發(fā)布時間：2018-04-16 05:04

  本文選題：酒精性肝病 + CD8~+T細胞��； 參考：《中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：長期飲酒導(dǎo)致酒精性肝病(ALD),例如酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、肝纖維化、肝硬化,甚至肝癌等一系列事件的發(fā)生。酒精性肝病發(fā)生的病理機理十分復(fù)雜,包括乙醇及其有毒代謝產(chǎn)物對肝臟和腸道中各種細胞的作用、活性氧的產(chǎn)生和炎癥級聯(lián)應(yīng)答等。在其他因素,例如黃曲霉素、肥胖、肝炎病毒感染等共同作用下,酒精性肝病發(fā)展為肝癌的危險性顯著增高。在酒精性肝病發(fā)生發(fā)展過程中,除代謝系統(tǒng)外,免疫系統(tǒng)也發(fā)揮著重要的促進作用。目前已有的研究報導(dǎo)酒精暴露通過LPS-TLR4信號活化枯否細胞,釋放大量的促炎性細胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α等細胞因子以及ROS,造成肝臟損傷；進而招募NKT細胞和中性粒細胞,進一步加重酒精性肝病的進展；酒精暴露也會抑制NK/IFN-c的抗纖維化作用,促進肝臟纖維化的發(fā)生。但是在酒精性肝病向酒精性肝癌發(fā)生發(fā)展過程中,免疫系統(tǒng)是如何發(fā)揮作用?特別是免疫細胞的變化以及細胞間的相互作用目前還不清楚。本研究利用不同的小鼠酒精飼喂模型對免疫細胞在酒精性肝病及酒精性肝癌中的作用進行了初步探究,主要結(jié)果如下。1.長期飲酒加快肝細胞癌發(fā)展的免疫機制我們利用多次腹腔注射二乙基亞硝胺(DEN)刺激成年野生型C57BL/6雄鼠誘導(dǎo)肝細胞癌,并且在誘癌4.5個月時給予5%(V/V)酒精液體飼料和對照液體飼料飼喂。飼喂2.5個月后,即誘癌7個月時,觀察到酒精飼喂小鼠組肝臟腫瘤較對照組明顯增大。長期飲酒后,血清ALT升高,肝臟IL-6、IL-17A表達升高,說明長期飲酒加重肝臟炎癥；qPCR檢測到長期飲酒上調(diào)肝臟TIMP1、col1a1、MMP2、α-SMA、GFAP表達,說明長期飲酒加快肝臟纖維化；肝臟E-cadherin、snail、MMP9表達升高,暗示長期飲酒后肝臟上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)變作用增強；通過流式細胞術(shù)檢測肝臟免疫細胞比例,發(fā)現(xiàn)長期飲酒促進肝臟巨噬細胞比例和絕對數(shù)顯著增加,并且呈現(xiàn)M2表型；此外,長期飲酒使得肝臟CD8+T細胞比例和絕對數(shù)顯著降低。結(jié)論:結(jié)果暗示在DEN誘導(dǎo)肝臟腫瘤的過程中,長期飲酒一方面促進肝臟病理損傷,另一方面減少CD8+T細胞,削弱抗腫瘤免疫作用；增加巨噬細胞數(shù)目,且巨噬細胞具有M2的特征,從而增強促腫瘤免疫應(yīng)答,最終促進肝臟腫瘤的進展。2.酒精性肝病中NKT10細胞對NK細胞的負調(diào)機制已有報道在肝臟纖維化中,NK細胞通過IFN-γ抵御疾病進展。我們在C57BL/6雌鼠中,采取chronic-binge酒精性脂肪肝模型,通過清除NK細胞,發(fā)現(xiàn)脂肪肝(指標(biāo)為肝臟甘油三酯含量和病理性脂肪空泡)顯著加重,肝臟炎癥水平(指標(biāo)為血清ALT)明顯降低；在IFN(?)缺失的GKO鼠中發(fā)現(xiàn)酒精性脂肪肝和炎癥水平較對照鼠均明顯加重,用IFN-γ體外刺激小鼠原代肝實質(zhì)細胞,脂質(zhì)代謝相關(guān)基因(Srebp-1,Fas,Acc,Gpat,Scd1和FAT)表達上調(diào),提示NK細胞和IFN(?)在抑制早期酒精性肝病中發(fā)揮重要作用。隨后我們在IL-10缺陷(IL-10~（-/-）)小鼠中發(fā)現(xiàn),NK細胞數(shù)目和功能明顯增加,酒精性脂肪肝病癥明顯減輕,當(dāng)清除該鼠的NK細胞后,小鼠脂肪肝癥狀明顯加重,結(jié)果提示IL-10分子可能通過抑制NK細胞的功能和數(shù)目,從而加重酒精性脂肪肝。本實驗室前期研究表明在chronic-binge模型中,肝臟iNKT細胞分泌IL-10的能力顯著增強。為此我們采用iNKT細胞缺失的Jα18-/-小鼠轉(zhuǎn)輸WT iNKT細胞和IL-10~（-/-）iNKT細胞,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)輸WT iNKT細胞后,NK細胞數(shù)目和功能顯著受到抑制,而轉(zhuǎn)輸IL-10~（-/-）iNKT細胞后,則對NK細胞數(shù)目和功能沒有顯著影響,提示在酒精性脂肪肝中,肝臟iNKT細胞通過分泌IL-10抑制NK細胞的功能。結(jié)論:在chronic-binge模型中,肝臟NK細胞發(fā)揮著保護早期酒精性脂肪肝的作用,而iNKT細胞通過分泌IL-10抑制NK細胞的功能,從而加重酒精性脂肪肝。
[Abstract]:Alcohol exposure causes alcoholic liver disease ( ALD ) , such as alcoholic fatty liver , alcoholic hepatitis , liver fibrosis , liver cirrhosis , and even liver cancer .
Furthermore , NKT cells and neutrophils were recruited to further aggravate the progression of alcoholic liver disease .
Alcohol exposure also inhibited the anti - fibrosis effects of NK / IFN - c and promoted the development of liver fibrosis . However , it was not clear how the immune system plays a role in the development of alcoholic liver disease .
The expression of TIMP1 , col1a1 , MMP2 , 偽 - SMA and GFAP was detected by qPCR .
The expression of E - cadherin , MMP - 9 and MMP - 9 in the liver increased , suggesting that the transformation of liver epithelium was enhanced after long - term drinking .
The proportion of hepatic cellular immune cells was detected by flow cytometry . It was found that long - term drinking promoted the increase of the proportion and absolute number of hepatic macrophages and showed the phenotype of M2 .
Conclusion : Long - term alcohol drinking can decrease the proportion and absolute number of CD8 + T cells in liver . Conclusion : Long - term alcohol drinking can promote the pathological injury of liver on the one hand and decrease the CD8 + T cell and weaken the anti - tumor immune function .
In C57BL / 6 female mice , chronic - alcoholic fatty liver model was used to detect fatty liver ( index : hepatic triglyceride content and pathological fat vacuolation ) , and the level of liver inflammation ( the serum ALT ) was significantly decreased .
In this study , we found that the number and function of NK cells increased significantly , and the number and function of NK cells were significantly increased .

