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甲硫氨酸負荷致同型半胱氨酸輕度升高對大鼠肝臟脂質(zhì)代謝的影響及機制研究

發(fā)布時間:2018-05-30 23:18

  本文選題:甲硫氨酸 + 同型半胱氨酸; 參考:《上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2015年07期


【摘要】:目的了解高甲硫氨酸攝入對肝臟脂質(zhì)代謝的影響及可能機制。方法選取6周齡健康SD雄性大鼠20只,隨機分為對照組和甲硫氨酸負荷組。適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后,對照組飼以正常飲食并采用PBS灌胃,甲硫氨酸負荷組在正常飲食基礎(chǔ)上采用甲硫氨酸灌胃,持續(xù)喂養(yǎng)8周,每周稱取體質(zhì)量,處死后收集血液和肝臟組織。肝臟稱重并計算臟器系數(shù);肝組織切片H-E染色進行組織學(xué)觀察;血生化分析儀測定血清生化指標(biāo);采用ELISA法測定血清同型半胱氨酸水平;real-time PCR檢測大鼠肝組織脂代謝相關(guān)酶基因的表達水平。在體外培養(yǎng)的Hep G2細胞,油紅O染色光學(xué)顯微鏡觀察甲硫氨酸負荷或同型半胱氨酸處理對細胞中脂質(zhì)沉積的影響,Western blotting檢測同型半胱氨酸處理后細胞中成熟型肝組織甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c(n-SREBP1c)表達的變化。結(jié)果甲硫氨酸負荷組與對照組大鼠體質(zhì)量的增長無明顯差異,但甲硫氨酸負荷組的臟器系數(shù)顯著高于對照組(P0.05);甲硫氨酸負荷組大鼠肝臟出現(xiàn)輕微小泡性脂肪變性,但未出現(xiàn)炎癥和明顯肝功能損害;甲硫氨酸負荷組大鼠血清同型半胱氨酸、血清總膽固醇及高密度脂蛋白水平顯著高于對照組(P0.05);甲硫氨酸負荷組肝組織Fas、Acc、Scd1、Cpt1αmRNA表達與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。在甲硫氨酸或同型半胱氨酸作用下,Hep G2細胞發(fā)生明顯的脂質(zhì)蓄積;同型半胱氨酸處理Hep G2細胞n-SREBP1c表達顯著增高。結(jié)論甲硫氨酸攝入過量將導(dǎo)致肝臟輕微脂肪變性,且與血液中同型半胱氨酸水平升高有關(guān)。甲硫氨酸負荷導(dǎo)致的同型半胱氨酸水平輕度升高可通過調(diào)節(jié)肝細胞脂質(zhì)代謝關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的活化,對肝臟脂質(zhì)代謝造成影響。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of high methionine intake on liver lipid metabolism and its possible mechanism. Methods Twenty male SD rats aged 6 weeks were randomly divided into control group and methionine loading group. After 2 weeks of adaptive feeding, the control group was fed with normal diet and fed with PBS, and the methionine loaded group was fed with methionine on the basis of normal diet. The rats were continuously fed with methionine for 8 weeks. The body weight was taken out every week, and the blood and liver tissues were collected after death. The liver was weighed and the organ coefficient was calculated; H-E staining of liver sections was performed for histological observation; serum biochemical indexes were measured by blood biochemistry analyzer; Serum homocysteine level was measured by ELISA method and real-time PCR was used to detect the expression of lipid metabolism-related enzymes in rat liver tissue. Hep G2 cells cultured in vitro, Effects of methionine loading or homocysteine treatment on lipid deposition in cells were observed by oil red O staining optical microscope. The expression of sterol regulatory element binding protein 1cnSREBP1c in mature liver tissue was detected by Western blotting after homocysteine treatment. Results there was no significant difference in the growth of body mass between the methionine loading group and the control group, but the organ coefficient of the methionine loading group was significantly higher than that of the control group (P 0.05), and the slight vesicular steatosis appeared in the liver of the methionine loading group. However, there was no inflammation and obvious liver function damage, and the serum homocysteine level in methionine loading group was higher than that in the control group. The levels of serum total cholesterol and high density lipoprotein were significantly higher than those of the control group (P 0.05), and the expression of Cpt1 偽 mRNA in the liver tissue of the methionine loading group was not significantly different from that of the control group (P 0.05). Under the action of methionine or homocysteine, the lipid accumulation in Hep G2 cells was obvious, and the n-SREBP1c expression in Hep G2 cells treated with homocysteine was significantly increased. Conclusion excessive intake of methionine may lead to mild steatosis of the liver and may be associated with increased homocysteine levels in the blood. The slight increase of homocysteine level induced by methionine load may affect hepatic lipid metabolism by regulating the activation of key transcription factors of lipid metabolism in hepatocytes.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院醫(yī)學(xué)與社會研究中心健康領(lǐng)域社會風(fēng)險預(yù)測治理協(xié)同創(chuàng)新中心;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院糖脂代謝中心;
【分類號】:R575

【共引文獻】

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本文編號:1957258

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