本文選題：結(jié)核分枝桿菌-M.tb　切入點(diǎn)：Rv　出處：《病毒學(xué)報(bào)》2017年03期

【摘要】：為研究結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)與丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染之間的相關(guān)關(guān)系,本文研究毒性毒株M.tb H37Rv的RD13區(qū)中的Rv2645基因?qū)γ庖呒?xì)胞中干擾素刺激基因(Interferonstimulated gene 15,ISG15)表達(dá)的影響,進(jìn)而探討ISG15的表達(dá)與HCV感染之間的相關(guān)性。利用攜帶Rv2645基因的無毒牛結(jié)核分枝桿菌卡介苗(Bacille calmette guerin,BCG)(即rBCG::Rv2645,rBCG)與親本BCG分別感染小鼠或刺激小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7,運(yùn)用RT-qPCR以及蛋白印跡的方法檢測(cè),比較rBCG與BCG感染對(duì)小鼠CD4+T細(xì)胞及RAW264.7細(xì)胞中ISG15的mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。同時(shí)克隆ISG15真核表達(dá)質(zhì)粒和ISG15的沉默表達(dá)質(zhì)粒-ISG15-shRNA,運(yùn)用RT-qPCR及蛋白印跡分別檢測(cè)ISG15過表達(dá)及沉默后,對(duì)HCV感染的人肝癌細(xì)胞系Huh7.5.1中HCV的mRNA、HCV非結(jié)構(gòu)蛋白NS3及核心蛋白Core的表達(dá)。我們發(fā)現(xiàn)相對(duì)于BCG,攜帶Rv2645的BCG感染之后脾臟CD4+T細(xì)胞及體外RAW264.7中ISG15的mRNA及蛋白質(zhì)的水平明顯升高。此外,ISG15過表達(dá)導(dǎo)致Huh7.5.1中HCV的mRNA、NS3蛋白及Core蛋白的水平明顯升高,而ISG15沉默后ISG15和HCV的mRNA的水平明顯下調(diào)。本研究首次發(fā)現(xiàn)M.tb Rv2645能上調(diào)小鼠CD4+T細(xì)胞及巨噬細(xì)胞中ISG15的表達(dá);而ISG15能促進(jìn)Huh7.5.1中HCV增殖。本研究對(duì)闡明M.tb毒性菌株H37Rv的Rv2645基因的功能,以及為研究MTB感染與HCV感染的分子機(jī)制提供參考依據(jù)。
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本文編號(hào)：1706406