隱匿性HBV感染相關(guān)S基因突變對(duì)HBsAg檢測(cè)的影響及其機(jī)制
本文選題:乙型肝炎病毒 + S基因; 參考:《解放軍醫(yī)學(xué)雜志》2017年10期
【摘要】:目的探討隱匿性HBV感染(OBI)相關(guān)S基因突變對(duì)多種抗-HBs及HBsAg臨床檢測(cè)試劑的反應(yīng)性。方法9種代表性S基因突變株(M1 M9,其中M1 M5為本課題組首次報(bào)道)分離自1例OBI患者和3例OBI獻(xiàn)血人員血清。分別采用野生型及突變型S基因重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,分析9種突變株HBsAg表達(dá)及其突變蛋白對(duì)抗體和檢測(cè)試劑反應(yīng)的影響。結(jié)果采用HBsAg羅氏診斷試劑Elecsys定量檢測(cè)9種突變株胞內(nèi)HBsAg水平,均較野生株的水平明顯下降;相同樣品用抗-His抗體檢測(cè)顯示僅M1、M6和M7的HBsAg-His融合蛋白表達(dá)水平與野生株比較明顯降低。6種抗-HBs與各突變HBsAg的反應(yīng)性結(jié)果(S/CO值)顯示,與野生株相比,多數(shù)突變株與6種抗-HBs的反應(yīng)性明顯降低,M1、M4、M7和M9產(chǎn)生的HBsAg與抗體4及M9產(chǎn)生的HBsAg與抗體6反應(yīng)性最差(S/CO1)。6種商品化HBsAg臨床試劑檢測(cè)結(jié)果顯示,多數(shù)突變株與6種HBsAg試劑反應(yīng)性較野生株明顯降低(P0.05),ELISA試劑D、E和F漏檢率分別為11.1%、22.2%和55.6%。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)涉及的突變HBsAg與抗-HBs的結(jié)合力降低是引起OBI表現(xiàn)的主要原因之一。當(dāng)前臨床常用HBsAg檢測(cè)試劑對(duì)突變HBsAg的檢測(cè)能力存在明顯不足,亟待提高。
[Abstract]:Objective to investigate the reactivity of S gene mutations associated with occult HBV infection to various anti-HBs and HBsAg clinical detection reagents. Methods the serum samples of 9 representative S gene mutants, M 1 M 9 and M 1 M 5, were isolated from 1 OBI patient and 3 OBI donors. Wild type and mutant S gene recombinant plasmids were used to transfect Chinese hamster ovarian cells respectively. The HBsAg expression of 9 mutant strains and the effect of mutant protein on antibody and reagent reaction were analyzed. Results the intracellular HBsAg levels of 9 mutants were detected quantitatively by HBsAg Roche diagnostic reagent Elecsys, which was significantly lower than that of wild strains. The expression level of HBsAg-His fusion protein of M1His M6 and M7 in the same sample was significantly lower than that of wild strain, and the reactivity of 6 kinds of anti-HBs to mutated HBsAg was significantly lower than that of wild strain (S / CO value), and compared with wild strain, the expression level of M1His M6 and M7 fusion protein was significantly lower than that of wild strain. The reactivity of most mutants to six kinds of anti-HBs significantly decreased the HBsAg produced by M1M4M7 and M9 and the HBsAg and antibody 6 produced by antibody 4 and M9. The results of clinical tests of 6 commercial HBsAg reagents showed that the reactivity of most mutants to 6 kinds of anti-HBs was the worst. The reactivity of most mutants to 6 HBsAg reagents was significantly lower than that of wild strains. The leakage rates of DNE and F were 11.1and 55.6%, respectively. Conclusion the decrease of binding force of mutant HBsAg and anti-HBs involved in this study is one of the main causes of OBI. At present, the detection ability of HBsAg for mutated HBsAg is obviously insufficient and needs to be improved.
【作者單位】: 西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染科;解放軍302醫(yī)院臨床研究管理中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81572010,81373136) 首都衛(wèi)生發(fā)展科研專項(xiàng)項(xiàng)目(2016-2-5032) 北京市自然科學(xué)基金(7172206)~~
【分類號(hào)】:R512.62
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