本文選題：二氫楊梅素 + 葡聚糖硫酸鈉　； 參考：《蘭州大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的:觀察二氫楊梅素治療潰瘍性結腸炎的療效并探討其可能的機制。方法:1.采取隨機數(shù)字表法將60只雌性BALB/c小鼠隨機分為6組,分別為:正常組、模型組、DHM低劑量組、中劑量組、高劑量組和5-氨基水楊酸對照組,每組各10只小鼠。2.于分組當日給予正常組小鼠蒸餾水自行飲用,其余組小鼠給予4%DSS水溶液自行飲用(記為第1天),連續(xù)飲用7日。于飲用4%DSS水溶液當日開始,對DHM低劑量組(50mg/kg/d)、中劑量組(100mg/kg/d)、高劑量組(200mg/kg/d)及5-氨基水楊酸對照組(50mg/kg/d)按各組擬定劑量分別進行灌胃治療,連續(xù)給藥14天。3.從飲用4%DSS溶液第1日起,每天稱量小鼠體重,觀察小鼠活動、毛色、大便的形狀、顏色以及精神狀態(tài)并記錄,根據(jù)每日記錄結果,對各組小鼠疾病活動指數(shù)(DAI)進行測評。4.于給藥第14天采用頸椎脫位法處死實驗小鼠,游離小鼠全結腸和脾臟,肉眼觀察游離下來的小鼠結腸外觀,測量并記錄小鼠結腸長度、稱取脾臟重量并計算脾臟指數(shù);HE染色后光學顯微鏡下觀察,并進行小鼠結腸組織學評分;Western blot法檢測各組小鼠結腸組織中TLR2、TLR4的表達;EMSA檢測小鼠結腸組織中NF-κB的活性;ELISA法測定DHM治療前后腸組織炎性細胞因子IL-1β、TNF-a、IL-6含量;試劑盒測定腸組織MPO、NO、SOD的活性變化。結果:1.DAI評分:與正常組對比,模型組評分[(8.33±0.52)vs 0]顯著增加,有統(tǒng)計學差異(p0.01);DHM低劑量組、中劑量組、高劑量組與模型組相比[(7.86±1.21)、(6±0)、(4.57±0.53)、(4.71±0.49)vs(8.33±0.52)]均下降,其中DHM低劑量治療組無明顯統(tǒng)計學差異(p0.05),其余各組均具有顯統(tǒng)計學差異(p0.01);DHM高劑量組與5-氨基水楊酸對照組之間[(4.71±0.49)vs(8.33±0.52)]無統(tǒng)計學差異(p0.05)。2.結腸長度:與正常組對比,模型組小鼠結腸長度比較有統(tǒng)計學意義(p0.05);DHM各劑量組與模型組相比[(8.8±0.85)、(8.8±0.95)、(8.89±0.93)vs(7.77±0.43)]縮短延緩,比較具有統(tǒng)計學意義(p0.05);DHM高劑量組與5-氨基水楊酸對照組之間[(8.89±0.93)vs(8.56±1.13)]無統(tǒng)計學差異(p0.05)。3.脾臟指數(shù):與正常組對比,模型組小鼠脾臟指數(shù)比較顯著升高,有統(tǒng)計學意義(p0.01);DHM各劑量組與模型組相比[(5.64±0.94)、(5.88±1.26)、(5.81±0.66)vs(7.01±0.96)]均下降,比較有統(tǒng)計學意義(p0.05);DHM高劑量組與5-氨基水楊酸對照組之間[(5.81±0.66)vs(5.59±1.78)]無統(tǒng)計學差異(p0.05)。4.病理組織學評分:與正常組相比較,模型組病理學評分升高,比較有顯著的統(tǒng)計學意義(p0.01);DHM各劑量組與模型組相比[(7.00±0.82),(4.85±0.69),(2.71±0.76)vs(7.33±0.52)]均下降,比較有統(tǒng)計學意義(p0.05);DHM高劑量組與5-氨基水楊酸對照組之間[(2.71±0.76)vs(2.29±0.76)]無統(tǒng)計學差異(p0.05)。5.EMSA法檢測小鼠結腸組織中NF-κB的活性:與正常組相比,模型組小鼠結腸組織NF-κB活性明顯升高(p0.01);DHM各劑量組對NF-κB均具有顯著的抑制作用(p0.01),而高劑量組與水楊酸對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(p0.01)。6.Western blot法檢測小鼠結腸組織中TLR2、TLR4的表達:與正常組相比,模型組小鼠結腸組織TLR2、TLR4蛋白表達水平明顯升高(p0.01);DHM各劑量組小鼠腸組織TLR-2、TLR-4蛋白表達水平均有所降低(p0.05),其中DHM高劑量組顯著抑制了腸組織中TLR-2、TLR-4的高表達(p0.01),治療效果與5-氨基水楊酸相當。7.ELISA法檢測結腸組織炎性因子IL-1β、TNF-a、IL-6的含量:檢測結果顯示,模型組炎性因子IL-1β、TNF-a、IL-6的含量顯著升高,與正常組相比較,具有顯著的統(tǒng)計學差異(p0.01);DHM各組與模型組比較,炎性因子含量顯著下降,比較有統(tǒng)計學意義。而DHM高劑量組與5-氨基水楊酸對照組之間無顯著統(tǒng)計學差異(p0.05)。8.檢測MPO、NO、SOD的活性變化:與正常組相比,模型組中MPO、NO活性顯著升高(p0.01),SOD活性顯著下降(p0.01);DHM各劑量組和5-氨基水楊酸對照組中SOD、MPO活性與模型組相比均有統(tǒng)計學意義(p0.05),而NO活性與模型組相比較,差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);DHM高劑量組、5-氨基水楊酸對照組與模型組相比,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。結論:1.DHM可以有效緩解DSS誘導的小鼠結腸炎癥;2.DHM治療結腸炎的可能機制有:(1)通過抑制TLRs/NF-κB通路,抑制炎癥因子的產(chǎn)生;(2)通過抑制NO,保護SOD活性減輕DSS誘發(fā)的氧化應激反應;(3)通過抑制MPO活性;3.DHM有可能成為臨床治療潰瘍性結腸炎的候選藥物之一。
[Abstract]:Objective : To observe the therapeutic effect of dihydroyangmein on ulcerative colitis and explore its possible mechanism . Methods : 1 . 60 female BALB / c mice were randomly divided into 6 groups : normal group , model group , DHM low - dose group , middle - dose group , high - dose group and 5 - aminosalicylic acid control group . There was no significant difference in the spleen index between the DHM high - dose group and the model group ( 5.81 鹵 0 . 93 ) vs ( 8.33 鹵 0 . 52 ) vs ( 5.81 鹵 0 . 93 ) vs ( 8.33 鹵 0 . 52 ) vs ( 5.81 鹵 0 . 93 ) vs ( 8.33 鹵 0 . 52 ) . The levels of TLR - 2 and TLR - 4 in colon tissue of model group were significantly higher than those in normal group ( p < 0.05 ) .
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R574.62

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本文編號：2055558