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TLR4在LPS誘導的結(jié)腸炎癥恢復中的作用

發(fā)布時間:2018-04-20 00:16

  本文選題:炎癥性腸病 + Toll樣受體��; 參考:《中國病理生理雜志》2017年02期


【摘要】:目的:研究Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR-4)在結(jié)腸炎癥中的作用,探討LPS在炎癥性腸病中的治療作用。方法:取正常腸上皮細胞進行體外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干預培養(yǎng)。采用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù),構(gòu)建TLR4低表達、正常表達及高表達的腸上皮細胞亞組。正常表達組(normal組)及高表達組(high組)培養(yǎng)基中加入LPS誘導細胞炎癥,刺激時間分別為0、2、4 h。Western blot法檢測TLR4的表達;收集細胞上清液,ELISA檢測各亞組細胞炎癥因子TNF-α、IL-6和IL-8的水平。收集細胞,qPCR檢測細胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1βmRNA的表達水平。劃痕試驗觀察對比2組細胞的遷移能力。結(jié)果:LPS干預培養(yǎng)細胞后,TLR4的表達量顯著增加(P0.05)。ELISA和qPCR檢測高表達組與正常表達組組間細胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1β的蛋白和mRNA水平的差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。劃痕試驗提示TLR4高表達組的細胞遷移能力明顯高于正常對照組。結(jié)論:LPS影響TLR4炎癥通路的活化,促進前炎癥因子及輔助刺激分子的釋放,起到調(diào)節(jié)炎癥反應的作用。
[Abstract]:Objective: to study the role of Toll like receptor 4(Toll-like receptor 4 (TLR 4) in colitis and to explore the therapeutic effect of LPS in inflammatory bowel disease. Methods: normal intestinal epithelial cells were cultured with lipopolysaccharide in vitro. Lentivirus transfection technique was used to construct a subgroup of intestinal epithelial cells with low expression, normal expression and high expression of TLR4. Normal expression group (normal group) and high expression group (high group) were added to the culture medium to induce cell inflammation, the stimulation time was 0 ~ 2G ~ 4 h.Western blot method to detect the expression of TLR4, and the levels of TNF- 偽 IL-6 and IL-8 in each subgroup were detected by Elisa. The expression levels of IL-10 and IL-1 尾 mRNA were detected by qPCR. The migration ability of the two groups was observed by scratch test. Results the expression of TLR4 in cultured cells was significantly increased after the intervention of TNF- 偽, IL-6, IL-8, IL-10 and IL-1 尾, and the levels of mRNA were significantly different between the high expression group and the normal expression group by Elisa and qPCR. Scratch test showed that the cell migration ability of TLR4 high expression group was significantly higher than that of normal control group. ConclusionLipopolysaccharide affects the activation of TLR4 inflammatory pathway, promotes the release of proinflammatory factors and costimulatory molecules, and regulates the inflammatory response.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學附屬廣州市第一人民醫(yī)院胃腸外科;
【基金】:廣州市科技計劃(No.2014Y2-00074) 廣東省自然科學基金資助項目(No.2015A030313729)
【分類號】:R574.62

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