慢性HBV感染者血清IFN-λs的表達與HBV DNA、HBeAg濃度關(guān)系
本文選題:干擾素λ + 慢性HBV感染; 參考:《山東大學(xué)》2016年碩士論文
【摘要】:目的:通過檢測慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染者血清中干擾素λs (Interferon-λ, IFN-λ,包括IFN-λ1, IFN-λ2和IFN-λ3)的表達,并根據(jù)血清乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)濃度和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)濃度進行具體分組分析,探討慢性HBV感染者血清中IFN-λs表達與HBeAg和HBV DNA濃度的關(guān)系,為深入了解IFN-λs在HBV感染者體內(nèi)表達調(diào)控特點及機制提供理論依據(jù)。方法:1.臨床標(biāo)本收集:選取2014年1月-2016年02月在山東省千佛山醫(yī)院住院的慢性HBV感染者80例作為實驗組,其中又根據(jù)HBV DNA定量和HBeAg結(jié)果進行具體分組,PCR檢測血清HBV DNA濃度,低于檢測下限者(100IU/ml)為HBV DNA陰性組,HBV DNA陽性組和HBV DNA陰性組各40例,其中又分別包括HBeAg陽性組和HBeAg陰性組各20例,并且根據(jù)HBV DNA濃度梯度分布進行分組分析,另選取20例健康志愿者靜脈血作為對照組。用雙抗體夾心ELISA法分別檢測血清中IFN-λs(含IFN-λ1、IFN-λ2、IFN-λ3)水平,分析血清IFN-λs表達與HBV DNA、HBeAg濃度的關(guān)系。2. HBV DNA測定:以PCR-熒光探針法檢測血清HBV DNA,最低檢測下限為100IU/ml,嚴格按照ABI Prism 7300設(shè)定程序進行擴增。3.血清HBV標(biāo)志物檢測:HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe及抗-HBc均用cobase601全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測。4. IFN-λs濃度測定:以ELISA法檢測血清IFN-λ1、IFN-λ2和IFN-λ3濃度,試劑盒購自上海源葉股份有限公司,具體操作嚴格按說明進行。5.統(tǒng)計學(xué)分析:采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,其中計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準差(x±s)表示,兩組間均數(shù)的比較采用獨立樣本t檢驗(Independent-Sample t Test)的方法,以P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1.與正常對照組相比較,慢性HBV感染組中IFN-λs的表達水平均明顯升高,P均0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.HBV DNA陰性患者中HBeAg陽性組IFN-λs的表達水平均明顯高于HBeAg陰性組,P均0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。3.HBV DNA陽性患者中,HBeAg陽性組與HBeAg陰性組IFN-Xs的表達水平未見顯著差異(P0.05);4.HBeAg陽性患者中HBV DNA陽性組IFN-λs表達水平均明顯低于HBV DNA陰性組(P均0.01),且HBV DNA陽性患者中,當(dāng)HBV DNA濃度高于108時,IFN-λs水平均明顯降低(P均0.05)。結(jié)論:1.本研究慢性HBV感染組IFN-λs表達水平明顯高于正常對照組,提示慢性HBV感染可能刺激機體自身IFN-λs的表達。2.當(dāng)HBV DNA陰性時,HBeAg陽性組IFN-λs的表達水平均明顯高于HBeAg陰性組,提示當(dāng)HBV DNA低于檢測下限時,HBeAg陽性組體內(nèi)可能仍有HBV的低度復(fù)制,且能夠刺激IFN-λs的表達。3.本研究HBV DNA陽性時HBeAg陽性組與HBeAg陰性組IFN-λs的表達水平未見顯著差異,HBeAg陽性患者中,HBV DNA濃度高于108時,IFN-λs表達水平顯著下降,提示體內(nèi)HBV DNA的低度復(fù)制可能刺激IFN-λs的表達,但當(dāng)HBVDNA復(fù)制達到一定濃度時可能會抑制IFN-λs的表達,IFN-λs的表達與機體的免疫狀態(tài)密切相關(guān)。
[Abstract]:Objective: to detect the expression of Interferon- 位, IFN- 位, including IFN- 位 _ 1, IFN- 位 _ 2 and IFN- 位 _ 3 in sera of patients with chronic hepatitis B virus hepatitis B virus, HBV). The relationship between the expression of IFN- 位 s and the concentration of HBeAg and HBV DNA in the serum of patients with chronic HBV infection was studied by specific grouping analysis according to the concentration of hepatitis B virus DNA(HBV DNA and the concentration of hepatitis B virus e antigen HBeAg. To provide theoretical basis for further understanding IFN- 位 s expression and regulation characteristics and mechanism in HBV infected persons. Method 1: 1. Clinical specimen collection: 80 cases of chronic HBV infection hospitalized in Qianfushan Hospital of Shandong Province from January 2014 to February 2016 were selected as experimental group, in which serum HBV DNA concentration was detected by specific grouping PCR according to quantitative HBV DNA and HBeAg results. There were 40 cases in HBV DNA negative group and 40 cases in HBV DNA negative group, including 20 cases in HBeAg positive group and 20 cases in HBeAg negative group, respectively. Another 20 healthy volunteers were selected as control group. The level of IFN- 位 s (including IFN- 位 