【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R575

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 凌奇荷,卿篤信;重視對酒精性肝病的研究[J];中華消化雜志;2001年09期

2 王炳元,傅寶玉;酒精性肝病的診斷與治療[J];中華肝臟病雜志;2001年05期

3 劉厚鈺;我國酒精性肝病研究現(xiàn)狀與展望[J];中華消化雜志;2002年07期

4 甘天福,丁明權(quán),張光曙;酒精性肝病防治研究現(xiàn)狀[J];人民軍醫(yī);2002年08期

5 陸倫根;酒精性肝病的治療[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2002年07期

6 厲有名;;酒精性肝病的研究進展[J];浙江醫(yī)學(xué)教育;2003年01期

7 李安福,李雪冬;中西醫(yī)結(jié)合治療酒精性肝病的療效觀察[J];郴州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報;2003年04期

8 卿篤信,凌奇荷;酒精性肝病的診斷與治療[J];現(xiàn)代實用醫(yī)學(xué);2003年01期

9 樸熙緒,張媛;酒精性肝病的診斷[J];胃腸病學(xué);2003年05期

10 武景連,富琳巖,錢學(xué)艷;達斡爾族部分居民酒精性肝病的患病情況[J];中華全科醫(yī)師雜志;2003年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 張瑞芬;;中西醫(yī)結(jié)合治療酒精性肝病臨床觀察[A];第十三次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

2 厲有名;;中國酒精性肝病的研究現(xiàn)狀[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

3 徐有青;;酒精性肝病的進展[A];首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)研討會、首屆江西省中西醫(yī)結(jié)合肝病新進展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2008年

4 閻明;;從基礎(chǔ)實驗看酒精性肝病的發(fā)生與治療[A];中華醫(yī)學(xué)會第十六次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

