本文選題：自身免疫性肝炎 + IL-17　； 參考：《天津醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：目的： 觀察自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)小鼠白介素-17(interleukin-17,IL-17)和叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子3(forkhead transcription factor, Foxp3)在肝臟及腸道的表達(dá)情況,并在此基礎(chǔ)上探討AIH小鼠肝臟與腸道免疫損傷的關(guān)系以及輔助性T細(xì)胞17型(T help cell17, Th17)和CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory CD4+CD25+T cells, Tregs)在AIH發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法： 1.造模雌性Balb/c小鼠6-7周齡,共12只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(6只)與對(duì)照組(6只)。實(shí)驗(yàn)組小鼠經(jīng)尾靜脈注射刀豆蛋白A (Con A)12.5mg/kg,每周一次,連續(xù)注射4周；對(duì)照組不作處理,兩組飼養(yǎng)環(huán)境相同。 2.4周后處死小鼠并取其肝臟及小腸組織標(biāo)本速凍,采用RT-PCR方法檢測(cè)IL-17及Foxp3在肝臟及小腸的表達(dá)情況；取肝臟及小腸組織經(jīng)10%甲醛固定,常規(guī)包埋、切片后行蘇木精-伊紅(HE)染色病理檢查及免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)IL-17、Foxp3表達(dá)情況。 3.比較分析實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組肝臟及小腸組織IL-17、Foxp3表達(dá)情況,對(duì)比兩組小鼠肝臟及小腸炎癥情況,探討IL-17和Foxp3在AIH發(fā)病過程中的作用。 4.所有資料應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.成功建立小鼠AIH實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟HE染色顯示肝臟組織的炎癥反應(yīng)主要表現(xiàn)為大量的淋巴細(xì)胞以及少量的中性粒細(xì)胞的浸潤,肝小葉結(jié)構(gòu)明顯破壞,出現(xiàn)肝細(xì)胞水腫、氣球樣變、點(diǎn)狀壞死甚至碎片狀壞死等表現(xiàn)；而對(duì)照組肝組織結(jié)構(gòu)基本正常。 2. RT-PCR結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組小鼠肝組織中IL-17mRNA基因的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(3.79±0.90VS1.00±0.00),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；實(shí)驗(yàn)組小鼠肝組織中的Foxp3mRNA基因的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(0.13±0.03VS1.00±0.00),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)； 3. RT-PCR結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組小鼠小腸組織中IL-17mRNA基因的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(4.32±1.00VS1.00±0.00),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；實(shí)驗(yàn)組小鼠小腸組織中的Foxp3mRNA基因的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(0.21±0.13VS1.00±0.00),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4.病理組織切片HE染色發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組小腸組織病理評(píng)分為中重度炎癥表現(xiàn),對(duì)照組為無到輕度炎癥表現(xiàn)。 5.免疫組織化學(xué)染色顯示,實(shí)驗(yàn)組小鼠肝組織及小腸組織中IL-17的表達(dá)明顯上調(diào),而對(duì)照組肝組織及小腸組織中沒有或僅有少量IL-17表達(dá)(肝中評(píng)分4.83±1.17VS0.33±0.52；小腸中評(píng)分6.83±1.17VS0.67±0.52)；對(duì)照組小鼠肝組織及小腸組織中可見散在分布的Foxp3表達(dá),而實(shí)驗(yàn)組小鼠肝組織及小腸組織中雖有大量淋巴細(xì)胞浸潤,但表達(dá)的Foxp3明顯少于對(duì)照組,且染色變淺(肝中評(píng)分0.50±0.84VS1.83±0.75；小腸中評(píng)分1.17±0.75VS5.17±1.47)。 6.相關(guān)性分析結(jié)果顯示：肝組織和小腸組織中IL-17mRNA表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.903,P0.05)；肝組織和小腸組織中Foxp3mRNA表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.973,P0.05)。 結(jié)論： 1.AIH小鼠肝組織中IL-17表達(dá)顯著升高,提示Th17上調(diào)；AIH小鼠肝組織中Foxp3表達(dá)顯著降低,提示Tregs下調(diào)。 2.AIH小鼠小腸組織中IL-17表達(dá)顯著升高,提示Th17上調(diào)；AIH小鼠小腸組織中Foxp3表達(dá)顯著降低,提示Tregs下調(diào)。 3.AIH小鼠肝組織和小腸組織Th17上調(diào)趨勢(shì)一致,AIH小鼠肝組織和小腸組織Tregs下調(diào)趨勢(shì)一致,提示肝臟免疫損傷和腸道免疫損傷之間存在某種關(guān)系,但具體機(jī)制未明,有待進(jìn)一步研究。 4.Th17和Tregs表達(dá)失衡可能是肝臟和腸道免疫炎癥損傷的重要因素,在AIH的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用,重建這一平衡可能延緩AIH的進(jìn)展。
[Abstract]:Objective:
To observe the expression of interleukin -17 (interleukin-17, IL-17) and fork head transcription factor 3 (forkhead transcription factor, Foxp3) in the liver and intestines of autoimmune hepatitis (AIH) mice, and to explore the relationship between liver and intestinal immune damage in AIH mice and the auxiliary T cells type 17. 17, Th17) and CD4+CD25+ regulatory T cells (regulatory CD4+CD25+T cells, Tregs) play an important role in the development of AIH.
Method錛，

本文編號(hào)：2006767