1, IFN- 位 2, IFN- 位 3) in serum was detected by double antibody sandwich ELISA method. The relationship between the expression of IFN- 位 s and the concentration of HBeAg in HBV DNA was analyzed. HBV DNA determination: serum HBV DNA was detected by PCR- fluorescence probe method. The lowest detection limit was 100U / ml, and the amplification was carried out strictly according to the program of ABI Prism 7300. Serum HBV markers were detected by cobase601 automatic electrochemiluminescence immunoassay (cobase601) for detection of HBeAg, anti-HBs, anti-HBe and anti-HBc. Determination of IFN- 位 s concentration: serum IFN- 位 1, IFN- 位 2 and IFN- 位 3 concentrations were detected by ELISA method. The kit was purchased from Shanghai Yuanye Co., Ltd. Statistical analysis: SPSS17.0 statistical software was used to analyze the data, in which the measurement data were expressed as mean 鹵standard deviation x 鹵s, and the comparison between the two groups was conducted by independent sample t-test method, with P0.05 as the difference. The result is 1: 1. Compared with the normal control group, The expression level of IFN- 位 s in chronic HBV infection group was significantly higher than that in HBeAg negative group (P 0.05), the difference was statistically significant. 2. The expression level of IFN- 位 s in HBeAg positive group was significantly higher than that in HBeAg negative group (P 0.05), the difference was statistically significant. 3. HBV-positive DNA expression in HBeAg positive group was significantly higher than that in HBeAg negative group (P < 0.05). There was no significant difference in the expression of IFN-Xs between HBeAg-positive group and HBeAg negative group. 4. The expression level of IFN- 位 s in HBeAg-positive group was significantly lower than that in HBV DNA negative group (P 0.01), and in HBV DNA positive group, the expression of IFN- 位 s in HBeAg positive group was significantly lower than that in HBV DNA negative group. When the concentration of HBV DNA was higher than 108, the level of IFN- 位 s decreased significantly. Conclusion 1. In this study, the expression of IFN- 位 s in chronic HBV infection group was significantly higher than that in normal control group, suggesting that chronic HBV infection might stimulate the expression of IFN- 位 s. The level of IFN- 位 s expression in HBeAg-positive group was significantly higher than that in HBeAg negative group when HBV DNA was negative, suggesting that there might still be low replication of HBV in HBeAg-positive group when HBV DNA was lower than the lower limit, and it could stimulate the expression of IFN- 位 s. 3. In this study, there was no significant difference in the expression of IFN- 位 s between HBeAg positive group and HBeAg negative group in HBV DNA positive group. The level of IFN- 位 s expression in HBeAg-positive patients was significantly lower than that in HBeAg-positive group, suggesting that the low replication of HBV DNA in vivo might stimulate the expression of IFN- 位 s. However, when HBVDNA replication reached a certain concentration, the expression of IFN- 位 s might be inhibited. The expression of IFN- 位 s might be closely related to the immune state of the body.
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R512.62
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,本文編號:1897257
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