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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞尾靜脈注射治療大鼠肝損傷的效果及機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2018-05-16 04:12

  本文選題:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 + 肝損傷; 參考:《山東醫(yī)藥》2017年03期


【摘要】:目的 觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞尾靜脈注射治療大鼠肝損傷的效果,并探討其機(jī)制。方法 將30只SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組和治療組,每組10只。模型組和治療組大鼠用連續(xù)4個(gè)月皮下注射D-半乳糖的方法成功制備大鼠肝損傷模型。治療組大鼠造模成功后尾靜脈注射3×106個(gè)用綠色熒光蛋白標(biāo)記的間充質(zhì)干細(xì)胞,對(duì)照組注射同等劑量的生理鹽水。3 d后檢測(cè)各組大鼠血清天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)。處死各組大鼠,取肝組織制備冰凍切片,熒光顯微鏡下觀察間充質(zhì)干細(xì)胞分布,行HE染色觀察肝組織病理結(jié)構(gòu);取肝組織制成勻漿,用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD),用硫代巴比妥酸法檢測(cè)丙二醛(MDA),采用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)肝組織中的p53、p21 mRNA。結(jié)果 治療組大鼠注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后3 d,熒光顯微鏡下可見帶綠色熒光的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞散在于肝臟內(nèi)。光鏡下觀察,對(duì)照組大鼠肝細(xì)胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)正常,肝小葉結(jié)構(gòu)正常;模型組大鼠肝組織水腫,細(xì)胞邊緣不完整,肝索排列紊亂,肝小葉結(jié)構(gòu)不清;與模型組比較,治療組大鼠肝細(xì)胞形態(tài)較規(guī)則,肝小葉結(jié)構(gòu)清晰,病理損傷減輕。與對(duì)照組相比,模型組大鼠肝組織中SOD水平降低,MDA水平升高,p53、p21 mRNA表達(dá)上調(diào),血清ALT、AST水平升高(P均0.05)。與模型組相比,治療組大鼠肝組織中SOD水平升高,MDA水平降低,p53、p21 mRNA表達(dá)下調(diào),血清ALT、AST水平降低(P均0.05)。結(jié)論 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靜注能起到治療D-半乳糖誘導(dǎo)的大鼠肝損傷的效果,其機(jī)制可能與下調(diào)大鼠肝組織中p53、p21 mRNA表達(dá)及減輕肝組織氧化應(yīng)激水平有關(guān)。
[Abstract]:Objective to observe the effect of tail vein injection of bone marrow mesenchymal stem cells on liver injury in rats. Methods 30 SD rats were randomly divided into control group, model group and treatment group with 10 rats in each group. Rats in the model group and the treatment group were successfully induced liver injury by subcutaneous injection of D-galactose for 4 months. In the treatment group, 3 脳 106 mesenchymal stem cells labeled with green fluorescent protein were injected into the tail vein after successful modeling. The serum aspartate aminotransferase (AST) and glutamate aminotransferase (alt) were detected in the control group after 3 days of injection with the same dose of normal saline. Rats in each group were killed, liver tissue was taken to prepare frozen sections, mesenchymal stem cells were observed under fluorescence microscope, pathological structure of liver tissue was observed by HE staining, liver tissue was made into homogenate, Superoxide dismutase (SOD) was detected by xanthine oxidase method, malondialdehyde (MDAA) was detected by thiobarbituric acid method, and p53 ~ + p21 mRNA in liver tissue was detected by real-time quantitative PCR. Results 3 days after injection of bone marrow mesenchymal stem cells in the treatment group, the green fluorescent mesenchymal stem cells were found in the liver under fluorescence microscope. Under light microscope, the morphology and structure of hepatocytes and lobules were normal in control group, edema of liver tissue, incomplete cell edge, disordered arrangement of hepatic cord and unclear structure of hepatic lobule in model group. In the treatment group, the morphology of liver cells was regular, the structure of hepatic lobules was clear, and the pathological injury was alleviated. Compared with the control group, the level of SOD in the liver tissue of the model group decreased and the expression of p53 + p21 mRNA was up-regulated, and the level of serum alt was increased (P < 0.05). Compared with the model group, the level of SOD in the liver tissue of the treatment group was increased and the expression of p53, p21 mRNA was down-regulated, while the level of serum alt was decreased in the treatment group (P < 0.05). Conclusion intravenous injection of bone marrow mesenchymal stem cells can treat the liver injury induced by D-galactose in rats. The mechanism may be related to the down-regulation of p53 mRNA expression and the reduction of oxidative stress in liver tissue.
【作者單位】: 福建省立醫(yī)院;
【分類號(hào)】:R551.3

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本文編號(hào):1895389

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