適用于中國人群的隱匿性乙肝病毒感染的檢測方法優(yōu)化研究
本文選題:乙肝病毒 切入點:隱匿性感染 出處:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年10期
【摘要】:隱匿性乙肝病毒感染的診斷,通常使用巢式PCR的方法,來檢測血清中的HBV DNA。因中國人群感染乙肝病毒的基因型與國外人群存在差異,故本研究的目的是對現(xiàn)有文獻(xiàn)已經(jīng)介紹的診斷隱匿性乙肝病毒感染的PCR檢測方法進(jìn)行優(yōu)化,從而適用于中國隱匿性乙肝病毒感染人群的診斷。本研究通過對文獻(xiàn)報道的巢式PCR檢測方法進(jìn)行驗證,發(fā)現(xiàn)其Core/pre-core區(qū)段擴(kuò)增結(jié)果不理想,故根據(jù)我國乙肝病毒的基因型以及HBV C基因的保守性原則自行設(shè)計優(yōu)化實驗。利用臨床收集的HBV陽性樣本驗證其靈敏度及特異度;收集父親或/和母親為HBV陽性患者,而孩子HBs Ag結(jié)果為陰性的樣本來驗證其擴(kuò)增結(jié)果。本研究優(yōu)化設(shè)計的檢測HBV C基因的引物,具有靈敏度高特異性好的優(yōu)點。本研究臨床收集了100份父親或/和母親為HBV陽性患者,而孩子HBs Ag結(jié)果為陰性的血清樣本,用本研究優(yōu)化后的引物檢測,可以提高隱匿性乙肝病毒的檢測分辨率,提高了4倍的檢測效率。本研究優(yōu)化設(shè)計的隱匿性乙肝病毒感染的引物可以用于中國人群中隱匿性乙肝病毒感染的檢測,具有較高的靈敏度和特異性。
[Abstract]:In the diagnosis of occult hepatitis B virus infection, nested PCR is usually used to detect HBV DNA in serum.Because the genotype of hepatitis B virus infection in Chinese population is different from that in foreign population, the purpose of this study is to optimize the PCR detection method for the diagnosis of occult hepatitis B virus infection, which has been introduced in the existing literature.Thus it is suitable for the diagnosis of occult hepatitis B virus infection in China.This study verified the nested PCR detection method reported in literature and found that the amplification results of Core/pre-core region were not satisfactory. Therefore, the optimal experiment was designed according to the genotype of hepatitis B virus and the conservative principle of HBV C gene in China.The sensitivity and specificity of HBV positive samples were verified by clinical samples, and the amplification results were verified by collecting samples whose father or / and mother were HBV positive and children were HBs Ag negative.The optimized primer for detecting HBV C gene has the advantages of high sensitivity and good specificity.In this study, we collected 100 serum samples whose father or / and mother were HBV positive and their children were HBs Ag negative. The detection resolution of occult hepatitis B virus could be improved by using the optimized primers.The detection efficiency is increased by 4 times.The primers optimized in this study can be used for the detection of occult hepatitis B virus infection in Chinese population with high sensitivity and specificity.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒科研究所兒童發(fā)育疾病研究教育部重點實驗室兒童發(fā)育重大疾病國家國際科技合作基地兒童感染免疫重慶市重點實驗室;十堰市太和醫(yī)院(湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院)兒童醫(yī)療中心PICU;貴州省人民醫(yī)院兒科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81371876) 重慶市衛(wèi)生局重點項目(2013-39-1-025) 重慶市高等學(xué)校優(yōu)秀人才資助計劃(2014-47-1-11)共同資助
【分類號】:R512.62
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,本文編號:1715960
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