于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論 IRE1α可能通過對(duì)XBP1進(jìn)行剪接來參與腸道炎癥反應(yīng),并且IRE1α還有可能通過其他機(jī)制來調(diào)節(jié)自身的表達(dá)來參與炎癥過程;IRE1β和MUC2可能與結(jié)腸上皮的功能維持有關(guān),在腸道炎癥過程中IRE1β和MUC2表達(dá)功能受到抑制而影響炎癥的發(fā)生和發(fā)展。
[Abstract]:Objective to investigate the expression and significance of IRE1 偽 and IRE1 尾 in chronic colitis induced by dextran sulfate (DSS) in mice. Methods female C57BL / 6 mice aged 8 ~ 10 weeks were randomly divided into two groups: control group (n = 10), chronic inflammation group (n = 10), and chronic inflammation group (n = 10) were given 1.0DSS for 7 days and then normal drinking for 14 days as a cycle. The model of chronic colitis in mice was established by three cycles of circulation. The severity of intestinal inflammation was evaluated by disease activity index (Dai), colonic length and HE staining. The expression of inflammatory factors, endoplasmic reticulum stress factor IRE1 偽, non-splicing X-BP1u, splicing XBP1s and mucin 2 mRNA were detected by real-time quantitative PCR. The expressions of IRE1 偽 and MUC2 were detected by immunohistochemistry. Results there was no colitis in the control group, while in the chronic inflammation group, the colonic inflammation appeared at the end of 3 cycles. The results of real-time quantitative PCR showed that the expression of IL-8 and TNF-偽 mRNA in chronic inflammation group was higher than that in control group (P0.05). There was no significant difference in the expression of XBP1s and IRE1 偽 mRNA in chronic inflammation group. The expression of XBP1u mRNA in chronic inflammation group was lower than that in control group (P0.05). IRE1 尾 and MUC2 mRNA in chronic inflammation group. The expression of IRE1 偽 protein was significantly lower than that of the control group (P0.05). IRE1 偽 protein was mainly expressed in the brush margin of colonic epithelium. The expression of IRE1 尾 protein and MUC2 protein in the inflammatory group was higher than that in the control group, and the expression of both proteins in the cytoplasm of the inflammatory group was lower than that in the control group (P0.05). Conclusion IRE1 偽 may participate in intestinal inflammation by splicing XBP1, and IRE1 偽 may be involved in the process of inflammation by regulating its own expression. IRE1 尾 and MUC2 may be related to the maintenance of colon epithelium. The expression of IRE1 尾 and MUC2 was inhibited during intestinal inflammation, which affected the occurrence and development of inflammation.
【作者單位】: 河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科;河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院肝膽外科;河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京康復(fù)醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):81370487)
【分類號(hào)】:R574.62
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,本文編號(hào):2106182
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