5 劉勛臣;;86例酒精性肝病臨床分析[A];新世紀(jì) 新機遇 新挑戰(zhàn)——知識創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（下冊）[C];2001年

6 厲有名;;我國酒精性肝病的研究現(xiàn)狀[A];新世紀(jì) 新機遇 新挑戰(zhàn)——知識創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（下冊）[C];2001年

7 崔雷;洪陽;周力;;酒精性肝病的診療進展[A];2009年貴州省中西醫(yī)結(jié)合消化系病學(xué)術(shù)交流暨專題學(xué)術(shù)講座論文匯編[C];2009年

8 姚樹坤;;酒精性肝病的中西醫(yī)結(jié)合治療[A];第二十三屆全國中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議暨消化疾病診治進展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2011年

9 姚樹坤;;酒精性肝病的中西醫(yī)結(jié)合治療[A];全國中西醫(yī)結(jié)合發(fā)展戰(zhàn)略研討會暨中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會成立三十周年紀(jì)念會論文匯編[C];2011年

10 鄭娉娉;王炳元;;非酒精性脂肪性肝病與酒精性肝病的異同[A];第二十次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 吳一福;我國酒精性肝病發(fā)病呈逐年上升趨勢[N];中國醫(yī)藥報;2007年

2 記者 孟凡明;酒精性肝病研究基地在長揭牌[N];吉林日報;2011年

3 本報記者　李娜;警惕酒精性肝病[N];吉林日報;2006年

4 伏新順;酒精性肝病防治[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

5 ;浙江省酒精性肝病流行病學(xué)調(diào)查概況[N];中國醫(yī)藥報;2003年

6 孫克偉;警惕酒精性肝炎[N];大眾衛(wèi)生報;2007年

7 葉建平;我國酒精性肝病發(fā)病率上升[N];中國中醫(yī)藥報;2008年

8 本報記者 王建影;飲酒無度必成“酒精肝”[N];保健時報;2004年

9 保健時報特約記者 朱麗麗;酒精性肝病是慢性損傷[N];保健時報;2007年

10 河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院 教授 張明輝;莫讓酒精傷你肝[N];家庭醫(yī)生報;2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 趙海洋;鼠李糖乳桿菌對酒精性肝病的預(yù)防作用及分子機制研究[D];南京理工大學(xué);2016年

2 陸春風(fēng);姜黃素逆轉(zhuǎn)酒精性肝纖維化的作用及機理研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2017年

3 閆國秀;酒精性肝病免疫機制探索[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2017年

4 閻明;乙醇所致線粒體損傷與酒精性肝病機制的研究[D];山東大學(xué);2006年

5 陳衛(wèi)星;酒精性肝病的分子流行病學(xué)調(diào)查和發(fā)病機理的研究[D];浙江大學(xué);2001年

6 趙翠青;分泌型成纖維細胞生長因子21和19/15在酒精性肝病中的作用調(diào)節(jié)機制[D];吉林大學(xué);2015年

7 金武丕;細胞凋亡相關(guān)基因及因素在大鼠酒精性肝病中的相關(guān)性研究[D];延邊大學(xué);2008年

8 周寧;酒精性肝病發(fā)生發(fā)展的基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2013年

9 崔克樂;天然免疫細胞在酒精性肝病中的作用機制研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2014年

10 孫捷;德惠市飲酒與酒精性肝病流行病學(xué)現(xiàn)況調(diào)查及相關(guān)因素分析[D];吉林大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王曦;肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Iα（CPTIα）在酒精性肝病中發(fā)病機制的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 畢立娟;Lipin-1在酒精性肝病發(fā)病機理中作用的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉元勛;代謝相關(guān)因素及血清TNF-α和E-選擇素與酒精性肝病和/或幽門螺桿菌感染及頸動脈內(nèi)膜厚度關(guān)系的研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2014年

4 楊柳;神經(jīng)酰胺在酒精性肝病發(fā)病機制中作用的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 孫丹丹;階段性改變模式在酒精性肝病患者健康促進生活方式中的應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2016年

6 劉朝云;Grx1調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)谷胱甘肽化在酒精性肝病中的機制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

7 吳圣偉;腸—肝軸在酒精性肝病發(fā)生發(fā)展中的作用[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2016年

8 王俊嶺;ANI及聯(lián)合GGT對酒精性與非酒精性脂肪性肝病的鑒別價值[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

9 李逢源;益生菌鼠李糖乳桿菌GG菌株發(fā)酵液對酒精性肝病保護機制的研究[D];西北大學(xué);2015年

10 孫文亭;酒精性肝病患者脈象要素分析[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2015年

，

本文編號：1757401